Isolation and partial amino acid se

Isolation and partial amino acid sequence determination of
peptides derived from the Ara h I protein. Purified Ara h I
protein was treated with trypsin and the peptide products separated
from one another by high performance liquid chromatography.
Three peptide fractions, selected on the basis of their separation
from each other and other fractions in the mix, were used
for amino acid sequence determination. During the course of
sequencing it was noted that fraction I and III consisted of a
single peptide species (peptide I and peptide III, respectively).
Fraction II consisted of one major peptide (peptide II) with
numerous minor peptide contaminants which complicated sequence
determination. However, it was possible to determine
the first 16 residues of the major peptide in fraction I and II
and the first 10 residues of the major peptide in fraction III.
The amino acid sequence determined for each peptide is noted
in Table I.
Isolation of clones that produce antigens recognized by
peanut-specific IgE from patients with peanut hypersensitivity.
RNA isolated from the peanut species, Arachis hypogaea (Florunner)
was used to construct an expression library for screening
with serum IgE from patients with peanut hypersensitivity.
Numerous IgE-binding clones were isolated from this library
after screening 106 clones with serum IgE from a pool of patients
with reactivity to most peanut allergens by western blot
analysis. Since the number of plaques reacting with serum IgE
was too large to study all in detail we randomly selected a small
portion of the positive plaques for further purification. Phage
positive for IgE binding were plaque purified to homogeneity
and then tested for their ability to react with serum IgE collected
from a patient without peanut hypersensitivity. All of the selected
clones were intensely positive when incubated with serum
IgE from patients with peanut hypersensitivity. In contrast,
these same clones did not react with control serum IgE. These
results show that we have isolated numerous clones capable of
producing IgE recognizable antigens specific to patients who
have peanut hypersensitivity.
Identification and characterization

Kết quả (Việt) 1:

Cô lập và xác định trình tự axit amin một phầnpeptide bắt nguồn từ Ara h tôi protein. Tinh khiết Ara h tôiprotein được điều trị với trypsin và các sản phẩm peptide tách ramột trong những khác bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao.Ba peptide phân số, chọn trên cơ sở tách của họtừ mỗi khác và các phần phân đoạn khác trong hỗn hợp, được sử dụngxác định trình tự axit amin. Trong quá trìnhxác định trình tự nó đã được ghi nhận rằng phần I và III bao gồm mộtđơn peptide loài (peptide tôi và peptide III, tương ứng).Phần II bao gồm một chính peptide (peptide II) vớinhiều tiểu peptide chất gây ô nhiễm mà phức tạp trình tựxác định. Tuy nhiên, nó đã có thể xác địnhCác dư lượng đầu tiên 16 của peptide lớn trong phần I và IIvà dư lượng đầu tiên 10 của peptide lớn trong phần III.Trình tự axit amin xác định cho mỗi peptide được ghi nhậntrong bàn tôi.Sự cô lập của dòng vô tính tạo ra kháng nguyên được công nhận bởidành riêng cho đậu phộng IgE từ các bệnh nhân với đậu phộng quá mẫn.RNA được cô lập từ các loài đậu phộng, Arachis hypogaea (Florunner)được sử dụng để xây dựng một thư viện biểu thức cho kiểm travới huyết thanh IgE từ các bệnh nhân với đậu phộng quá mẫn.Nhiều IgE-ràng buộc bắt chước bị cô lập từ thư viện nàysau khi xem xét 106 bắt chước với huyết thanh IgE từ một hồ bơi của bệnh nhânvới phản ứng chất gây dị ứng đậu phộng hầu hết bởi western blotphân tích. Kể từ khi số lượng các mảng phản ứng với huyết thanh IgElà quá lớn để nghiên cứu tất cả các chi tiết chúng tôi lựa chọn ngẫu nhiên một nhỏphần của mảng tích cực hơn nữa làm sạch. Phagetích cực cho IgE ràng buộc là mảng bám tinh khiết để tính đồng nhấtvà sau đó kiểm tra khả năng của họ để phản ứng với huyết thanh IgE thu thậptừ một bệnh nhân mà không có đậu phộng quá mẫn. Tất cả các lựa chọnnhái đã mạnh mẽ tích cực khi ủ với huyết thanhIgE từ các bệnh nhân với đậu phộng quá mẫn. Ngược lại,Các nhái cùng đã không phản ứng với kiểm soát huyết thanh IgE. Đâykết quả cho thấy rằng chúng tôi đã cô lập nhiều nhái có khả năngsản xuất IgE nhận ra kháng nguyên cụ thể cho bệnh nhân ngườicó đậu phộng quá mẫn.Xác định và đặc tính

Kết quả (Việt) 2:

Phân lập và xác định trình tự axit amin một phần của
chuỗi axit amin có nguồn gốc từ protein Tôi Ara h. Tinh khiết Ara h tôi
protein đã được điều trị bằng trypsin và các sản phẩm peptide tách
khỏi nhau bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao.
Ba phần peptide, được lựa chọn trên cơ sở tách của họ
từ mỗi khác và các phần phân đoạn khác trong hỗn hợp, đã được sử dụng
cho chuỗi axit amin quyết tâm. Trong quá trình
giải trình tự nó đã được lưu ý rằng phần I và III bao gồm một
loài duy nhất peptide (peptide tôi và peptide III, tương ứng).
Phân số II bao gồm một peptide lớn (peptide II) với
nhiều chất gây ô nhiễm peptide nhỏ mà trình tự phức tạp
quyết tâm. Tuy nhiên, nó đã có thể xác định
16 dư lượng đầu tiên của peptide quan trọng trong phần I và II
và 10 dư lượng đầu tiên của peptide quan trọng trong phần III.
Các chuỗi axit amin được xác định cho mỗi peptide được ghi nhận
trong Bảng I.
Phân lập các dòng vô tính rằng kháng nguyên sản phẩm được công nhận bởi
lạc cụ thể IgE từ các bệnh nhân quá mẫn với đậu phộng.
RNA được phân lập từ các loài đậu phộng, Arachis hypogaea (Florunner)
đã được sử dụng để xây dựng một thư viện biểu hiện sàng lọc
huyết thanh IgE từ các bệnh nhân quá mẫn với đậu phộng.
Nhiều nhái IgE-ràng buộc được phân lập từ thư viện này
sau khi sàng lọc 106 nhái với huyết thanh IgE từ một hồ bơi của bệnh nhân
với khả năng phản ứng với hầu hết các chất gây dị ứng đậu phộng bằng western blot
phân tích. Vì số lượng các mảng phản ứng với huyết thanh IgE
là quá lớn để nghiên cứu tất cả các chi tiết, chúng tôi chọn ngẫu nhiên một nhỏ
phần của mảng bám tích cực cho tinh chế thêm. Phage
dương tính với IgE ràng buộc là mảng bám tinh chế để đồng nhất
và sau đó thử nghiệm khả năng của họ để phản ứng với huyết thanh IgE thu thập
từ một bệnh nhân mà không có quá mẫn đậu phộng. Tất cả các lựa chọn
vô tính là mạnh mẽ tích cực khi ủ với huyết thanh
IgE từ các bệnh nhân quá mẫn với đậu phộng. Ngược lại,
những dòng tương tự đã không phản ứng với huyết thanh chứng IgE. Những
kết quả cho thấy rằng chúng tôi đã bị cô lập nhiều dòng vô tính có khả năng
sản xuất IgE kháng nguyên nhận biết cụ thể cho những bệnh nhân
có quá mẫn đậu phộng.
Xác định và mô tả đặc điểm