Purified lipase was resuspended in

Purified lipase was resuspended in 100 μL of water plus 0.1% trifluoroacetic acid (HPLC grade) and loaded onto a C18 reverse phase column (Vydac reversed phase C18 column, 10-μm particle size, 22-mm i.d., 25-cm length). Prior to loading, the column was pre-equilibrated with water plus 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid. Protein was eluted from the column using a linear gradient of 0% to 70% (v/v) acetonitrile (HPLC grade) plus 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid and a flow rate of 1.0 mL min−1. The elution profile was monitored by A280. Fractions were collected in 1 min intervals and each fraction was evaluated for the presence of enzyme activity after dialyzing the samples extensively.

Kết quả (Việt) 1:

Tinh khiết lipase resuspended trong 100 μL của nước cộng với 0,1% trifluoroacetic axit (HPLC lớp) và tải lên một C18 đảo ngược giai đoạn cột (Vydac đảo ngược giai đoạn C18 cột, kích thước hạt 10 μm, 22-mm ID, 25 cm chiều dài). Trước khi tải, các cột được trước equilibrated với nước cộng với 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid. Protein eluted từ cột bằng cách sử dụng một độ dốc tuyến tính của 0% đến 70% (v/v) acetonitrile (HPLC lớp) cộng với axít trifluoroacetic 0,1% (v/v) và một tỷ lệ lưu lượng 1.0 mL min−1. Cấu hình elution đã được giám sát bởi A280. Phần phân đoạn được thu thập trong 1 phút và mỗi phần được đánh giá cho sự hiện diện của hoạt động của enzyme sau khi dialyzing các mẫu rộng rãi.

Kết quả (Việt) 2:

Lipase tinh khiết đã được lơ lửng trong 100 ml nước và 0,1% axit trifluoroacetic (HPLC lớp) và nạp vào một cột C18 đảo ngược giai đoạn (Vydac đảo ngược giai đoạn C18 cột, kích thước hạt 10 mm, 22 mm-id, chiều dài 25 cm). Trước khi tải, các cột được trước cân bằng với nước và 0,1% (v / v) axit trifluoroacetic. Protein được tách rửa từ cột sử dụng một gradient tuyến tính từ 0% đến 70% (v / v) acetonitrile (HPLC lớp) và 0,1% (v / v) axit trifluoroacetic và tốc độ dòng chảy 1,0 mL min-1. Hồ sơ cá nhân rửa giải được theo dõi bằng A280. Phân số được thu thập trong khoảng thời gian 1 phút và mỗi phần được đánh giá đối với các mặt của hoạt động enzyme sau dialyzing mẫu rộng rãi.