3.3. Biotechnological Control of Pi

3.3. Biotechnological Control of Pitch Deposits After a large screening of fungal strains from different origins (see Note 3), the four fungi listed above were selected for the removal of lipophilic extractives involved in pitch deposit formation from eucalypt and other woods used as raw material for chlorine-free paper pulp manufacturing. Inocula were grown in liquid media, and fungal pellets were used to inoculate wood chips. In order to remove the most recalcitrant lipophilic extractives (such as free and esterified sterols in the case of eucalypt), the inoculated wood was incubated for several weeks under SSF conditions. These are similar to those in chip piles at the pulp mill during natural seasoning of wood, which is traditionally used for decreasing pitch troubles. Therefore, the treatment described could be extrapolated to the mill scale, and can be considered as a controlled seasoning of wood using selected fungal inocula (instead of depending on the action of the woodinhabiting microorganisms as in the case of natural seasoning). 3.3.1. Inoculum Preparation Flasks (1 L) with 100 mL of a medium containing (per L) 10 g glucose, 2 g ammonium tartrate, 1 g KH2PO4, 1 g yeast extract, 0.5 g MgSO4•7 H2O, 0.5 g KCl, and 1 mL of a mineral solution (containing 10 mg B4O7Na2•10 H2O, 7 mg ZnSO4•7 H2O, 5 mg FeSO4•7 H2O, 1 mg CuSO4•5 H2O, 1 mg MnSO4•4 H2O, 1 mg (NH4)6Mo7O24•4 H2O, and 100 mL water) were sterilized by autoclaving at 120∞C for 20 min (31). Each flask was inoculated with two plugs from a fungal colony grown on 2% malt-extract agar slants, and was maintained under stationary incubation at 28∞C for 15 d. After this time period the mycelia were washed and homogenized under sterile conditions. The washed and homogenized mycelia (preinoculum) were grown in 1-L flasks with 200 mL of the above glucose-ammonium-yeast extract medium for 5 d, and the pellets produced were washed and used to inoculate the eucalypt chips. 3.3.2. Fungal Treatment of Wood The sterilized wood chips inoculated with fungal pellets (0.5 mg/kg wood) were incubated under SSF conditions (corresponding to the water-holding capacity) in the rotary fermentor described previously. After an adequate incubation period (typically 21 d), the treated chips were dried in an aerated oven at 60∞C, ground to sawdust using a knife mill, extracted with acetone in a Soxhlet apparatus for 8 h, and the lipophilic compounds dissolved in chloroform and analyzed by GC-MS as previously described. After pretreating wood with these fungi, the abundance of most pitch-forming compounds, such as free and esterified sterols, was strongly decreased, as illustrated in Fig. 3, which shows the GC-MS profiles of lipophilic extractives from eucalypt wood after SSF treatment with the four selected fungi and the noninoculated control. These results show that the four fungi selected are promising organisms for the biological control of pitch in paper-pulp manufacturing, when applied as a SSF pretreatment of the raw material (see Note 3).

Kết quả (Việt) 1:

3.3. linh kiểm soát sân tiền gửi sau khi xem một lớn xét chủng nấm từ nguồn gốc khác nhau (xem lưu ý 3), các loại nấm bốn được liệt kê ở trên đã được lựa chọn để loại bỏ các lipophilic extractives liên quan đến sân tiền gửi hình thành từ bạch đàn và rừng khác sử dụng làm nguyên liệu cho clo miễn phí giấy bột giấy sản xuất. Inocula đã phát triển phương tiện truyền thông chất lỏng, và bánh nấm được sử dụng để cấy gỗ dăm. Để loại bỏ extractives đặt ương ngạnh lipophilic (ví dụ như miễn phí và este sterol trong trường hợp của bạch đàn), inoculated wood được ủ trong vài tuần điều kiện SSF. Đây là tương tự như trong chip cọc tại nhà máy bột giấy trong các gia vị tự nhiên của gỗ, theo truyền thống được sử dụng để làm giảm những rắc rối pitch. Do đó, việc điều trị được mô tả có thể được suy luận để quy mô nhà máy, và có thể được coi như một gia vị kiểm soát của gỗ bằng cách sử dụng lựa chọn inocula nấm (thay vì tùy thuộc vào hành động của các vi sinh vật woodinhabiting như trong trường hợp của gia vị tự nhiên). 3.3.1. inoculum chuẩn bị chậu (1 L) với 100 mL của một phương tiện có chứa (mỗi L) 10 g đường, 2 g amoni tartrate, 1 g KH2PO4, 1 g men chiết xuất, cách 0.5 g MgSO4•7 H2O, cách 0.5 g KCl, và 1 mL của một giải pháp khoáng sản (có chứa 10 mg B4O7Na2•10 H2O, 7 mg ZnSO4•7 H2O, 5 mg FeSO4•7 H2O, 1 mg CuSO4•5 H2O 1 mg MnSO4•4 H2O, 1 mg (NH4) 6Mo7O24•4 H2O và 100 mL nước) đã được tiệt trùng bằng cách khử trùng tại 120∞C cho 20 phút (31). Mỗi bình được tiêm chủng với hai cắm từ một thuộc địa nấm phát triển trên 2% chiết xuất mạch Nha agar nghiêng, và được duy trì theo ủ bệnh văn phòng phẩm tại 28∞C cho 15 d. Sau khoảng thời gian này các mycelia đã được rửa sạch và homogenized dưới điều kiện vô trùng. Rửa sạch và homogenized mycelia (preinoculum) được trồng trong chậu 1-L với 200 mL glucose-amoni-men ở trên giải nén trung bình cho 5 d, và bột viên sản xuất đã được rửa sạch và được sử dụng để cấy chip bạch đàn. 3.3.2. nấm điều trị bằng gỗ gỗ dăm tiệt trùng tiêm chủng với nấm bột viên (0,5 mg/kg gỗ) đã được ủ trong các điều kiện SSF (tương ứng với khả năng giữ nước) ở fermentor quay được mô tả trước đó. Sau một thời gian ủ bệnh đầy đủ (thường 21 d), chip xử lý đã được sấy khô trong lò bọt lúc 60∞C, đất mùn cưa bằng cách sử dụng một nhà máy dao, chiết xuất với acetone trong một máy Soxhlet 8 h và lipophilic hợp chất hòa tan trong cloroform và phân tích GC-MS được mô tả trước đó. Sau khi pretreating gỗ với những loại nấm, sự phong phú của hầu hết pitch tạo thành hợp chất, chẳng hạn như miễn phí và este sterol, mạnh mẽ giảm, như minh họa trong hình 3, trong đó cho thấy các cấu hình GC-MS của extractives lipophilic làm bằng gỗ bạch đàn sau SSF điều trị với các loại nấm đã chọn bốn và điều khiển noninoculated. Các kết quả cho thấy rằng nấm bốn lựa chọn là các sinh vật hứa hẹn nhất kiểm soát sinh vật của các sân cỏ trong sản xuất giấy, bột giấy, khi được áp dụng như là một pretreatment SSF nguyên liệu (xem 3 lưu ý).

Kết quả (Việt) 2:

3.3. Công nghệ sinh học kiểm soát của Pitch Tiền gửi Sau khi sàng lọc lớn các chủng nấm từ nguồn gốc khác nhau (xem chú giải 3), bốn loại nấm được liệt kê ở trên đã được lựa chọn cho việc loại bỏ các chiết ưa mỡ tham gia vào hình thành cặn sân từ bạch đàn và gỗ khác được sử dụng làm nguyên liệu cho clo -miễn phí sản xuất bột giấy. Inocula được trồng trong môi trường lỏng, và bột viên nấm đã được sử dụng để cấy dăm gỗ. Để loại bỏ các chiết ưa mỡ ngoan cố nhất (như sterol tự do và este hóa trong trường hợp của bạch đàn), gỗ tiêm được ủ trong vài tuần trong điều kiện SSF. Đây là tương tự như trong đống chip tại các nhà máy bột giấy trong gia vị tự nhiên của gỗ, theo truyền thống được sử dụng để giảm phiền hà pitch. Do đó, việc điều trị có thể mô tả được ngoại suy cho thang máy, và có thể được coi như là một gia vị được kiểm soát bằng cách sử dụng gỗ lựa chọn inocula nấm (thay vì phụ thuộc vào hành động của các vi sinh vật woodinhabiting như trong trường hợp của gia vị tự nhiên). 3.3.1. Chất tiêm chủng Chuẩn bị Flasks (1 L) với 100 ml của một môi trường có chứa (mỗi L) glucose 10 g, 2 g amoni tartrate, 1 g KH2PO4, 1 g men chiết xuất, 0,5 g MgSO 4 • 7 H2O, 0,5 g KCl, và 1 mL của một giải pháp khoáng sản (có chứa 10 mg B4O7Na2 • 10 H2O, 7 mg ZnSO4 • 7 H2O, 5 mg FeSO4 • 7 H2O, 1 mg CuSO4 • 5 H2O, 1 mg MnSO4 • 4 H2O, 1 mg (NH4) 6Mo7O24 • 4 H2O , và 100 ml nước) đã được khử trùng bằng nồi hấp ở 120∞C trong 20 phút (31). Mỗi bình đã được tiêm với hai phích cắm từ một thuộc địa của nấm trồng trên 2% slants thạch mạch nha chiết xuất, và được duy trì dưới ủ yên tại 28∞C cho 15 d. Sau khoảng thời gian này, các sợi nấm đã được rửa sạch và đồng nhất trong điều kiện vô trùng. Các sợi nấm rửa sạch và đồng nhất (preinoculum) được trồng trong 1-L bình với 200 ml dung dịch glucose-amoni-men chiết xuất trung bình trên cho 5 d, và các viên sản xuất đã được rửa sạch và sử dụng để cấy chip bạch đàn. 3.3.2. Nấm điều trị của Gỗ Các chip gỗ tiệt trùng tiêm bột viên nấm (0,5 mg / kg gỗ) được ủ trong điều kiện SSF (tương ứng với khả năng giữ nước) trong lên men quay mô tả trước đây. Sau một thời gian ủ bệnh thích hợp (thường là 21 ngày), các chip xử lý đã được sấy khô trong lò ga tại 60∞C, mặt đất để mùn cưa sử dụng một máy dao, được chiết xuất với acetone trong một bộ máy Soxhlet 8 giờ, và các hợp chất ưa mỡ hòa tan trong chloroform và phân tích bằng GC-MS như mô tả trước đây. Sau khi tiền xử lý gỗ với các loại nấm, sự phong phú của hầu hết các hợp chất sân, tạo hình, như sterol tự do và este hóa, đã được giảm mạnh, như minh họa trong hình. 3, trong đó cho thấy các cấu GC-MS của chiết ưa mỡ từ gỗ bạch đàn sau khi điều trị SSF với bốn loại nấm được lựa chọn và kiểm soát noninoculated. Những kết quả này cho thấy bốn loại nấm được chọn sẽ được hứa hẹn sinh để kiểm soát sinh học của sân trong sản xuất giấy, bột giấy, khi áp dụng như một tiền xử lý SSF của nguyên liệu (xem chú 3).