Virus isolation in embryonated eggs

Virus isolation in embryonated eggs
Reverse transcription-polymerase chain reaction
After thawing, total RNA was isolated from the tissue samples, the
faeces (stored in TRIzol® Reagent) and from clarified allantoic fluid
samples. Briefly, 100 mg tissue, 50 m l of the faecal sample or 100 m l
allantoic fluid were homogenized in 300 m l TRIzol® Reagent with a
pestle in a 1.5 ml microtube (Piston Pellet Bleu avec microtube;
Polylabo SA, Geneva, Switzerland), then another 700 m l TRIzol®
Reagent was added. After vortexing, RNA extraction was performed
according to the manufacturer ’s protocol. RNA of each sample was
dissolved in 20 m l sterile RNAse-free water and either stored at –70°C
or directly used for RT-PCR.
The protocol for RT and PCR as described elsewhere (St¨auber et al.,
1995) was used with the following modifications. A different set of

Kết quả (Việt) 1:

Virus bị cô lập trong embryonated trứngPhản ứng chuỗi polymerase sao chép đảo ngượcSau khi tan, tất cả RNA được cô lập từ các mẫu mô, cácphân (được lưu trữ trong TRIzol ® tinh khiết) và từ làm rõ allantoic chất lỏngmẫu. Một thời gian ngắn, 100 mg mô, 50phút l của mẫu hoặc 100 m faecal lallantoic chất lỏng được homogenized trong 300 m l TRIzol ® tinh khiết với mộtpestle trong một microtube 1.5 ml (Piston miếng Bleu avec microtube;Polylabo SA, Geneva, Thụy sĩ), sau đó một 700 m l TRIzol ®Tinh khiết đã được bổ sung. Sau khi vortexing, khai thác RNA được thực hiệntheo giao thức của nhà sản xuất. ARN của mỗi mẫuhòa tan trong 20 m l RNAse miễn phí vô trùng nước và hoặc lưu trữ ở –70 ° Choặc trực tiếp được sử dụng cho RT-Đảng Cộng sản Romania.Giao thức cho RT và Đảng Cộng sản Romania như được diễn tả ở nơi khác (St¨auber et al.,1995) đã được sử dụng với các sửa đổi. Một bộ khác nhau của

Kết quả (Việt) 2:

Phân lập virus trong trứng có phôi
khoản phản ứng phiên mã-polymerase chuỗi
Sau khi giải đông, tổng số RNA đã được phân lập từ các mẫu mô,
phân (được lưu trữ trong TRIzol® Reagent) và từ làm rõ allantoic dịch
mẫu. Tóm lại, mô 100 mg, 50 ml của mẫu phân hoặc 100 ml
allantoic chất lỏng đã được đồng nhất trong 300 ml TRIzol® Thuốc thử với một
cái chày trong 1,5 ml microtube (Piston Pellet Bleu microtube avec;
Polylabo SA, Geneva, Thụy Sĩ), sau đó một 700 ml TRIzol®
thuốc thử đã được bổ sung. Sau vortexing, chiết RNA được thực hiện
theo các giao thức của nhà sản xuất. RNA của mỗi mẫu được
hòa tan trong 20 ml nước vô trùng RNase-miễn phí và có thể được lưu trữ ở -70 ° C
hoặc sử dụng trực tiếp cho RT-PCR.
Các giao thức cho RT và PCR như mô tả ở nơi khác (Stauber et al.,
1995) là sử dụng với những sửa đổi sau. Một bộ khác nhau của