Precipitation of Total Nucleic Acid

Precipitation of Total Nucleic Acids (for all biological samples)
1. Add 150 µl of MPC Protein Precipitation Reagent to 300 µl of lysed sample and
vortex vigorously for 10 seconds.
2. Pellet the debris by centrifugation at 4°C for 10 minutes at ≥10,000 x g in a
microcentrifuge. If the resultant pellet is clear, small, or loose, add an additional 25 µl
of MPC Protein Precipitation Reagent, mix, and pellet the debris again.
3. Transfer the supernatant to a clean microcentrifuge tube and discard the pellet.
4. Add 500 µl of isopropanol to the recovered supernatant. Invert the tube 30-40 times.
5. Pellet the total nucleic acids by centrifugation at 4°C for 10 minutes in a
microcentrifuge.
6. Carefully pour off the isopropanol without dislodging the total nucleic acid pellet.
If removal of contaminating DNA from the RNA is required, proceed with Part G.
Otherwise, complete the remainder of Part F.
7. Rinse twice with 70% ethanol, being careful to not dislodge the total nucleic acid
pellet. Centrifuge briefly if the pellet is dislodged. Remove all of the residual ethanol
with a pipet.
8. Resuspend the total nucleic acids in 35 µl of TE Buffer

Kết quả (Việt) 1:

Mưa của axit Nucleic của tất cả (cho tất cả các mẫu sinh học)1. thêm 150 ml MPC Protein mưa tinh khiết vào 300 ml mẫu phân vàcơn lốc mạnh mẽ trong 10 giây.2. pellet các mảnh vỡ của số 4° c trong 10 phút tại ≥10, 000 x g trong mộtmicrocentrifuge. Nếu viên kết quả rõ ràng, nhỏ hoặc lỏng lẻo, thêm một bổ sung 25 MLMPC Protein mưa tinh khiết, pha trộn, và pellet các mảnh vỡ một lần nữa.3. chuyển supernatant cho một ống sạch microcentrifuge và loại bỏ miếng.4. thêm 500 ml isopropanol để phục hồi supernatant. Đảo ngược các ống 30 - 40 lần.5. pellet axit nucleic tổng của số 4° c trong 10 phút trong mộtmicrocentrifuge.6. cẩn thận đổ ra isopropanol mà không dislodging tất cả các axit nucleic miếng.Nếu loại bỏ các lây nhiễm các DNA từ RNA là bắt buộc, tiếp tục với phần G.Nếu không, hoàn thành phần còn lại của phần F.7. rửa sạch hai lần với 70% ethanol, cẩn thận để không đuổi ra các axit nucleic tất cảmiếng. Máy ly tâm một thời gian ngắn nếu miếng đánh bật. Loại bỏ tất cả dư ethanolvới một pipet.8. resuspend tất cả các axit nucleic ở 35 ml TE đệm

Kết quả (Việt) 2:

Lượng mưa của Tổng Nucleic Acids (cho tất cả các mẫu sinh học)
1. Thêm 150 ml của MPC mưa Protein Thuốc thử cho 300 ml mẫu ly giải và
xoáy mạnh trong 10 giây.
2. Thức ăn viên các mảnh vỡ bằng ly tâm ở 4 ° C trong 10 phút ở ≥10,000 x g trong một
microcentrifuge. Nếu pellet kết quả là rõ ràng, nhỏ, hoặc lỏng, thêm thêm 25 ml
của MPC Protein tủa thuốc thử, trộn, và thức ăn viên các mảnh vỡ một lần nữa.
3. Chuyển nổi một ống microcentrifuge sạch và loại bỏ các thức ăn viên.
4. Thêm 500 ml isopropanol đến nổi bị thu hồi. Đảo ngược ống 30-40 lần.
5. Thức ăn viên tổng axit nucleic bằng ly tâm ở 4 ° C trong 10 phút trong một
microcentrifuge.
6. Cẩn thận rót isopropanol không tuột tổng pellet axit nucleic.
Nếu loại bỏ ô nhiễm DNA từ RNA là cần thiết, tiến hành Phần G.
Nếu không, hoàn thành phần còn lại của Phần F.
7. Rửa sạch hai lần với 70% ethanol, cẩn thận để không làm bật tổng axit nucleic
viên. Vắn tắt máy ly tâm nếu viên bị long ra. Hủy bỏ tất cả của ethanol còn lại
với một Pipet.
8. Resuspend tổng axit nucleic trong 35 ml TE Buffer