2.3. Immobilization of the enzyme o

2.3. Immobilization of the enzyme on nonporous glass beads
Nonporous glass beads (40 g) with mean diameters of 100¬200 mm were added to 50 mL aqueous solution of 4 N NaOH or NH4OH and stirred for 60 min at 50 °C (Fig. 1) [40]. The suspension was then washed with 600 mL deionized water and filtered through a 0.45 mm PTFE membrane filter to obtain hydroxylated glass beads. The beads were dried in an oven at 130 °C overnight (Step 1). Then, the prepared functionalized glass beads (35 g) were transferred to a 500¬mL round-bottom flask containing 100 mL toluene and 30 mL APES. The flask was stirred and heated at 80 °C overnight under nitrogen atmosphere. The glass beads were washed with 600 mL of a solution containing toluene/dichloromethane/acetone (1:1:1; v/v/v), then filtered and air dried for 24 h to obtain amino-functionalized glass beads (Step 2) [6]. In the next step, glutaraldehyde was covalently attached to the glass beads by suspending amino-functionalized beads (30 g) in a 100 mL solution of glutaraldehyde (25%) for 60 min while stirring at room temperature. The suspension was washed with 200 mL methanol and filtered, followed by drying the residual glass beads under vacuum at 70 °C overnight (Step 3). To attach the nanoparticulated and non-nanoparticulated laccase onto the surface of the glass beads, 1 mL of laccase-bonded nanoparticles (20 mg/mL) and the same amount of free enzymes were added to 100 mg glass beads in the presence of 5 mg NaBH4. At the end of these processes, all samples were filtered through a 0.45-mm PTFE membrane filter and then dried under vacuum overnight at 70 °C. Finally, nanoparticulated laccase and non-nanoparticulated enzymes immobilized on the surface of the glass beads were obtained (Steps 4a and 4b).

Kết quả (Việt) 1:

2.3. cố định enzym trên hạt thủy tinh nonporousNonporous kính hạt (40 g) với các đường kính trung bình 100¬200 mm đã được thêm vào 50 mL dung dịch 4 N NaOH hoặc NH4OH và khuấy trong 60 phút tại 50 ° C (hình 1) [40]. Hệ thống treo sau đó rửa sạch với nước 600 mL, deionized và lọc qua một bộ lọc màng PTFE 0.45 mm để có được hạt epoxit kính. Các hạt đã được sấy khô trong lò ở 130 ° C qua đêm (bước 1). Sau đó, chuẩn bị ngành kính hạt (35 g) được chuyển cho một flask tròn dưới 500¬mL chứa 100 mL toluene và loài KHỈ 30 mL. Flask khuấy và nung nóng ở 80 ° C qua đêm dưới nitơ khí quyển. Hạt thủy tinh đã được rửa sạch với 600 mL của một giải pháp có chứa toluene/dichloromethane/axeton (1:1:1; v/v/v), sau đó lọc và máy sấy khô để 24 h để có được hạt amino ngành thủy tinh (bước 2) [6]. Trong bước tiếp theo, glutaraldehyde một gắn hạt thủy tinh bởi đình chỉ amino ngành hạt (30 g) vào 100 mL dung dịch glutaraldehyde (25%) trong 60 phút trong khi khuấy ở nhiệt độ phòng. Hệ thống treo được rửa sạch với 200 mL methanol và lọc, sau đó là làm khô hạt thủy tinh còn sót lại dưới máy hút ở 70 ° C qua đêm (bước 3). Để đính kèm các nanoparticulated và nanoparticulated laccase lên bề mặt các hạt thủy tinh, 1 mL ngoại quan laccase hạt nano (20 mg/mL) và cùng một số tiền của các enzym miễn phí đã được 100 mg kính hạt sự hiện diện của 5 mg NaBH4. Vào cuối của các quá trình, tất cả mẫu đã được lọc qua một bộ lọc màng PTFE 0,45-mm và sau đó được sấy khô dưới máy hút qua đêm ở 70 ° C. Cuối cùng, nanoparticulated-nanoparticulated và laccase enzym hỏng trên bề mặt hạt thủy tinh đã được (bước 4a và 4b).

Kết quả (Việt) 2:

2.3. Bất động của các enzyme trên hạt thủy tinh xốp
hạt thủy tinh xốp (40 g) với đường kính trung bình của 100¬200 mm đã được thêm vào 50 ml dung dịch NaOH 4 N hoặc NH4OH và khuấy trong 60 phút ở 50 ° C (Hình. 1) [40]. Hệ thống treo sau đó được rửa sạch với 600 ml nước khử ion và lọc qua một bộ lọc PTFE màng 0,45 mm để có được hạt thủy tinh hydroxy. Các hạt này đã được sấy khô trong lò ở 130 ° C qua đêm (Bước 1). Sau đó, các hạt thủy tinh chức năng hóa phẩm (35 g) được chuyển giao cho một bình đáy tròn 500¬mL có chứa 100 ml toluen và 30 mL APES. Các bình được khuấy và gia nhiệt ở 80 ° C qua đêm dưới bầu không khí nitơ. Các hạt thủy tinh đã được rửa sạch với 600 ml dung dịch có chứa toluene / dichloromethane / axeton (1: 1: 1; v / v / v), sau đó được lọc và không khí khô trong 24 giờ để có được hạt thủy tinh amino-chức hóa (Bước 2) [6]. Trong bước tiếp theo, glutaraldehyde được đồng hóa trị gắn liền với các hạt thủy tinh bằng cách ngưng hạt amino-chức hóa (30 g) trong một ml dung dịch 100 của glutaraldehyde (25%) cho 60 phút trong khi khuấy ở nhiệt độ phòng. Việc đình chỉ được rửa sạch với 200 ml methanol và lọc, tiếp theo là làm khô hạt thủy tinh còn sót lại dưới chân không ở 70 ° C qua đêm (Bước 3). Để gắn laccase nanoparticulated và không nanoparticulated lên bề mặt của các hạt thủy tinh, 1 ml của các hạt nano laccase-ngoại quan (20 mg / ml) và cùng một lượng enzyme tự do được thêm vào 100 hạt mg kính trong sự hiện diện của 5 mg NaBH4. Vào cuối của các quá trình này, tất cả các mẫu đã được lọc qua một bộ lọc PTFE màng 0,45 mm và sau đó phơi khô dưới chân qua đêm ở 70 ° C. Cuối cùng, nanoparticulated laccase và enzyme không nanoparticulated cố định trên bề mặt của các hạt thủy tinh đã thu được (bước 4a và 4b).