Malate dehydrogenase (MDH) may be i

Malate dehydrogenase (MDH) may be important in carbohydrate
and energy metabolism in malarial parasites. The
cDNA corresponding to the MDH gene, identified on
chromosome 6 of the Plasmodium falciparum genome, was
amplified by RT-PCR, cloned and overexpressed in
Escherichia coli. The recombinant PfMDH was purified
to homogeneity and biochemically characterized as an
NAD+(H)-specific MDH, which catalysed reversible interconversion
of malate to oxaloacetate. PfMDH could not
use NADP/NADPH as a cofactor, but used acetylpyridine
adenine dinucleoide, an analogue of NAD. The enzyme
exhibited strict substrate and cofactor specificity. The highest
levels of PfMDH transcripts were detected in trophozoites
while the PfMDH protein level remained high in trophozoites
as well as schizonts. A highly refined model of
PfMDH revealed distinct structural characteristics of substrate
and cofactor binding sites and important amino acid
residues lining these pockets. The active site amino acid
residues involved in substrate binding were conserved in
PfMDH but the N-terminal glycine motif, which is involved
in nucleotide binding, was similar to the GXGXXG signature
sequence found inPfLDH and also in a-proteobacterial
MDHs. Oxamic acid did not inhibit PfMDH, while gossypol,
which interacts at the nucleotide binding site of oxidoreductases
and shows antimalarial activity, inhibited
PfMDH also. Treatment of a synchronized culture of
P. falciparum trophozoites with gossypol caused induction
in expression of PfMDH, while expression of PfLDH was
reduced and expression of malate:quinone oxidoreductase
remained unchanged. PfMDH may complement PfLDH
function of NAD/NADH coupling in malaria parasites.
Thus, dual inhibitors of PfMDH and PfLDH may be
required to target this pathway and to develop potential new
antimalarial drugs.

Kết quả (Việt) 1:

Malate dehydrogenase (MDH) có thể là quan trọng trong carbohydratevà chuyển hóa năng lượng trong ký sinh trùng sốt rét. CáccDNA tương ứng với các gen MDH, được xác định trêncác nhiễm sắc thể 6 của Plasmodium falciparum gen,khuếch đại bằng RT-PCR, nhân bản và overexpressed trongEscherichia coli. PfMDH tái tổ hợp được tinh khiếtđể tính đồng nhất và biochemically đặc trưng như mộtNAD + (H)-cụ thể MDH, phản đảo ngược phosphorylationtrong malate cho oxaloacetate. PfMDH có thể khôngsử dụng NADP/NADPH như một cofactor, nhưng được sử dụng acetylpyridineadenine dinucleoide, một tương tự của NAD. Enzymetriển lãm đặc trưng bề mặt và cofactor nghiêm ngặt. Cao nhấtcấp bảng điểm PfMDH được phát hiện ở trophozoitestrong khi mức độ protein PfMDH vẫn là cao trong trophozoitescũng như schizonts. Một mô hình rất tinh tế củaPfMDH tiết lộ khác biệt về cấu trúc đặc điểm của bề mặtcofactor ràng buộc các trang web và acid amin quan trọngdư lượng lót các túi. Axit amin hoạt động trang webdư lượng tham gia liên kết bề mặt được bảo tồn tạiPfMDH nhưng các motif N-terminal glycine là có liên quannucleotide ràng buộc, là tương tự như chữ ký GXGXXGtrình tự tìm thấy inPfLDH và cũng có thể tại một proteobacterialMDHs. Oxamic acid không ức chế PfMDH, trong khi gossypol,mà tương tác nucleotide liên kết trang web của oxidoreductasesvà cho thấy biến hoạt động ức chếPfMDH cũng. Điều trị của một nền văn hóa đồng bộP. falciparum trophozoites với cảm ứng gossypol gây ratrong biểu hiện của PfMDH, trong khi các biểu hiện của PfLDHgiảm và biểu hiện của malate: quinone oxidoreductazavẫn không thay đổi. PfMDH có thể bổ sung cho PfLDHchức năng của khớp nối NAD/NADH ở ký sinh trùng sốt rét.Vì vậy, chất ức chế kép của PfMDH và PfLDH có thểcần thiết để nhắm mục tiêu con đường này và phát triển tiềm năng mớiCác loại thuốc biến.

Kết quả (Việt) 2:

Malate dehydrogenase (MDH) có thể quan trọng trong carbohydrate
và năng lượng trao đổi chất trong ký sinh trùng sốt rét. Các
cDNA tương ứng với gen MDH, xác định trên
nhiễm sắc thể 6 trong bộ gen của Plasmodium falciparum, được
khuếch đại bằng RT-PCR, nhân bản và quá mức trong
Escherichia coli. Các PfMDH tái tổ hợp đã được thanh tẩy
để đồng nhất và sinh hóa đặc trưng như một
NAD + (H) cụ thể MDH, mà xúc tác interconversion hồi
của malate để oxaloacetate. PfMDH không thể
sử dụng NADP / NADPH như một đồng yếu tố, nhưng sử dụng acetylpyridine
dinucleoide adenine, một chất tương tự của NAD. Các enzyme
trưng bày chất nghiêm ngặt và đồng yếu tố đặc hiệu. Các cao nhất
mức độ của bảng điểm PfMDH đã được phát hiện ở thể tư dưỡng
, trong khi mức protein PfMDH vẫn ở mức cao trong thể tư dưỡng
cũng như phân liệt. Một mô hình rất tinh tế của
PfMDH tiết lộ đặc điểm cấu trúc riêng biệt của chất nền
và các trang web liên kết đồng yếu tố và acid amin quan trọng
dư lượng xếp những túi. Các acid amin trang web hoạt động
dư lượng tham gia vào nền ràng buộc đã được bảo tồn trong
PfMDH nhưng glycine motif N-terminal, được tham gia
trong nucleotide ràng buộc, cũng tương tự như chữ ký GXGXXG
chuỗi tìm thấy inPfLDH và cũng trong một-proteobacterial
MDHs. Axit Oxamic không ức chế PfMDH, trong khi gossypol,
mà tương tác tại vị trí gắn nucleotide của oxidoreductases
và cho thấy hoạt động chống sốt rét, ức chế
PfMDH cũng có. Điều trị của một nền văn hóa đồng bộ của
P. falciparum trophozoites với gossypol gây cảm ứng
trong biểu hiện của PfMDH, trong khi biểu hiện của PfLDH đã
giảm và biểu hiện của malate: quinone oxidoreductase
vẫn không thay đổi. PfMDH có thể bổ sung PfLDH
chức năng của NAD / NADH khớp nối trong ký sinh trùng sốt rét.
Như vậy, các chất ức chế kép của PfMDH và PfLDH có thể được
yêu cầu để nhắm mục tiêu vào quá trình này và để phát triển tiềm năng mới
loại thuốc chống sốt rét.