BackgroundAdipose-tissue-derived st

Background
Adipose-tissue-derived stem cells (ADSCs) have been widely used in Korea over the last few years by plastic surgeons as a semi-permanent volume expander. In June 2009, the Korean Food and Drug Administration (KFDA) allowed ADSCs to be used as autologous cell transplant when obtained and processed within a medical clinic with minimal processing [1].
Mesenchymal stem cells (MSCs) are found in numerous human tissues including bone marrow, synovial tissue and adipose tissue. These have been shown to differentiate into bones, cartilage, muscle and adipose tissue, representing a promising new area of therapy in regenerative medicine [2].
Because of their potent capabilities, MSCs have been used successfully in animal models to regenerate cartilage and bones [3,4]. In 2008, Centeno and colleagues reported regeneration of knee cartilage in a human by using autologous culture-expanded bone-marrow-derived stem cells [5]. However, to the best of our knowledge ADSCs have never been used successfully in osteonecrosis of a femoral head and in osteoarthritis of a human knee.
Osteonecrosis, or avascular necrosis, of femoral head is relatively a common disorder affecting individuals in their 30s to 50s. Osteoarthritis of a knee is an even more common disorder, especially in older patients. Currently, the only cure for both diseases is surgical intervention. However, the successful regeneration of bones and cartilage with ADSCs may represent a promising new, minimally invasive, non-surgical alternative.
Many issues need to be resolved and clarified before the general application of the procedure. The mechanism of regeneration is not yet clear. It could be through direct differentiation of stem cells that were introduced to the diseased joints. Alternatively, it could be due to the tropic effects of ADSCs on the existing tissues. Further, various elements of the local environment can affect the differentiation of MSCs [6]. Also, it is believed that a scaffolding material might be needed to allow the MSCs to attach and engraft [7].
Platelet-rich plasma (PRP) was used as a growth factor and as a differentiating agent for the MSCs. PRP contains multiple growth factors including transforming growth factor (TGF)β, insulin-like growth factor (IGF), fibroblast growth factor (FGF), and platelet-derived growth factor (PDGF). A literature review of the data on PRP shows that it has a positive effect on the stimulation of bones, blood vessel and chondrocyte formation [8-10]. Hyaluronic acid was added as a scaffolding material, and calcium chloride was used as a PRP-activating agent [11].
This series of case reports demonstrates successful clinical results of regenerating bones in osteonecrosis and cartilage in patients with osteoarthritis, using percutaneously implanted, autologous MSCs along with PRP, hyaluronic acid, calcium chloride (CaCl2) and very-low-dose dexamethasone.
Case presentations
The following cases concern four different individuals. Of the four, the first two cases involve bone regeneration in osteonecrosis of hips, the latter two cases regeneration of cartilage in osteoarthritis of knees.
The first case concerns a 29-year-old Korean woman with over a year's history of right hip pain due to osteonecrosis.
Approximately a year prior to presentation, she started having hip pain with no history of trauma. She was seen by a physician and was diagnosed with osteoarthritis of the hip after an MRI scan. After taking non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) for a few weeks, her hip pain improved. About a month prior to presentation, she again started having hip pain radiating to the anterior region of the right knee. The pain was worse when standing up, walking, and exercising. The pain improved with rest. However, this time, the pain was not greatly relieved with NSAIDs.
A repeat MRI showed osteonecrosis of the femoral head, stage 4. Since there is no effective non-surgical treatment of the disease, she elected to receive stem cell treatment.
At the time of initial evaluation, she reported moderately severe pain (visual analog scale (VAS) score 7) on rest, increased pain when standing and walking (VAS score 9).
For a week prior to liposuction, she was restricted from taking corticosteroids, aspirin, NSAIDs, and oriental herb medications.
For the liposuction procedure, she was brought into an operating room and placed in a supine position. She was then sedated with propofol 2 mg intravenously (push) and a 20 mg/hour rate of continuous infusion.
After cleaning her abdominal area with povodine-iodine and placing sterile drapes, an incision of approximately 0.5 cm was made approximately 5 cm below the umbilicus. Then, using tumescent solution (500 cm3 normal saline, 40 cm3 2% lidocaine, 20 cm3 0.5% marcaine, 0.5 cm3 epinephrine 1:1000), the lower abdomen area was anesthetized. Next, using a 3.0 Hartman cannula, a total of 160 cm3 of lipoaspirates were extracted and separated by gravity. The resulting 100 cm3 of adipose tissue was then centrifuged at 3500 rpm for five minutes. The end result was approximately 40 cm3 of packed adipose tissue, fibrous tissue, red blood cells and a small number of nucleated cells.
An equal volume of digestive enzyme, 0.07% collagenase type 1, composed of several collagenases, sulfhydryl protease, clostripain, a trypsin-like enzyme, and a amino peptidase, derived from Clostridium histolyticum (Adilase; Worthington, Lakewood, NJ, USA) was then mixed with the centrifuged lipoaspirates at a ratio of 1:1 and digested for 30 minutes at 37°C while rotating [12].
Bacterial collagenases differ from vertebrate collagenases in that they exhibit broader substrate specificity [13].
After the digestion, the lipoaspirates were centrifuged at 100g for three minutes to separate the lipoaspirate and the enzyme. The leftover enzyme was then removed.
Using 500 cm3 5% dextrose in lactated Ringer's solution, the lipoaspirates were washed three times to remove the collagenase. After each washing, the lipoaspirates were centrifuged at 100 g. After the last centrifuge process, approximately 10 cm3 of ADSCs were obtained.
While preparing the ADSCs, 30 cm3 of autologous blood was drawn with 2.5 cm3 of anticoagulant citrate dextrose solution (ACD) formula. This was centrifuged at 200 g for five minutes. The resultant supernatant was drawn and centrifuged at 1000 g for five minutes. The supernatant was drawn and discarded. The resulting buffy coat was mixed with 10 cm3 of ADSCs.

Kết quả (Việt) 1:

NềnCó nguồn gốc mỡ-mô tế bào gốc (ADSCs) đã được sử dụng rộng rãi tại Triều tiên trong vài năm cuối bác sĩ phẫu thuật nhựa là một khối lượng bán vĩnh cửu expander. Tháng 6 năm 2009, thực phẩm Hàn Quốc và ma túy hành chính (KFDA) cho phép ADSCs để được sử dụng như tế bào autologous ghép khi thu được và xử lý trong một phòng khám y tế với tối thiểu xử lý [1].Tế bào gốc gặp (MSCs) được tìm thấy trong nhiều mô con người, trong đó có tủy xương, hoạt dịch mô và mô mỡ. Những đã được chỉ ra để phân biệt vào xương, sụn, cơ bắp và mô mỡ, đại diện cho một khu vực mới hứa hẹn của liệu pháp trong y học tái tạo [2].Vì khả năng mạnh của mình, MSCs đã được sử dụng thành công trong các mô hình động vật để tái tạo các sụn và xương [3,4]. Trong năm 2008, Centeno và đồng nghiệp báo cáo tái tạo các sụn đầu gối trong một con người bằng cách sử dụng tự thân văn hóa mở rộng xương-tủy nguồn gốc bào [5]. Tuy nhiên, tốt nhất của kiến thức của chúng tôi ADSCs đã không bao giờ được sử dụng thành công trong osteonecrosis của một đầu xương đùi và trong viêm xương khớp của đầu gối của con người.Osteonecrosis, hoặc hoại tử mạch máu xương đùi đầu cờ lê tương đối là một rối loạn phổ biến ảnh hưởng đến cá nhân trong độ tuổi 30 vào thập niên 50 của họ. Viêm xương khớp của đầu gối một là một rối loạn phổ biến hơn, đặc biệt là ở bệnh nhân lớn tuổi. Hiện nay, việc chữa bệnh chỉ cho cả hai bệnh là phẫu thuật can thiệp. Tuy nhiên, tái sinh thành công của xương và sụn với ADSCs có thể đại diện cho một triển vọng mới, xâm lấn tối thiểu, không phải phẫu thuật thay thế.Nhiều vấn đề cần được giải quyết và làm rõ trước khi các ứng dụng chung của các thủ tục. Cơ chế tái sinh không phải là chưa rõ ràng. Nó có thể thông qua sự khác biệt trực tiếp của tế bào gốc được giới thiệu đến các bệnh khớp. Ngoài ra, nó có thể là do những ảnh hưởng tropic của ADSCs các mô sẵn có. Hơn nữa, các yếu tố khác nhau của các địa phương môi trường có thể ảnh hưởng đến sự khác biệt của MSCs [6]. Ngoài ra, người ta tin rằng một vật liệu giàn giáo có thể là cần thiết để cho phép MSCs để đính kèm và engraft [7].Huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) được sử dụng như là một yếu tố tăng trưởng và là một đại lý khác biệt cho MSCs. PRP chứa nhiều yếu tố tăng trưởng bao gồm việc chuyển yếu tố tăng trưởng (TGF) β, giống như insulin tăng trưởng factor (IGF), yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF), và tiểu cầu, xuất phát yếu tố tăng trưởng (PDGF). Bình luận văn học của các dữ liệu trên PRP cho thấy rằng nó có một tác động tích cực vào sự kích thích của xương, mạch máu và chondrocyte hình thành [8-10]. Axit hyaluronic được thêm vào như là một vật liệu giàn giáo, và canxi clorua được sử dụng như một chất kích hoạt PRP [11].Loạt bài này của báo cáo trường hợp chứng tỏ thành công kết quả lâm sàng của tái sinh xương trong osteonecrosis và sụn ở bệnh nhân viêm xương khớp, bằng cách sử dụng percutaneously cấy ghép, MSCs tự thân cùng với PRP, tiêm acid hyaluronic, canxi clorua (CaCl2) và rất thấp liều lượng dexamethasone.Trường hợp trình bàyCác trường hợp liên quan đến bốn cá nhân khác nhau. Trong bốn, lần đầu tiên hai trường hợp liên quan đến xương tái sinh trong osteonecrosis của hông, sau hai trường hợp tái tạo các sụn trong viêm xương khớp của đầu gối.Trường hợp đầu tiên liên quan đến một người phụ nữ 29 tuổi Triều tiên với hơn một năm lịch sử của ngay hip đau do osteonecrosis.Khoảng một năm trước khi trình bày, cô bắt đầu có đau hông với không có lịch sử của chấn thương. Cô đã được nhìn thấy bởi một bác sĩ và được chẩn đoán với viêm xương khớp hông sau khi một MRI quét. Sau khi uống các loại thuốc chống viêm non-steroid (NSAID) cho một vài tuần, cô đau hông được cải thiện. Giới thiệu về một tháng trước khi trình bày, cô một lần nữa bắt đầu có hip đau tỏa ra đến vùng trước của đầu gối bên phải. Đau là tồi tệ hơn khi đứng lên, đi bộ, và tập thể dục. Cơn đau được cải tiến với phần còn lại. Tuy nhiên, thời gian này, đau này không thuyên giảm đáng kể với NSAIDs.Một MRI lặp lại cho thấy osteonecrosis của người đứng đầu xương đùi, giai đoạn 4. Kể từ khi không có không có điều trị không phẫu thuật có hiệu quả của bệnh, bà bầu vào nhận tế bào gốc điều trị.Tại thời điểm đánh giá ban đầu, cô ấy báo cáo nghiêm trọng vừa phải đau (quy mô thị giác tương tự (VAS) điểm 7) trên còn lại, tăng đau khi đứng và đi bộ (VAS điểm 9).Một tuần trước khi hút mỡ, cô đã bị giới hạn từ dùng corticosteroid, aspirin, NSAID và thuốc loại thảo dược phương Đông.Cho các thủ tục hút mỡ, cô được đưa vào một phòng điều hành và đặt trong một vị trí supine. Cô sau đó gây mê với propofol 2 mg tĩnh mạch (push) và một tỷ lệ 20 mg/giờ liên tục truyền.Sau khi làm sạch vùng bụng của mình với povodine-i-ốt và đặt vô trùng drapes, một vết rạch khoảng cách 0.5 cm đã được thực hiện khoảng 5 cm dưới rốn. Sau đó, khu vực hạ du bụng bằng cách sử dụng giải pháp tumescent (500 cm3 bình thường saline, 40 cm3 2% lidocaine, 20 cm3 0,5% marcaine, cách 0.5 cm3 epinephrine 1:1000), anesthetized. Tiếp theo, sử dụng một 3.0 Hartman được, tổng cộng 160 cm3 lipoaspirates được chiết xuất và tách ra bởi lực hấp dẫn. Cm3 100 kết quả của mô mỡ sau đó ly 3500 rpm cho 5 phút. Kết quả cuối cùng là khoảng 40 cm3 bữa mô mỡ, mô xơ, tế bào máu đỏ và một số nhỏ các tế bào nucleated.Một khối lượng tương đương của tiêu hóa enzym, 0,07% collagenase loại 1, bao gồm một số collagenases, sulfhydryl protease, clostripain, một loại enzyme trypsin giống như, và một peptidase amin, bắt nguồn từ Clostridium histolyticum (Adilase; Worthington, Lakewood, NJ, Mỹ) sau đó được trộn với lipoaspirates ly tại một tỷ lệ 1:1 và tiêu hóa trong 30 phút ở 37 ° C trong khi xoay [12].Vi khuẩn collagenases khác nhau từ collagenases có xương sống trong đó họ triển lãm đặc trưng bề mặt rộng hơn [13].Sau khi tiêu hóa, các lipoaspirates đã ly 100 g trong ba phút để tách lipoaspirate và enzym. Enzym còn sót lại sau đó đã được gỡ bỏ.Bằng cách sử dụng 500 cm3 5% dextrose trong dung dịch thở chuoâng, các lipoaspirates đã được rửa sạch ba lần để loại bỏ collagenase. Sau khi rửa mỗi, các lipoaspirates đã ly 100 g. Sau khi quá trình ly tâm cuối, khoảng 10 cm3 của ADSCs đã thu được.Trong khi chuẩn bị các ADSCs, 30 cm3 máu tự thân đã được rút ra với 2.5 cm3 chống đông máu citrat dextrose giải pháp (ACD) công thức. Điều này ly 200 g cho 5 phút. Supernatant kết quả đã được rút ra và ly 1000 g cho 5 phút. Supernatant đã được rút ra và bỏ đi. Buffy áo kết quả được trộn với 10 cm3 của ADSCs.

Kết quả (Việt) 2:

Background
mỡ-mô có nguồn gốc từ tế bào gốc (ADSCs) đã được sử dụng rộng rãi tại Hàn Quốc trong vài năm qua bởi bác sĩ phẫu thuật nhựa như một khối lượng giãn nở bán kiên cố. Trong tháng 6 năm 2009, thực phẩm và Cục Quản lý dược Hàn Quốc (KFDA) cho phép ADSCs để được sử dụng như là ghép tế bào tự thân khi thu được và xử lý trong vòng một phòng khám y tế với chế biến tối thiểu [1].
tế bào gốc trung mô (MSC) được tìm thấy trong rất nhiều các mô của con người bao gồm tủy xương, mô hoạt dịch và mô mỡ. Những điều này đã được chứng minh để biệt hóa thành xương, sụn, cơ và mô mỡ, đại diện cho một khu vực mới đầy hứa hẹn điều trị trong y học tái tạo [2].
Bởi vì khả năng mạnh của họ, MSC đã được sử dụng thành công trong các mô hình động vật để tái tạo sụn và xương [ 3,4]. Trong năm 2008, Centeno và đồng nghiệp báo cáo tái tạo sụn đầu gối trong một con người bằng cách sử dụng các tế bào gốc tự thân văn hóa mở rộng tủy xương có nguồn gốc từ [5]. Tuy nhiên, với tất cả sự hiểu biết của chúng tôi ADSCs đã không bao giờ được sử dụng thành công trong hoại tử chỏm xương đùi và một trong viêm xương khớp của đầu gối người.
Osteonecrosis, hoặc hoại tử vô mạch, đầu xương đùi là tương đối một rối loạn thường ảnh hưởng đến cá nhân ở độ tuổi 30 đến 50 tuổi. Viêm xương khớp của khớp gối là một rối loạn thậm chí còn phổ biến hơn, đặc biệt là ở những bệnh nhân lớn tuổi. Hiện nay, các thuốc duy nhất cho cả hai bệnh này là phẫu thuật can thiệp. Tuy nhiên, sự tái sinh thành công của xương và sụn với ADSCs có thể đại diện cho một mới, xâm lấn tối thiểu, thay thế không phẫu thuật đầy hứa hẹn.
Nhiều vấn đề cần phải được giải quyết và làm rõ trước khi các ứng dụng chung của các thủ tục. Các cơ chế tái sinh là chưa rõ ràng. Nó có thể là thông qua sự phân biệt trực tiếp của tế bào gốc đã được giới thiệu đến các khớp bị bệnh. Ngoài ra, nó có thể là do tác dụng của nhiệt đới ADSCs trên mô hiện tại. Hơn nữa, các yếu tố khác nhau của môi trường địa phương có thể ảnh hưởng đến việc phân biệt [6] MSC. Ngoài ra, người ta tin rằng một vật liệu giàn giáo có thể là cần thiết để cho phép MSC để đính kèm và tiếp cây [7].
tiểu cầu giàu plasma (PRP) đã được sử dụng như một yếu tố tăng trưởng và như là một đại lý phân biệt cho các MSC. PRP chứa nhiều yếu tố tăng trưởng bao gồm cả chuyển yếu tố tăng trưởng (TGF) β, yếu tố tăng trưởng giống Insulin (IGF), yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF), và yếu tố tăng trưởng tiểu cầu có nguồn gốc từ (PDGF). Một tài liệu của các dữ liệu trên PRP cho thấy rằng nó có một tác động tích cực vào sự kích thích của xương, mạch máu và hình thành sụn [8-10]. Axit Hyaluronic được thêm vào như là một vật liệu giàn giáo, và clorua canxi được sử dụng như một tác nhân PRP-kích hoạt [11].
Đây là loạt các trường hợp báo cáo kết quả chứng minh lâm sàng thành công của việc tái tạo xương hoại tử xương và sụn ở bệnh nhân viêm xương khớp, sử dụng qua da cấy ghép, tự thân MSC cùng với PRP, acid hyaluronic, calcium chloride (CaCl2) và liều rất thấp dexamethasone.
Trường hợp các bài thuyết trình
Các trường hợp sau đây quan tâm bốn cá nhân khác nhau. Trong số bốn, hai trường hợp đầu tiên liên quan đến việc tái tạo xương trong hoại tử xương hông, hai trường hợp sau tái tạo sụn khớp trong viêm xương khớp đầu gối.
Trường hợp đầu tiên liên quan đến một người phụ nữ Hàn Quốc 29 tuổi với lịch sử hơn một năm đau hông phải do đến hoại tử.
Khoảng một năm trước khi trình bày, cô bắt đầu bị đau hông không có tiền sử chấn thương. Cô đã nhìn thấy một bác sĩ và được chẩn đoán bị viêm xương khớp hông sau khi chụp MRI. Sau khi dùng thuốc chống viêm không steroid (NSAIDs) cho một vài tuần, đau hông được cải thiện. Khoảng một tháng trước khi trình bày, cô lại bắt đầu bị đau hông tỏa đến các vùng trước của đầu gối phải. Sự đau đớn tồi tệ hơn khi đứng lên, đi bộ, và tập thể dục. Cơn đau được cải thiện với phần còn lại. Tuy nhiên, thời gian này, cơn đau không thuyên giảm rất nhiều với NSAIDs.
Một MRI lặp lại cho thấy hoại tử chỏm xương đùi, giai đoạn 4. Vì không có điều trị không phẫu thuật hiệu quả của bệnh, bà bầu để được điều trị tế bào gốc.
Đồng thời gian đánh giá ban đầu, theo báo cáo đau vừa phải nặng (visual analog scale (VAS) điểm số 7) trên phần còn lại, tăng đau khi đứng và đi bộ (VAS điểm 9).
Đối với một tuần trước khi hút mỡ, cô đã hạn chế sử dụng Corticosteroid, aspirin NSAID, và các loại thuốc thảo mộc phương Đông.
Đối với các thủ tục hút mỡ, cô đã được đưa vào một phòng điều hành và được đặt trong một tư thế nằm ngửa. Sau đó, cô rất bình thản với propofol 2 mg tiêm tĩnh mạch (push) và 20 mg / giờ tỷ lệ tiêm truyền liên tục.
Sau khi làm sạch vùng bụng của cô với povodine-iodine và đặt màn vô trùng, một vết mổ khoảng 0,5 cm đã được thực hiện khoảng 5 cm dưới rốn. Sau đó, sử dụng giải pháp tumescent (500 cm3 nước muối bình thường, 40 cm3 2% lidocaine, 20 cm3 0,5% marcaine, 0,5 cm3 epinephrine 1: 1000), vùng bụng dưới đã bị đánh thuốc mê. Tiếp theo, sử dụng một ống 3,0 Hartman, tổng cộng 160 cm3 của lipoaspirates được trích xuất và phân cách bằng trọng lực. Kết quả là 100 cm3 của các mô mỡ sau đó được ly tâm ở 3500 rpm trong năm phút. Kết quả cuối cùng là khoảng 40 cm3 của mô mỡ đóng gói, mô sợi, tế bào máu đỏ và một số lượng nhỏ các tế bào có nhân.
Một khối lượng bằng nhau của enzyme tiêu hóa, 0,07% collagenase loại 1, bao gồm một số collagenases, sulfhydryl protease, clostripain, một trypsin giống như enzyme, và một amino peptidase, có nguồn gốc từ vi khuẩn Clostridium histolyticum (Adilase; Worthington, Lakewood, NJ, USA), sau đó được trộn với các lipoaspirates ly tâm ở tỷ lệ 1: 1 và tiêu hóa cho 30 phút ở 37 ° C trong khi quay [12].
collagenases vi khuẩn khác nhau từ collagenases có xương sống trong đó họ triển lãm rộng hơn bề mặt đặc hiệu [13].
Sau khi tiêu hóa, lipoaspirates được ly tâm ở 100g cho ba phút để tách lipoaspirate và các enzyme. Các enzyme còn sót lại sau đó đã được gỡ bỏ.
Sử dụng 500 cm3 5% dextrose trong dung dịch Lactated Ringer, các lipoaspirates được rửa ba lần để loại bỏ các collagenase. Sau mỗi lần rửa, lipoaspirates được ly tâm ở 100 g. Sau khi quá trình ly tâm cuối cùng, khoảng 10 cm3 của ADSCs đã thu được.
Trong khi chuẩn bị các ADSCs, 30 cm3 máu tự thân được vẽ bằng 2,5 cm3 của thuốc kháng đông citrate giải pháp dextrose (ACD) công thức. Điều này đã được ly tâm ở 200 g trong năm phút. Những kết quả nổi đã được rút ra và ly tâm ở 1000 g trong năm phút. Nổi trên mặt đã được rút ra và bỏ đi. Kết quả là Buffy áo được trộn với 10 cm3 của ADSCs.