5.4 như thế nào là cấu trúc chính của Protein được xác định? Cấu trúc chính (trình tự axit amin) của một loại protein có thể được xác định bởi một loạt các phương pháp hóa học và enzym. Ngoài ra, phương pháp quang phổ khối lượng có thể cũng được sử dụng. Trong các giao thức hóa và enzyme, một chuỗi polypeptide tinh khiết có mối liên kết disulfua đã bị phá vỡ là vật liệu khởi đầu. Phương pháp xác định dư lượng N-terminal và C-thiết bị đầu cuối của chuỗi được sử dụng để xác định axit amin mà có lúc kết thúc, và sau đó các protein cảm vào bộ định nghĩa của những mảnh vỡ nhỏ hơn bằng cách sử dụng enzym như cleavage trypsin hoặc chymotrypsin hoặc hóa chất bởi các đại lý như cyanogen bromua. Trình tự của các mảnh vỡ có thể được thu được bằng Edman suy thoái. Edman suy thoái là một phương pháp mạnh mẽ cho stepwise phát hành và xác định trình tự axit amin từ N-terminus của polypeptide. Trình tự axit amin của protein toàn bộ có thể được xây dựng lại sau khi trình tự bộ chồng chéo của các peptide mảnh vỡ được biết đến.Trong mass spectrometry, một chuỗi ion hóa protein được chia thành một mảngcủa chồng chéo các mảnh vỡ.
đang được dịch, vui lòng đợi..
