4.4. Cytoprotection against reactiv

4.4. Cytoprotection against reactive oxygen species
The enhancement of phenytoin embryopathy in vivo and in embryo culture by depletion of GSH or
inhibition of its synthesis discussed above could reflect the teratological importance of the GSH-dependent enzyme GSH peroxidase, which uses GSH as a cofactor to detoxify hydrogen peroxide and lipid hydroperoxides by reducing them respectively to water and stable lipid alcohols, in the process producing GSSG. Depletion of GSH peroxidase by dietary deprivation of selenium enhanced phenytoin teratogenicity, implicating ROS and lipid hydroperoxides in teratological initiation, and suggesting the embryoprotective importance of this enzyme w20x. Another
cytoprotective enzyme, GSH reductase, is essential for reducing GSSG back to GSH. The potential
protective importance of this enzyme against embryonic oxidative stress was observed when inhibition of GSH reductase by pretreatment with a non-teratogenic dose of 1,3-bis2-chloroethyl.-1-nitrosourea BCNU. resulted in enhanced phenytoin teratogenicity see reviews.. Recently, both phenytoin-initiated embryonic DNA oxidation and teratogenicity were found to be enhanced in mutant mice with a hereditary deficiency in glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PD., an essential antioxidative enzyme that provides the NADPH cofactor necessary for GSH reductase activity w22,23x. Perhaps as importantly, embryopathies were enhanced even in untreated
G6PD-deficient mice, indicating that even endogenous oxidative stress can have substantial teratological relevance in the absence of adequate embryonic cytoprotection against ROS w23x. In addition to providing evidence for the teratological importance of oxidative stress, the embryoprotective role of G6PD may be particularly important because human hereditary deficiencies of this enzyme are common. SOD and catalase, which respectively detoxify superoxide
and hydrogen peroxide, also appear to be teratologically critical, since addition of these antioxidative enzymes to an embryo culture system block phenytoin-initiated DNA oxidation as well as protein oxidation initiated by both phenytoin and benzowaxpyrene, and completely abolish the embryopathic effects of both phenytoin and benzowaxpyrene w12,21x. Similarly in rat skin fibroblasts, SOD inhibited the enhanced genotoxicity of benzowaxpyrene, reflected by micronucleus formation, in UGT-deficient cells w8x.
4.5. Macromolecular repair
The teratological relevance of macromolecular repair has been investigated only for DNA damage.
Over 100 genes have been estimated to participate in human DNA repair, including both xenobiotic covalent binding and oxidative damage reviews w49–51x..
Variability in DNA repair recently has been employed to differentiate the teratologic role of DNA damage, as distinct from protein or lipid damage, or reversible interactions, in the mechanism of chemical teratogenesis, as well as to evaluate the role of DNA repair as a determinant of teratologic susceptibility w28x.
In knock-out mice with a heterozygous or homozygous deficiency in the p53 tumor suppressor
gene, which directly and indirectly facilitates DNA repair, the teratogenicity of both phenytoin and benzowaxpyrene were enhanced compared to p53- normal controls w28–30x. Furthermore, fetal resorptions vestigial remnants of fetuses that died in utero. initiated by benzowaxpyrene w28x or phenytoin w30x. were genotyped using the polymerase chain reaction, and found to be significantly more prevalent with p53-deficient genotypes. These studies did not directly
differentiate between teratological initiation by adduct formation or ROS-mediated oxidative damage.
However, in cell culture it appears that oxidative stress is causative in the activation of p53 by ultraviolet light, since p53 induction is blocked by N-acetylcysteine w52x. Most recently, p53-deficient mice treated only with normal saline were found to have a substantial increase in the incidence of fetal resorptions and other embryopathies, suggesting that even a lower level of oxidative stress, in the partial or complete absence of DNA repair, can have substantial
embryopathic effects w30x, consistent with the enhanced ROS-dependent teratological susceptibility of untreated G6PD-deficient mice discussed earlier.
Under normal conditions, the in vivo embryonic repair of oxidative DNA damage appears to be substantial, since embryonic levels of in situ 8-hydroxy-2X-deoxyguanosine initiated by maternal phenytoin treatment were reduced to baseline within 24 h, a rate identical to that in maternal liver w26x.

Kết quả (Việt) 1:

4.4. Cytoprotection chống lại phản ứng oxy loàiSự phát triển của phenytoin embryopathy tại vivo và phôi văn hóa bởi sự suy giảm của GSH hoặcsự ức chế của nó tổng hợp thảo luận ở trên có thể phản ánh tầm quan trọng teratological của peroxidase GSH GSH-phụ thuộc vào men tiêu hóa, sử dụng GSH như một cofactor để giải độc hydrogen peroxide và lipid hydroperoxides bằng cách giảm tương ứng với nước và rượu ổn định lipid, trong quá trình sản xuất GSSG. Sự suy giảm của GSH peroxidase bởi chế độ ăn uống thiếu thốn của selen tăng cường phenytoin teratogenicity, implicating ROS và lipid hydroperoxides trong giai đoạn khởi đầu teratological, và cho thấy tầm quan trọng này enzyme w20x embryoprotective. Kháccytoprotective enzyme, GSH reductase, là điều cần thiết cho việc giảm GSSG quay lại GSH. Tiềm năngbảo vệ tầm quan trọng của enzyme này chống lại stress oxy hóa phôi được quan sát thấy khi sự ức chế của GSH reductase bởi pretreatment với một liều lượng không gây quái thai của 1,3-bis 2-chloroethyl.-1-nitrosourea BCNU. kết quả là tăng cường phenytoin teratogenicity xem đánh giá... Gần đây, cả hai DNA phôi ôxi hóa phenytoin khởi xướng và teratogenicity đã được tìm thấy được tăng cường ở chuột đột biến với một thiếu hụt glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PD., một loại enzyme cần thiết antioxidative cung cấp cofactor NADPH cần thiết cho GSH reductase hoạt động w22, di truyền 23 x. Có lẽ là quan trọng, embryopathies đã được nâng cao ngay cả trong không được điều trịG6PD-deficient mice, indicating that even endogenous oxidative stress can have substantial teratological relevance in the absence of adequate embryonic cytoprotection against ROS w23x. In addition to providing evidence for the teratological importance of oxidative stress, the embryoprotective role of G6PD may be particularly important because human hereditary deficiencies of this enzyme are common. SOD and catalase, which respectively detoxify superoxideand hydrogen peroxide, also appear to be teratologically critical, since addition of these antioxidative enzymes to an embryo culture system block phenytoin-initiated DNA oxidation as well as protein oxidation initiated by both phenytoin and benzowaxpyrene, and completely abolish the embryopathic effects of both phenytoin and benzowaxpyrene w12,21x. Similarly in rat skin fibroblasts, SOD inhibited the enhanced genotoxicity of benzowaxpyrene, reflected by micronucleus formation, in UGT-deficient cells w8x.4.5. Macromolecular repairThe teratological relevance of macromolecular repair has been investigated only for DNA damage.Over 100 genes have been estimated to participate in human DNA repair, including both xenobiotic covalent binding and oxidative damage reviews w49–51x..Variability in DNA repair recently has been employed to differentiate the teratologic role of DNA damage, as distinct from protein or lipid damage, or reversible interactions, in the mechanism of chemical teratogenesis, as well as to evaluate the role of DNA repair as a determinant of teratologic susceptibility w28x.In knock-out mice with a heterozygous or homozygous deficiency in the p53 tumor suppressorgene, which directly and indirectly facilitates DNA repair, the teratogenicity of both phenytoin and benzowaxpyrene were enhanced compared to p53- normal controls w28–30x. Furthermore, fetal resorptions vestigial remnants of fetuses that died in utero. initiated by benzowaxpyrene w28x or phenytoin w30x. were genotyped using the polymerase chain reaction, and found to be significantly more prevalent with p53-deficient genotypes. These studies did not directlydifferentiate between teratological initiation by adduct formation or ROS-mediated oxidative damage.However, in cell culture it appears that oxidative stress is causative in the activation of p53 by ultraviolet light, since p53 induction is blocked by N-acetylcysteine w52x. Most recently, p53-deficient mice treated only with normal saline were found to have a substantial increase in the incidence of fetal resorptions and other embryopathies, suggesting that even a lower level of oxidative stress, in the partial or complete absence of DNA repair, can have substantialembryopathic effects w30x, consistent with the enhanced ROS-dependent teratological susceptibility of untreated G6PD-deficient mice discussed earlier.Under normal conditions, the in vivo embryonic repair of oxidative DNA damage appears to be substantial, since embryonic levels of in situ 8-hydroxy-2X-deoxyguanosine initiated by maternal phenytoin treatment were reduced to baseline within 24 h, a rate identical to that in maternal liver w26x.

Kết quả (Việt) 2:

4.4. Cytoprotection chống ôxy phản ứng
Việc tăng cường các embryopathy phenytoin trong cơ thể và trong nuôi cấy phôi bởi sự suy giảm của GSH hoặc
ức chế tổng hợp của nó đã thảo luận ở trên có thể phản ánh tầm quan trọng teratological của enzyme GSH peroxidase GSH-phụ thuộc, trong đó sử dụng GSH như một đồng yếu tố để giải độc hydrogen peroxide và lipid hydroperoxides bằng cách giảm chúng tương ứng với nước và rượu lipid ổn định, trong quá trình sản xuất GSSG. Sự suy giảm của GSH peroxidase do thiếu chế độ ăn uống của selen tăng cường phenytoin gây quái thai, liên lụy ROS và hydroperoxides lipid trong khởi teratological, và cho thấy tầm quan trọng embryoprotective của enzyme w20x này. Một
enzyme cytoprotective, GSH reductase, là điều cần thiết để giảm GSSG lại GSH. Các tiềm năng
quan trọng bảo vệ của enzyme này chống lại stress oxy hóa phôi đã được quan sát thấy khi sự ức chế của GSH reductase của tiền xử lý với một liều lượng không gây quái thai của 1,3-bis? 2-chloroethyl.-1-nitrosourea? BCNU. dẫn đến tăng cường sinh quái thai phenytoin? xem đánh giá .. Gần đây, cả hai quá trình oxy hóa DNA phôi phenytoin-khởi xướng và gây quái thai đã được tìm thấy sẽ được tăng cường trong những con chuột đột biến với sự thiếu hụt di truyền trong dehydrogenase glucose-6-phosphate G6PD., một loại enzyme chống oxy hóa thiết yếu cung cấp? các cofactor NADPH cần thiết cho hoạt động reductase GSH w22,23x. Có lẽ là quan trọng, embryopathies được nâng cao ngay cả trong không được điều trị
chuột G6PD thiếu, chỉ ra rằng thậm chí nội sinh căng thẳng oxy hóa có thể có liên quan teratological đáng kể trong trường hợp không đủ cytoprotection phôi chống lại ROS w23x. Ngoài việc cung cấp bằng chứng cho tầm quan trọng teratological của stress oxy hóa, vai trò của embryoprotective G6PD có thể đặc biệt quan trọng vì sự thiếu hụt di truyền con người của enzyme này là phổ biến. SOD và catalase, mà lần lượt giải độc superoxide
và hydrogen peroxide, dường như cũng có teratologically quan trọng, kể từ khi bổ sung các enzym chống oxy hóa để một nền văn hóa phôi hệ thống khối phenytoin-khởi xướng quá trình oxy hóa DNA cũng như quá trình oxy hóa protein khởi xướng bởi cả phenytoin và benzowaxpyrene, và hoàn toàn bãi bỏ các hiệu ứng embryopathic của cả hai phenytoin và benzowaxpyrene w12,21x. Tương tự như vậy trong các nguyên bào sợi da chuột, SOD ức chế sự genotoxicity nâng cao của benzowaxpyrene, phản ánh bởi sự hình thành vi nhân, trong các tế bào UGT thiếu w8x.
4.5. Sửa chữa cao phân tử
Sự liên quan teratological sửa chữa đại phân tử đã được điều tra chỉ thiệt hại DNA.
Hơn 100 gene đã được ước tính để tham gia vào sửa chữa DNA của con người, bao gồm cả kết cộng hóa trị xenobiotic và ôxy hoá? Đánh giá w49-51x ..
Sự thay đổi sửa chữa DNA gần đây đã có được sử dụng để phân biệt vai trò teratologic thiệt hại DNA, phân biệt với protein hoặc thiệt hại lipid, hoặc tương tác có thể đảo ngược, trong cơ chế teratogenesis hóa học, cũng như để đánh giá vai trò của sửa chữa DNA là một yếu tố quyết định của w28x nhạy cảm teratologic.
trong tiếng gõ chuột out với một thiếu dị hợp hoặc đồng hợp tử trong ức chế khối u p53
gen, mà trực tiếp và gián tiếp tạo điều kiện sửa chữa DNA, gây quái thai của cả hai phenytoin và benzowaxpyrene được nâng cao so với p53- chứng bình thường w28-30x. Hơn nữa, resorptions thai nhi? Còn sót lại dấu tích của những bào thai đã chết trong tử cung. khởi xướng bởi w28x benzowaxpyrene hoặc phenytoin? w30x. được kiểu gen bằng cách sử dụng phản ứng chuỗi polymerase, và tìm thấy là khá phổ biến với kiểu gen p53 thiếu. Những nghiên cứu này không trực tiếp
phân biệt giữa khởi teratological bởi hình thành sản phẩm cộng hoặc thiệt hại oxy hóa ROS qua trung gian.
Tuy nhiên, trong nuôi cấy tế bào mà nó xuất hiện căng thẳng oxy hóa là nguyên nhân trong việc kích hoạt p53 bởi ánh sáng cực tím, vì p53 cảm ứng bị chặn bởi N-acetylcysteine ​​w52x . Gần đây nhất, chuột p53 thiếu chỉ được điều trị bằng nước muối bình thường đã được tìm thấy có một sự gia tăng đáng kể về tỷ lệ mắc resorptions thai nhi và embryopathies khác, cho thấy rằng ngay cả một mức độ thấp hơn của stress oxy hóa, trong sự vắng mặt một phần hoặc hoàn toàn sửa chữa DNA, có thể đã đáng kể
hiệu ứng embryopathic w30x, phù hợp với tính nhạy cảm teratological ROS phụ thuộc vào nâng cao của chuột G6PD thiếu không được điều trị đã thảo luận trước đó.
trong điều kiện bình thường, trong cơ thể sửa chữa phôi thiệt hại DNA oxy hóa dường như là đáng kể, từ mức phôi in situ 8- hydroxy-2X-deoxyguanosine khởi xướng bởi điều trị phenytoin mẹ đã giảm đến đường cơ sở trong vòng 24 h, tỷ lệ giống như trong w26x gan mẹ.