Seeds were washed with tap water fo

Seeds were washed with tap water for 5 - 10 minutes to remove surface
contamination and then sterilized by immersing in 70% ethanol for 1 minute
with vigorous shaking followed by 20 minutes in 4% sodium hypochlorite
containing one drop of Tween 20. The seeds were then rinsed three times with
sterile distilled water in laminar flow cabinet to remove minor amounts of
disinfection liquid.
Journal of Agricultural Technology 2011, Vol. 7(6): 1755-1763
1757
Culture media and conditions
For germinating, the seeds were cultured in mugs on 30 ml of standard
Murashige and Skoog medium (1962) containing 3 % (m/v) sucrose and 0.6%
(m/v) agar. Cultures were incubated in a growth chamber at temperature of 24
°C, a 16h photoperiod provided with a light intensity of 2000 lux provided by
white fluorescent lamps.
Shoot multiplication
Nodal segments (0.5-1 cm length) were cultured on MS medium
supplemented with BAP with four concentrations (0, 0.1, 0.5, 1 and 1.5 mg/l)
combined with three concentrations KIN (0, 0.2 and 0.5 mg/l) or IBA (0, 0.2
and 0.5 mg/l). Sterilization performed by autoclaving at 121ºC for 20 minutes.
PH was adjusted at 5.8 before adding 0.6% (w/v) agar and 0.4% (w/v) activated
charcoal. Five explants (nodal segments) were aseptically cultured in a mug
containing 50 ml of the induction medium. The mugs were covered and sealed
with household plastics foil for a period of 5 weeks and then transferred to the
same conditions as mentioned above.
Bud elongation
After 3 weeks, the regeneration of explants trancfered to elongation
medium, the elongation medium was supplemented with BAP 0.1 mg/l and
IBA 0.2 mg/l. After 5 weeks, the rooted plantlets were acclimatized and outplanted in pots contained sterilized peat mass and vermiculite (3:1 ratio). The
pots were covered with clear beaker having a few holes on it and were
frequently watered to keep high humidity in a phytotron for 10 days. Hardened
plantlets were out-planted in a greenhouse set at a day temperature 21ºC, a
night temperature 19ºC, relative humidity 85% a 16 h photoperiod provided
with a light intensity of 3000 lux provided by white fluorescent
lamps.Immediately after planting, the plantlets were irrigated and adequate soil
moisture was maintained through daily watering.
Experimental design and statistical analysis
The experiment was carried out in factorial experiment in completely
randomized design. Data were statistically analyzed using the SAS software
(version 8). When the ANOVA indicated significant treatment effects (5 or 1%)
based on the F-test, the Duncan’s Multiple Range Test (P≤0.05) was used as a
1758
method to determine which treatments were statistically different from other
treatments.
Histological studies
The histological staining was carried out to establish the ontogeny of
explants containing shoot buds. Explants at different stages of their
development (3, 8 and 12 days of regeneration) were fixed in FAA (formalin,
acetic acid, absolute alcohol: 10, 5, 85; v/v) for 24 hours. After dehydrating in
ethanol (70, 95 and 100%) and xylene, textures were fixed in paraffin,
sectioned with a microtome at 30 µm and then stained with metylen blue. The
sections were prepared in a lam for observation under a light microscope.
Rooting and acclimatization
Most of shoots in the elongation medium that had 0.1mg/l BAP with
follow 0.2 mg/l IBA were rooted as well. In general, 4 weeks- old rooted
plantlets were acclimatized and out-planted in pots contained sterilized peat
mass and vermiculite (3:1 ratio). The pots were covered with clear beaker
having a few holes on it and were frequently watered to keep high humidity in a
phytotron during 25 days. Hardened plantlets were out- planted in a greenhouse
set at a day temperature 21ºC, a night temperature 19ºC, relative humidity 85%
and a day length of 12 h. Immediately after planting, the plantlets were irrigated
and adequate soil moisture was maintained through daily watering. The
proliferated plants showed 100% survival rate during hardening and
acclimatization.
Results
To optimize the media for regeneration of Strawberry in a preliminary
experiment, nodal explants from grown plants of Fragaria sarian L. were
inoculated on MS medium with different concentrations of growth regulators of
BAP with four concentrations (0, 0.5, 1 and 1.5 mg/l) alone or with three
concentrations KIN (0, 0.2 and 0.5 mg/l) or IBA (0, 0.2 and 0.5 mg/l). The
multiplication efficiency of nodal segments from plants was significantly when
estimated four to four weeks. The results showed that about 3-5 multiple shoot
buds developed from explants derived from 4-5 old week seedlings germinated
in vitro on t

Kết quả (Việt) 1:

Hạt giống đã được rửa sạch với vòi nước cho 5-10 phút để loại bỏ bề mặt ô nhiễm và sau đó được khử trùng bằng cách hoà nhập trong 70% ethanol trong 1 phút với lắc mạnh mẽ theo sau 20 phút trong 4% natri hypoclorit có một giọt Tween 20. Những hạt giống sau đó được rửa ba lần với vô trùng nước cất ở laminar flow tủ để loại bỏ một lượng nhỏ chất lỏng khử trùng. Tạp chí nông nghiệp công nghệ năm 2011, Vol. 7(6): 1755-17631757Phương tiện truyền thông văn hóa và điều kiệnCho ươm, những hạt giống được nuôi cấy trong cốc trên 30 ml của tiêu chuẩn Murashige và Skoog trung bình (1962) chứa 3% (m/v) Sucroza và 0,6% agar (m/v). Nền văn hóa đã được ủ trong một buồng tăng trưởng ở nhiệt độ của 24 ° C, photoperiod 16giờ cung cấp với một cường độ ánh sáng của 2000 lux cung cấp bởi đèn huỳnh quang trắng.Bắn nhân Nút phân đoạn (0,5-1 cm chiều dài) được nuôi cấy trên MS phương tiện bổ sung với bắp với bốn nồng độ (0, 0.1, 0.5, 1 và 1.5 mg/l) kết hợp với nồng độ ba KIN (0, 0.2 đến 0,5 mg/l) hoặc IBA (0, 0,2 và cách 0.5 mg/l). Khử trùng thực hiện bằng cách khử trùng tại 121ºC trong 20 phút. PH được điều chỉnh tại 5.8 trước khi thêm 0,6% (w/v) agar và 0,4% (w/v) kích hoạt than củi. Năm explants (nút phân đoạn) được nuôi cấy aseptically trong một mug có 50 ml của môi trường cảm ứng. Các đĩa đã được bảo hiểm và niêm phong với hộ gia đình nhựa lá cho một khoảng thời gian 5 tuần và sau đó chuyển giao cho các cùng một điều kiện như đã đề cập ở trên. Bud kéo dàiSau 3 tuần, tái tạo các explants trancfered để kéo dài Trung bình, kéo dài vừa được bổ sung với bắp 0.1 mg/l và IBA cách 0.2 mg/l. Sau 5 tuần, bắt nguồn từ plantlets là tolerant và outplanted trong chậu than bùn tiệt trùng bao gồm khối lượng và vermiculite (3:1 tỷ lệ). Các chậu bị phủ cốc rõ ràng có một vài lỗ trên nó và đã tưới nước thường xuyên để giữ độ ẩm cao trong một phytotron trong 10 ngày. Cứng plantlets đã được ra-trồng trong một nhà kính đặt ở một nhiệt độ ngày 21ºC, một nhiệt độ ban đêm 19ºC, độ ẩm tương đối 85% photoperiod 16giờ cung cấp với một cường độ ánh sáng của 3000 lux cung cấp bởi trắng huỳnh quang đèn. Ngay lập tức sau khi trồng, các plantlets đã là đất có tưới tiêu và đầy đủ độ ẩm được duy trì thông qua tưới nước hàng ngày.Thiết kế thử nghiệm và phân tích thống kêCác thử nghiệm được tiến hành trong các thử nghiệm giai thừa trong hoàn toàn thiết kế ngẫu nhiên. Dữ liệu thống kê được phân tích bằng cách sử dụng phần mềm SAS (Phiên bản 8). Khi ANOVA chỉ ra tác dụng điều trị quan trọng (5 hoặc 1%) Dựa trên F-thử nghiệm, của Duncan nhiều phạm vi kiểm tra (P≤0.05) được sử dụng như một 1758Các phương pháp để xác định phương pháp điều trị đó đã thống kê khác nhau từ khác phương pháp điều trị.Nghiên cứu mô học Mô học nhuộm được thực hiện để thiết lập ontogeny của explants có bắn chồi. Explants tại các giai đoạn khác nhau của của họ phát triển (3, 8 và 12 ngày tái sinh) đã được cố định trong FAA (formalin, axit axetic, tuyệt đối rượu: 10, 5, 85; v/v) cho 24 giờ. Sau khi dehydrating trong ethanol (70, 95 và 100%) và Xylen, kết cấu đã được cố định trong parafin, sectioned với một lưỡi lúc 30 μm và sau đó màu với metylen màu xanh. Các phần đã được chuẩn bị trong một lắm cho các quan sát dưới kính hiển vi ánh sáng.Rễ và acclimatizationHầu hết các cành trong trung kéo dài có 0,1 mg/l bắp với thực hiện theo cách 0.2 mg/l IBA được bắt nguồn từ là tốt. Nói chung, 4 tuần - old bắt nguồn từ plantlets đã được di thực và ra-trồng trong chậu bao gồm than bùn tiệt trùng khối lượng và vermiculite (3:1 tỷ lệ). Các chậu chồng bị phủ rõ ràng cốc có một vài lỗ trên nó và đã được tưới nước thường xuyên để giữ độ ẩm cao trong một phytotron trong 25 ngày. Cứng plantlets là ra-trồng trong một nhà kính Đặt ở một nhiệt độ ngày 21ºC đêm nhiệt độ 19ºC, độ ẩm tương đối 85% và một ngày dài của 12 h. ngay lập tức sau khi trồng, các plantlets đã được tưới và đất đầy đủ độ ẩm được duy trì thông qua tưới nước hàng ngày. Các proliferated thực vật cho thấy 100% tỷ lệ sống sót trong thời gian làm cứng và acclimatization. Kết quảĐể tối ưu hóa các phương tiện truyền thông cho tái tạo dâu trong một sơ bộ thử nghiệm, nút explants từ trồng cây dâu tây sarian L. tiêm chủng trên MS trung bình với các nồng độ khác nhau của sự phát triển máy điều chỉnh độ BẮP với bốn nồng độ (0, 0.5, 1 và 1.5 mg/l) một mình hoặc với ba nồng độ KIN (0, 0.2 đến 0,5 mg/l) hoặc IBA (0, 0.2 đến 0,5 mg/l). Các nhân hiệu quả của các phân đoạn nút từ thực vật là đáng kể khi ước tính khoảng bốn đến bốn tuần. Kết quả cho thấy rằng về 3-5 bắn nhiều chồi phát triển từ explants có nguồn gốc từ 4-5 tuần cũ cây giống nảy mầm trong ống nghiệm trên t

Kết quả (Việt) 2:

Hạt giống đã được rửa sạch dưới vòi nước trong vòng 5 - 10 phút để loại bỏ bề mặt
bị ô nhiễm và sau đó khử trùng bằng cách ngâm trong 70% ethanol trong 1 phút
với mạnh mẽ lắc sau 20 phút ở 4% sodium hypochlorite
có chứa một giọt Tween 20. Các hạt giống là sau đó rửa ba lần bằng
nước cất vô trùng trong tủ cấy để loại bỏ một lượng nhỏ của
khử trùng chất lỏng.
Tạp chí công nghệ nông nghiệp năm 2011, Vol. 7 (6): 1755-1763
1.757
phương tiện truyền thông và điều kiện Văn hóa
Đối nảy mầm, hạt giống được nuôi cấy trong cốc trên 30 ml chuẩn
Murashige và Skoog trung bình (1962) có chứa 3% (m / v) sucrose và 0,6%
(m / v ) agar. Nuôi cấy được ủ trong buồng tăng trưởng ở nhiệt độ 24
° C, một thời gian chiếu sáng 16h cung cấp với một cường độ ánh sáng 2000 lux cung cấp bởi
đèn huỳnh quang trắng.
Bắn phép nhân
phân đoạn Nodal (0,5-1 cm chiều dài) đã được nuôi cấy trên môi trường MS
có bổ sung BAP với bốn nồng độ (0, 0,1, 0,5, 1 và 1,5 mg / l)
kết hợp với ba nồng độ KIN (0, 0,2 và 0,5 mg / l) hoặc IBA (0, 0,2
và 0,5 mg / l). Tiệt trùng thực hiện bằng nồi hấp ở 121ºC trong 20 phút.
PH đã được điều chỉnh ở mức 5.8 trước khi thêm 0,6% (w / v) agar và 0,4% (w / v) kích hoạt
than. Năm cấy (đoạn nút) là vô trùng được nuôi cấy trong một cốc
chứa 50 ml môi trường cảm ứng. Cốc đã được bảo hiểm và đóng dấu
với nhựa gia dụng lá trong thời gian 5 tuần và sau đó chuyển giao cho các
điều kiện tương tự như đã đề cập ở trên.
Bud kéo dài
Sau 3 tuần, sự tái sinh của cấy trancfered để kéo dài
trung bình, trung bình kéo dài được bổ sung BAP 0.1 mg / l và
IBA 0,2 mg / l. Sau 5 tuần, các cây con rễ đã được di thực và outplanted trong chậu chứa khối lượng than bùn khử trùng và chất khoáng (3: 1 ratio). Các
chậu được bao phủ bằng cốc thủy tinh rõ ràng, có một vài lỗ trên đó và đã
thường xuyên tưới nước để giữ độ ẩm cao trong một phytotron trong 10 ngày. Cứng
cây con đã ra trồng trong nhà kính đặt ở 21 º C nhiệt độ ban ngày, một
19ºC Nhiệt độ ban đêm, độ ẩm tương đối 85% một thời gian chiếu sáng 16 giờ được cung cấp
với một cường độ ánh sáng 3000 lux cung cấp bởi huỳnh quang trắng
lamps.Immediately sau khi trồng, cây giống là đất được tưới tiêu và đủ
độ ẩm được duy trì thông qua tưới nước hàng ngày.
Thiết kế thí nghiệm và phân tích thống kê
Thí nghiệm được thực hiện trong thử nghiệm giai thừa trong hoàn toàn
thiết kế ngẫu nhiên. Dữ liệu được phân tích thống kê bằng cách sử dụng phần mềm SAS
(phiên bản 8). Khi ANOVA cho thấy hiệu quả điều trị đáng kể (5 hoặc 1%)
dựa trên F-test, các Nhiều Dải thử nghiệm của Duncan (P≤0.05) đã được sử dụng như một
1758
phương pháp để xác định phương pháp điều trị đã thống kê khác nhau từ khác
phương pháp điều trị.
Các nghiên cứu mô học
Các nhuộm mô học đã được thực hiện để thiết lập các ontogeny của
cấy chứa nụ shoot. Cấy ở các giai đoạn khác nhau của họ
phát triển (3, 8 và 12 ngày kể từ ngày tái sinh) được cố định trong FAA (formalin,
axit acetic, cồn tuyệt đối: 10, 5, 85; v / v) trong 24 giờ. Sau khi khử nước trong
ethanol (70, 95 và 100%) và xylene, kết cấu đã được cố định trong paraffin,
khúc với một lát mỏng ở 30 micromet và sau đó nhuộm màu với metylen xanh. Các
phần đã được chuẩn bị trong một lam cho quan sát dưới kính hiển vi ánh sáng.
Rễ và quen với khí hậu
Hầu hết các chồi trong môi trường làm dài có 0.1mg / l BAP với
theo 0,2 mg / l IBA đã bén rễ tốt. Nói chung, 4 weeks- root tuổi
cây con đã được di thực và ra trồng trong chậu chứa than bùn khử trùng
khối lượng và chất khoáng (3: 1 ratio). Các chậu được bao phủ bằng cốc rõ ràng
có một vài lỗ trên nó và thường xuyên được tưới nước để giữ độ ẩm cao trong một
phytotron trong thời gian 25 ngày. Cây con cứng được trồng dùng ngoài trời trong một nhà kính
đặt ở 21ºC ngày nhiệt độ, nhiệt độ 19ºC đêm, độ ẩm tương đối 85%
và độ dài của ngày từ 12 h. Ngay lập tức sau khi trồng, cây giống đã được tưới
và độ ẩm đất thích hợp được duy trì thông qua tưới nước hàng ngày. Các
nhà máy tăng lên nhanh chóng cho thấy tỷ lệ sống 100% trong thời gian làm cứng và
quen với khí hậu.
Kết quả
Để tối ưu hóa các phương tiện truyền thông cho sự tái sinh của Strawberry trong một sơ bộ
thí nghiệm, cấy nodal từ cây trồng của Fragaria sarian L. được
tiêm phòng trên môi trường MS với nồng độ khác nhau của điều hòa sinh trưởng của
BAP với bốn nồng độ (0, 0,5, 1 và 1,5 mg / l) một mình hoặc với ba
nồng độ KIN (0, 0,2 và 0,5 mg / l) hoặc IBA (0, 0,2 và 0,5 mg / l). Các
hiệu quả của phép nhân phân đoạn nút từ thực vật có ý nghĩa khi
ước tính 4-4 tuần. Kết quả cho thấy khoảng 3-5 nhiều shoot
chồi phát triển từ mẫu cấy có nguồn gốc từ 4-5 tuần tuổi cây giống đã nảy mầm
trong ống nghiệm trên t