Available online at www.notulaebiol

Available online at www.notulaebiologicae.ro
Not Sci Biol, 2011, 3(4):88-92 Print ISSN 2067-3205; Electronic 2067-3264 Notulae Scientia Biologicae
Efficient Direct Protocorm-Like Bodies Induction of Dwarf Dendrobium using Thidiazuron Panjan SUJJARITTHURAKARN, Kamnoon KANCHANAPOOM* Prince of Songkla University, Faculty of Science, Department of Biology, Hat Yai, Songkhla 90112, Thailand; [e-mail] (*corresponding author)
Abstract An efficient induction of protocorm-like bodies (PLBs) from seedlings of dwarf Dendrobium was accomplished in order to develop mass-scale propagation. The effect of N6-benzyladenine (BA) and thidiazuron (TDZ) on the in vitro induction of PLBs was studied. TDZ was found to be a more effective inducer of PLBs and their proliferation than BA. The highest percentage for the induction of PLBs (86%) and the highest number of PLBs (3.6) per protocorm were observed after 9 weeks of culture in modified Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with 18 μM TDZ. Keywords: Dendrobium hybrid, direct embryogenesis, micropropagation, protocorm, seed culture
Introduction
Orchids are popular horticultural and ornamental plants mostly because of their exquisite flowers. In Thailand, orchids are very important commercial plants and produce an annual income for Thailand of 2 billion Baht (Rojanawong et al., 2006). Dendrobium orchids, that are the largest genus in the family Orchidaceae, have become a major cut flower crop for export. Dendrobiums are normally reproduced asexually by division of offshoots, but the multiplication rate is low (Martin and Madassery, 2006; Nasiruddin et al., 2003). Sexual propagation to produce complete plants through orchid seeds is difficult because their seeds are minute and have no endosperm. Consequently, they need symbiotic fungi in order to germinate (Anjum et al., 2006; Thomas and Michael, 2007). Dwarf Dendrobium (Dendrobium ‘Queen Pink’ x Dendrobium ‘Phakbung’), a member in Dendrobium hybrids, is a sympodial epiphytic orchid, and it has small pseudobulbs. Also, its flowers have longevity and blooms many times a year. It is generally used as a flowering-potted for ornamental plants. In addition, it has potential commercial value as gifts, souvenirs, or decorations which are miniaturized orchid plantlets with flowers. Therefore, tissue culture has for many years played an important role as a means to propagate orchids and several in vitro cultural protocols have been developed in this genus (Arditti and Ernst, 1993; Chugh et al., 2009). The production of orchid seedlings from seeds involves three successive phases: germination, formation of protocorms, and seedling development (Mitra et al., 1976). The development of protocorms from germinated seed and the subsequent induction of PLBs, from different tissues as explants has become a reliable method for breeding orchids.
Propagation by formation of PLBs is a preferred option because of the large number of PLBs that can be obtained within a short period of time. The need for mass propagation has led to the development of in vitro methods such as the propagation of large-scale PLBs using: shoot tips (Malabadi et al., 2005; Sheela et al., 2004), leaf segments (Martin and Madassery, 2006; Park et al., 2002a), protocorms (Sheelavanthmath et al., 2005; Teng et al., 2004), flower stalks (Chen and Chang, 2000; Chen et al., 2002), stem segments (Luo et al., 2008) and root tips (Manners et al., 2010; Park et al., 2003). PLBs can proliferate rapidly and can readily regenerate into complete plantlets, so they are also the most general target tissue for genetic transformation studies in orchids (Liau et al., 2003; Sreeramanan et al., 2008). Moreover, PLBs are well-differentiated tissues that are sometimes regarded as orchid embryos that can develop two distinct bipolar structures, namely, the shoot and root meristem. Thus, these structures are able to convert to plantlets easily when grown on plant growth regulator-free medium (Ng and Saleh, 2011). Thidiazuron (TDZ: N-phenyl-N’-1,2,3-thidiazol-5ylurea), a phenylurea derivative and a non-purine cytokinin compound, is not catabolized via cytokinin oxidase (Hare and Van, 1994; Kishor and Devi, 2009). Previously, TDZ was reported to be effective in the regeneration of a number of orchid species such as Doritaenopsis (Ernst, 1994), Phalaenopsis (Chen and Piluek, 1995), Cymbidium (Chang and Chang, 1998; Nayak et al., 1997), Oncidium (Chen et al., 1999; Chen and Chang, 2001), and Dendrobium (Roy et al., 2007). BA (N6-benzyladenine) is an adenine-type cytokinin. The beneficial effect of BA has also been described for the regeneration of several orchids, including the genera Oncidium (Kalimuthu et al., 2007), Geodorum (Sheelavantmath et al., 2000), Vanda (Decruse
Received 03 August 2011; accepted 07 November 2011
Sujjaritthurakarn P. and Kanchanapoom K. / Not Sci Biol, 2011, 3(4):88-92
89
Experimental design and data analysis Five protocorms were implanted pe

Kết quả (Việt) 1:

Có sẵn trực tuyến tại www.notulaebiologicae.roKhông. Sci Biol, 2011, 3 (4): 88-92 in ISSN 2067-3205; 2067-3264 điện tử Notulae Scientia BiologicaeHiệu quả trực tiếp Protocorm-Like cơ thể cảm ứng của lùn Dendrobium bằng cách sử dụng Thidiazuron Panjan SUJJARITTHURAKARN, Kamnoon KANCHANAPOOM * hoàng tử Songkla University, giảng viên khoa học, khoa sinh học, Hat Yai, Songkhla 90112, Thái Lan; [e-mail] (* tác giả tương ứng)Trừu tượng một cảm ứng hiệu quả của các cơ quan như protocorm (PLBs) từ cây giống của lùn Dendrobium đã được thực hiện để phát triển quy mô mass tuyên truyền. Các hiệu ứng của N6-benzyladenine (BA) và thidiazuron (TDZ) trên cảm ứng trong ống nghiệm của PLBs được nghiên cứu. TDZ được tìm thấy là một inducer hiệu quả hơn của PLBs và phổ biến vũ khí của họ hơn BA. Tỷ lệ phần trăm cao nhất cho cảm ứng của PLBs (86%) và con số cao nhất của PLBs (3,6) cho một protocorm được tiến hành sau 9 tuần văn hóa năm lần Murashige và Skoog (MS) lỏng phương tiện bổ sung với 18 μM TDZ. Từ khóa: Dendrobium lai, trực tiếp embryogenesis, micropropagation, protocorm, văn hóa hạt giốngGiới thiệuHoa Lan là phổ biến làm vườn và trang trí nhà máy chủ yếu là vì hoa tinh tế. Tại Thái Lan, Hoa Lan là rất quan trọng thương mại cây và sản xuất một thu nhập hàng năm cho Thái Lan 2 tỷ baht (Rojanawong và ctv., 2006). Hoa lan Dendrobium, đó là chi lớn nhất trong gia đình họ phong lan, đã trở thành một loại cây trồng chính cắt hoa cho xuất khẩu. Dendrobiums bình thường sao chép vô tính bởi các bộ phận của nhánh, nhưng tỷ lệ nhân là thấp (Martin và Madassery, năm 2006; Nasiruddin et al., 2003). Tình dục tuyên truyền để sản xuất các nhà máy đầy đủ thông qua hạt giống phong lan là khó khăn bởi vì hạt của chúng rất nhỏ và có không có nội nhũ. Do đó, họ cần cộng sinh nấm để nảy mầm (Anjum et al., 2006; Thomas và Michael, 2007). Lùn Dendrobium (Dendrobium 'Nữ hoàng màu hồng' x Dendrobium 'Phakbung'), một thành viên trong hoàng lai, là một phong lan biểu sinh sympodial, và nó đã giả nhỏ. Ngoài ra, Hoa của nó có tuổi thọ và nở nhiều lần một năm. Nó thường được sử dụng như là một thực vật có hoa chậu cho cây. Ngoài ra, nó có giá trị tiềm năng thương mại là quà tặng, Cửa hàng lưu niệm, và đồ trang trí được miniaturized plantlets phong lan với Hoa. Do đó, mô nền văn hóa trong nhiều năm đóng một vai trò quan trọng như một phương tiện để tuyên truyền phong lan và một số giao thức trong ống nghiệm văn hóa đã được phát triển trong chi này (Arditti và Ernst, 1993; Chugh et al., 2009). Sản xuất các cây giống phong lan từ hạt giống liên quan đến ba giai đoạn kế tiếp: nảy mầm, hình thành của protocorms, và phát triển cây giống (Mitra và ctv., 1976). Sự phát triển của protocorms từ hạt nảy mầm và cảm ứng tiếp theo của PLBs, từ mô khác nhau như là explants đã trở thành một phương pháp đáng tin cậy cho chăn nuôi Hoa Lan. Propagation by formation of PLBs is a preferred option because of the large number of PLBs that can be obtained within a short period of time. The need for mass propagation has led to the development of in vitro methods such as the propagation of large-scale PLBs using: shoot tips (Malabadi et al., 2005; Sheela et al., 2004), leaf segments (Martin and Madassery, 2006; Park et al., 2002a), protocorms (Sheelavanthmath et al., 2005; Teng et al., 2004), flower stalks (Chen and Chang, 2000; Chen et al., 2002), stem segments (Luo et al., 2008) and root tips (Manners et al., 2010; Park et al., 2003). PLBs can proliferate rapidly and can readily regenerate into complete plantlets, so they are also the most general target tissue for genetic transformation studies in orchids (Liau et al., 2003; Sreeramanan et al., 2008). Moreover, PLBs are well-differentiated tissues that are sometimes regarded as orchid embryos that can develop two distinct bipolar structures, namely, the shoot and root meristem. Thus, these structures are able to convert to plantlets easily when grown on plant growth regulator-free medium (Ng and Saleh, 2011). Thidiazuron (TDZ: N-phenyl-N’-1,2,3-thidiazol-5ylurea), a phenylurea derivative and a non-purine cytokinin compound, is not catabolized via cytokinin oxidase (Hare and Van, 1994; Kishor and Devi, 2009). Previously, TDZ was reported to be effective in the regeneration of a number of orchid species such as Doritaenopsis (Ernst, 1994), Phalaenopsis (Chen and Piluek, 1995), Cymbidium (Chang and Chang, 1998; Nayak et al., 1997), Oncidium (Chen et al., 1999; Chen and Chang, 2001), and Dendrobium (Roy et al., 2007). BA (N6-benzyladenine) is an adenine-type cytokinin. The beneficial effect of BA has also been described for the regeneration of several orchids, including the genera Oncidium (Kalimuthu et al., 2007), Geodorum (Sheelavantmath et al., 2000), Vanda (Decruse Nhận được 3 tháng 8 năm 2011; chấp nhận 07 tháng mười một 2011Sujjaritthurakarn P. và Kanchanapoom K. / không Sci Biol, 2011, 3 (4): 88-9289Thử nghiệm thiết kế và dữ liệu phân tích năm protocorms đã cấy ghép pe

Kết quả (Việt) 2:

Có sẵn trực tuyến tại www.notulaebiologicae.ro
Không Sci Biol, 2011, 3 (4): 88-92 In ISSN 2067-3205; Điện tử 2067-3264 Notulae Scientia Biologicae
hiệu quả trực tiếp Protocorm-Giống như cơ quan cảm ứng của Dwarf Dendrobium sử dụng Thidiazuron Panjan SUJJARITTHURAKARN, Kamnoon KANCHANAPOOM * Đại học Prince of Songkla, Khoa Khoa học, Khoa Sinh học, Hat Yai, Songkhla 90.112, Thái Lan; [e-mail] (* tác giả tương ứng)
Tóm tắt Một cảm ứng hiệu quả của các cơ quan protocorm-like (PLBs) từ cây giống của Dendrobium lùn đã được hoàn thành để phát triển công tác tuyên truyền đại chúng quy mô. Hiệu quả của N6-benzyladenine (BA) và thidiazuron (TDZ) trên in vitro cảm ứng của PLBs đã được nghiên cứu. TDZ được tìm thấy là một chất cảm ứng hiệu quả hơn PLBs và phổ biến vũ khí của họ hơn là BA. Tỷ lệ phần trăm cao nhất cho các cảm ứng của PLBs (86%) và số lượng cao nhất của PLBs (3.6) mỗi protocorm đã được quan sát sau 9 tuần nuôi cấy trong Murashige và Skoog sửa đổi (MS) vừa lỏng có bổ sung 18 mM TDZ. Từ khóa: Dendrobium lai, phôi trực tiếp, vi nhân, protocorm, văn hóa hạt
Giới thiệu
Hoa lan được phổ biến các nhà máy làm vườn và trang trí chủ yếu là vì hoa tinh tế của họ. Tại Thái Lan, hoa lan là cây thương mại rất quan trọng và tạo ra thu nhập hàng năm của Thái Lan là 2 tỷ Baht (Rojanawong et al., 2006). Hoa lan Dendrobium, đó là những chi lớn nhất trong gia đình Orchidaceae, đã trở thành cây trồng hoa xuất khẩu chủ yếu. Dendrobiums thường được sao chép vô tính bằng cách phân chia các nhánh, nhưng tỷ lệ nhân là thấp (Martin và Madassery, 2006; Nasiruddin et al., 2003). Tuyên truyền tình dục để tạo ra cây hoàn chỉnh thông qua hạt giống hoa lan là khó khăn bởi vì hạt giống của họ là phút và không có nội nhũ. Do đó, họ cần nấm cộng sinh để nảy mầm (Anjum et al, 2006;. Thomas và Michael, 2007). Dwarf Dendrobium (Dendrobium 'Nữ hoàng Pink' x Dendrobium 'Phakbung'), một thành viên trong Dendrobium lai, là một phong lan epiphytic sympodial, và nó có giả hành nhỏ. Ngoài ra, hoa của nó có tuổi thọ và sự sinh sôi nhiều lần trong một năm. Nó thường được sử dụng như một hoa-cây trong chậu cho cây cảnh. Ngoài ra, nó có giá trị thương mại tiềm năng làm quà tặng, quà lưu niệm, hay đồ trang trí được thu nhỏ cây giống phong lan với hoa. Vì vậy, nuôi cấy mô có nhiều năm đóng một vai trò quan trọng như là một phương tiện để truyền bá phong lan và một số giao thức văn hóa trong ống nghiệm đã được phát triển trong chi này (Arditti và Ernst, 1993;. Chugh et al, 2009). Việc sản xuất cây giống hoa lan từ hạt giống bao gồm ba giai đoạn kế tiếp nhau: nảy mầm, hình thành các protocorm và phát triển cây giống (Mitra et al, 1976.). Sự phát triển của protocorm từ hạt giống nảy mầm và cảm ứng tiếp theo của PLBs, từ các mô khác nhau như cấy đã trở thành một phương pháp đáng tin cậy để nhân giống hoa lan.
Tuyên truyền bằng cách hình thành các PLBs là một lựa chọn ưa thích vì số lượng lớn các PLBs có thể đạt được trong vòng một khoảng thời gian ngắn. Sự cần thiết cho công tác tuyên truyền thông đại chúng đã dẫn đến sự phát triển trong ống nghiệm các phương pháp như tuyên truyền của PLBs quy mô lớn sử dụng: mẹo chụp;, phân đoạn lá (Martin và Madassery, (Malabadi et al, 2005 Sheela et al., 2004). 2006; Công viên et al, 2002a), protocorm (Sheelavanthmath et al, 2005;... Teng et al, 2004), cuống hoa (Chen và Chang, 2000;. Chen et al, 2002), ngăn chặn các phân đoạn (Luo et al ., 2008) và lời khuyên root (Manners et al, 2010;.. Công viên et al, 2003). PLBs có thể sinh sôi nảy nở nhanh chóng và dễ dàng có thể tái sinh thành cây con hoàn chỉnh, vì vậy họ cũng là những mô đích chung nhất cho các nghiên cứu chuyển gen ở lan (Liau et al, 2003;. Sreeramanan et al, 2008.). Hơn nữa, PLBs đều được phân biệt mô mà đôi khi được coi là phôi phong lan có thể phát triển hai cấu trúc lưỡng cực rõ rệt, cụ thể là, các shoot và mô phân sinh rễ. Như vậy, những cấu trúc này có thể chuyển đổi để cây con dễ dàng khi trồng trên sự tăng trưởng thực vật vừa điều chỉnh miễn phí (Ng và Saleh, 2011). Thidiazuron (TDZ: N-phenyl-N'-1,2,3-thidiazol-5ylurea), một dẫn xuất phenylurea và một hợp chất cytokinin không purine, không catabolized qua cytokinin oxidase (Hare và Văn, 1994; Kishor và Devi, 2009). Trước đây, TDZ đã được báo cáo là có hiệu quả trong sự tái sinh của một số loài phong lan như doritaenopsis (Ernst, 1994), Phalaenopsis (Chen và Piluek, 1995), Cymbidium (Chang và Chang, 1998;. Nayak et al, 1997) , Oncidium (Chen et al, 1999;. Chen và Chang, 2001) (. Roy et al, 2007), và Dendrobium. BA (N6-benzyladenine) là một adenine loại cytokinin. Các tác dụng có lợi của BA cũng đã được mô tả cho sự tái sinh của một số hoa lan, bao gồm cả các chi Oncidium, Geodorum, Vanda (Decruse (Kalimuthu et al, 2007). (Sheelavantmath et al., 2000)
nhận 03 tháng 8 năm 2011; chấp nhận 07 tháng 11 2011
Sujjaritthurakarn P. và K. Kanchanapoom / Không Sci Biol, 2011, 3 (4): 88-92
89
pe thiết kế và phân tích dữ liệu thực nghiệm Năm protocorm được cấy