or in combination with methyl jasmo

or in combination with methyl jasmonate, on hairy root growth and taxane production.
The precursors were added to the media prior to autoclaving, and methyl jasmonate was added after autoclaving. The 0.6770.12g of fresh weight of 28-day-old hairy roots were placed into 250mL Erlenmeyer ?asks with 50mL DCR-M medium supplemented with precursors at concentrations of 1mM, 10mM or 100mM. The hairy roots from two ?asks were harvested after 48h, 1, 2, 3 and 4 weeks, and their dry weight (D.W.) was determined after lyophilization.
In the second part of the experiment, the 4-week-old hairy roots were placed into media supplemented with precursors (1, 10 or 100mM) and 100mM methyl jasmonate and cultured for 2 weeks. Hairy roots were also cultured for 4 weeks in DCR-M medium without either precursors or elicitor to serve as controls.


HPLC analysis

The contents of paclitaxel, baccatin III and 10-deacetylbaccatin III were determined in powdered dry tissue of transformed roots and in the medium samples. Sample cleaning was performed using the method described by Theodoridis et al. (1998a). The residue was re-dissolved in 100% methanol (300mL). The resulting solution (25mL) was inves-tigated by HPLC analysis using the DIONEX system with a UVD 340S diode array detector and an automated sample injector (ASI-100). For com-pound separation, a NovaPak Phenyl column (150_3.9mm) was eluted employing the gradient program described by Theodoridis et al. (1998b). The DAD spectrophotometer was set at a wave-length range from 215 to 275nm. The taxanes were identi?ed and quanti?ed at 227nm. The peaks were assigned by spiking the samples with the standards and comparing the retention times and UV spectra. The standard compounds paclitaxel and baccatin III were purchased at Sigma and 10-deacetylbaccatin III was donated by Prof. Jaziri from the Free University of Brussels.
All the experiments were conducted in triplicate, with the contents of two ?asks assayed from each treatment.



Results

The aim of this study was to examine the effects of the two precursors L-phenylalanine and p-amino benzoic acid, alone and in combination with methyl

Kết quả (Việt) 1:

hoặc kết hợp với jasmonate methyl, lông gốc tăng trưởng và taxane sản xuất.Các tiền chất đã được thêm vào phương tiện truyền thông trước khi khử trùng, và methyl jasmonate đã được bổ sung sau khi khử trùng. 0.6770.12g lượng tươi của 28 ngày tuổi lông gốc được chọn vào 250mL Erlenmeyer? yêu cầu với 50mL DCR-M phương tiện bổ sung với các tiền chất ở nồng độ 1mM, 10mM hoặc 100mM. Các rễ lông từ hai? yêu cầu đã được thu hoạch sau khi 48h, 1, 2, 3 và 4 tuần, và trọng lượng khô của họ (DW) được xác định sau khi lyophilization.Trong phần thứ hai của thử nghiệm, rễ lông 4 tuần tuổi được chọn vào phương tiện truyền thông bổ sung tiền chất (1, 10 hoặc 100 mM) và 100mM methyl jasmonate và nuôi cấy cho 2 tuần. Lông gốc cũng đã được nuôi cấy trong 4 tuần trong DCR-M mà không có tiền hoặc elicitor để phục vụ như điều khiển.Hệ HPLC phân tíchNội dung của paclitaxel, baccatin III và 10-deacetylbaccatin III được xác định trong bột mô chuyển rễ khô và trong các mẫu trung bình. Mẫu làm sạch được thực hiện bằng cách sử dụng phương pháp mô tả bởi Theodoridis et al. (1998a). Các dư lượng được tái hòa tan trong 100% methanol (300 mL). Các giải pháp kết quả (25mL) là inves-tigated bởi hệ HPLC phân tích bằng cách sử dụng hệ thống DIONEX với một máy dò mảng diode UVD 340S và một mẫu tự động phun (ASI-100). Tách com-pound, một cột NovaPak phênyl (150_3.9mm) eluted sử dụng gradient chương trình được mô tả bởi Theodoridis et al. (1998b). Phối DAD đã được đặt ở một loạt các chiều dài sóng từ 215 để 275nm. Các taxanes là identi? ed và quanti? ed tại 227nm. Các đỉnh núi được bố trí bởi spiking mẫu với các tiêu chuẩn và so sánh thời gian lưu giữ và quang phổ UV. Tiêu chuẩn hợp chất paclitaxel và baccatin III đã được mua tại Sigma và 10-deacetylbaccatin III được trao tặng bởi giáo sư Jaziri từ Đại học tự do Brussels.Tất cả các thí nghiệm được tiến hành trong triplicate, với nội dung của hai? yêu cầu assayed từ mỗi lần chữa trị.Kết quảMục đích của nghiên cứu này là để xem xét những ảnh hưởng của hai tiền thân L-nmol và p-amino axit benzoic, một mình và kết hợp với methyl

Kết quả (Việt) 2:

hoặc kết hợp với methyl jasmonate, tăng trưởng gốc lông và sản xuất taxane.
Các tiền chất được bổ sung vào các phương tiện truyền thông trước khi hấp khử trùng, và methyl jasmonate đã được thêm vào sau khi hấp khử trùng. Các 0.6770.12g trọng lượng tươi của rễ lông 28 ngày tuổi đã được đặt vào 250ml Erlenmeyer? Hỏi với 50ml DCR-M vừa bổ sung tiền chất ở nồng độ 1mm, 10mM hoặc 100mm. Rễ lông từ hai? Nhắc đi nhắc đã được thu hoạch sau 48 giờ, 1, 2, 3 và 4 tuần, và trọng lượng khô của họ (DW) đã được xác định sau khi lyophilization.
Trong phần thứ hai của thí nghiệm, các rễ lông 4 tuần tuổi là đặt vào phương tiện truyền thông có bổ sung tiền chất (1, 10 hoặc 100mm) và 100mm methyl jasmonate và nuôi cấy trong 2 tuần. Rễ lông cũng được nuôi cấy trong 4 tuần DCR-M vừa không có hai tiền chất hoặc elicitor để phục vụ như là điều khiển. phân tích HPLC Nội dung của paclitaxel, baccatin III và 10-deacetylbaccatin III đã được xác định trong mô khô bột rễ biến đổi và trong môi trường mẫu. Làm sạch mẫu điều tra được thực hiện bằng cách sử dụng phương pháp mô tả bởi Theodoridis et al. (1998a). Phần dư được tái hòa tan trong 100% methanol (300ml). Dung dịch thu được (25ml) là nhà đầu-tigated bằng phân tích HPLC sử dụng hệ thống DIONEX với UVD 340S mảng diode phát hiện và một vòi phun mẫu tự động (ASI-100). Đối với com-pound tách, một cột NovaPak Phenyl (150_3.9mm) được tách rửa sử dụng các chương trình Gradient được mô tả bởi Theodoridis et al. (1998b). Các quang phổ DAD đã được thiết lập ở một phạm vi chiều dài sóng từ 215 đến 275nm. Các taxanes là ed identi? Và ed quanti? Tại 227nm. Các đỉnh được gán bởi spiking các mẫu với các tiêu chuẩn và so sánh thời gian lưu giữ và phổ UV. Các hợp chất tiêu chuẩn paclitaxel và baccatin III đã được mua tại Sigma và 10-deacetylbaccatin III đã được tặng bởi GS Jaziri từ Đại học Tự do Brussels. Tất cả các thí nghiệm đã được tiến hành trong ba lần, với các nội dung của hai? nhắc đi nhắc khảo nghiệm từ mỗi lần điều trị. Kết quả Mục đích của nghiên cứu này là để kiểm tra hiệu ứng của hai tiền chất L-phenylalanine và axit benzoic p-amino, một mình và kết hợp với methyl