Trong nghiên cứu này, có tổng cộng 360 mẫu thịt gà
đã được thu thập ngẫu nhiên từ tháng bảy-tháng chín
năm 2010 tại các lò mổ Shahrekord (nằm ở
tỉnh Chaharmahal va Bakhtiari, Iran). Trước khi
thu thập các mẫu thịt bắp thịt gà, bên ngoài
các bề mặt đã được tẩy trùng bằng cồn 70%
để giảm thiểu ô nhiễm bề mặt. Sử dụng vô trùng
kéo và kẹp mô, miếng của các cơ bắp
được thu gom riêng vào túi vô trùng và
vận chuyển bằng thùng làm lạnh để chế biến tiếp.
Các bề mặt của cơ bắp thịt gà đã làm cháy với
một thìa nước nóng, rạch và nuôi cấy trên 5% cừu
máu và thạch MacConkey (Merck, Đức) và
ủ trong 18-24 giờ ở 37 ° C. Thuộc địa với
những màu sắc đặc trưng và sự xuất hiện của E. coli đã được
chọn và sọc lại trên đĩa thạch máu và
tái sọc trên môi trường thạch EMB (Merck, Đức). Màu xanh lá cây
kim loại phân lập ánh được coi là E. coli
và các thuộc địa giả định được đặc điểm hóa sinh
được thử nghiệm cho sự tăng trưởng trên môi trường thạch đường sắt ba (TSI) và
agar lysine sắt (LIA), và cho oxy hóa / lên men
phân hủy glucose, sử dụng citrate,
sản xuất urease , indol lên men, tryptophan
suy thoái, suy thoái glucose (methyl đỏ kiểm tra)
và khả năng vận động. Các E. coli phân lập được lưu trữ trong
tryptic canh đậu nành (Merck, Đức) với 15% glycerol
ở -20 ° C (Mooljuntee et al. 2010). Colony xác nhận
được thực hiện bằng cách sử dụng phương pháp phân tử
(PCR). Xác nhận phân tử của các dòng vô tính đã được xác định
theo các khu vực gen 16S rRNA
từ E. coli được mô tả bởi Sabat et al. (2000) và
nhận dạng của E. coli O157: H7 phân lập được thực hiện
như mô tả của Fode-Vaughan et al. (2003).
Thiết kế và điều kiện PCR Primer được tối ưu hóa
cho DPCR sử dụng các khuyến nghị báo cáo trước đó.
Các điều kiện PCR để khuếch đại stx1
và stx2 được những người sử dụng cho pmoA
đang được dịch, vui lòng đợi..