In this study, TaqMan-based real-ti

In this study, TaqMan-based real-time Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques were developed for the detection of chicken and turkey meat in raw and heat-treated meat mixtures. Primers and TaqMan probe sets were designed to amplify 86 bp and 136 bp fragments for the chicken and turkey species, respectively, on the mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 2 gene. In the results, it was possible to detect each species at the level of 0.1 pg template DNA with the TaqMan probe technique without any cross-reactivity with nontarget species (bovine, ovine, donkey, pork, and horse) while the detection level was 1 pg template DNA using conventional PCR. The TaqMan probe assays used in this study allowed the detection of as little as 0.001% level of both species in the experimental meat mixtures, prepared by mixing chicken and turkey meat with beef at different levels (0.001% to 10%). In conclusion, TaqMan probe assays developed in this research are promising tools in the specific identification and sensitive quantification of meat species even in the case of heat-treated meat products, and suitable for a rapid, automated, and routine analysis.

Keywords: conventional PCR chicken, real-time PCR, species identification, TaqMan probe, turkey

Kết quả (Việt) 1:

Trong nghiên cứu này, TaqMan dựa trên thời gian thực phản ứng chuỗi Polymerase (PCR) kỹ thuật được phát triển cho phát hiện của thịt gà và gà tây trong hỗn hợp thịt nguyên và nhiệt. Chất nền, mồi và TaqMan thăm dò bộ được thiết kế để khuyếch đại 86 bp và 136 bp mảnh cho các loài gà và gà tây, tương ứng, trên NADH dehydrogenaza tiểu đơn vị 2 gen ti thể. Trong các kết quả, nó đã có thể phát hiện mỗi loài ở cấp độ của 0.1 pg mẫu DNA với kỹ thuật thăm dò TaqMan mà không có bất kỳ cross-reactivity với loài nontarget (bò, lông, lừa, thịt lợn, và cưỡi) trong khi mức độ phát hiện là 1 pg mẫu DNA bằng cách sử dụng thông thường PCR. Thử nghiệm thăm dò TaqMan được sử dụng trong nghiên cứu này cho phép phát hiện ít nhất là mức 0,001% của cả hai loài trong hỗn hợp thịt thực nghiệm, chuẩn bị bằng cách trộn thịt gà và gà tây với thịt bò ở các cấp độ khác nhau (0,001% đến 10%). Tóm lại, TaqMan thăm dò thử nghiệm phát triển trong nghiên cứu này là các công cụ hứa hẹn trong xác định cụ thể và nhạy cảm định lượng của thịt loài ngay cả trong trường hợp của các sản phẩm thịt nhiệt, và phù hợp cho một phân tích nhanh, tự động, và thường xuyên.Từ khóa: thông thường PCR gà, Đảng Cộng sản Romania thời gian thực, nhận dạng loài, TaqMan thăm dò, Thổ Nhĩ Kỳ

Kết quả (Việt) 2:

Trong nghiên cứu này, TaqMan dựa trên thời gian thực Polymerase Chain Reaction (PCR) kỹ thuật đã được phát triển cho các phát hiện của gà thịt và gà tây trong hỗn hợp thịt sống và được xử lý nhiệt. Mồi và bộ dò TaqMan được thiết kế để khuếch đại 86 bp và 136 bp mảnh cho các loài gà và gà tây, tương ứng, trên 2 gen ty thể NADH dehydrogenase tiểu đơn vị. Trong các kết quả, nó đã có thể phát hiện từng loài ở mức 0,1 pg mẫu DNA với các kỹ thuật thăm dò TaqMan mà không có bất kỳ phản ứng chéo với các loài nontarget (trâu, bò, cừu, lừa, thịt lợn và ngựa), trong khi mức phát hiện là 1 pg mẫu DNA sử dụng thông thường PCR. Các xét nghiệm thăm dò TaqMan được sử dụng trong nghiên cứu này cho phép phát hiện các mức độ ít nhất là 0,001% của cả hai loài trong hỗn hợp thịt nghiệm, chuẩn bị bằng cách trộn thịt gà và gà tây thịt bò ở các cấp độ khác nhau (0,001% đến 10%). Trong kết luận, các xét nghiệm thăm dò TaqMan phát triển trong nghiên cứu này là những công cụ đầy hứa hẹn trong việc xác định cụ thể và định lượng nhạy cảm của loài thịt ngay cả trong trường hợp sản phẩm thịt được xử lý nhiệt, thích hợp cho một phân tích nhanh chóng, tự động và thường xuyên. Từ khóa: thông thường PCR gà, real-time PCR, xác định loài, TaqMan thăm dò, gà tây