To ascertain the dechlorination int

To ascertain the dechlorination intermediates of 1,2,3,4,7,8-HxCDF, two separate experiments were performed using
1,2,4,7,8-PeCDF or 1,3,4,7,8-PeCDF as the halogenated
substrate. In the first experiment, 28 mL tubes were spiked
with toluene stock solutions of either 1,2,4,7,8-PeCDF or
1,3,4,7,8-PeCDF and toluene was allowed to volatilize. A total
of 3 mL of culture was added, and the final nominal
concentration of PeCDF was 2µM. Tubes were sacrificed at
set up and after 1 and 2 months. Two active tubes and one
autoclaved control tube were prepared for each time point
for both of the PeCDF congeners. In the second experiment,
dry sediment (0.15 g) was added to 60 mL serum bottles
followed by spiking 0.25 mL of a 147 µM (50 mg/L) stock
solution of 1,2,4,7,8-PeCDF or 1,3,4,7,8-PeCDF (in toluene),
respectively. After volatilization of toluene, 15 mL of culture
was transferred to each bottle under sterile and anaerobic
conditions to achieve a final nominal concentration of
1,2,4,7,8-PeCDF or 1,3,4,7,8-PeCDF of 2.45µM. At set up,
cultures in both experiments received 12µM 1,2,3,4-TeCB
and butyric acid, fermented yeast extract, and vitamin stock
solution at the same concentrations as the experiment with
1,2,3,4,7,8-HxCDF. The cultures were shaken in the dark at
120 rpm at 28°C.
Analytical Methods.Headspace samples (0.1 mL) were
analyzed for chloroethenes and ethene using an Agilent 6890
gas chromatograph equipped with a GS-GasPro (Agilent
Technologies, Inc., Santa Clara, CA) column (30 m×0.32
mm i.d.) and a flame ionization detector. The oven temperature program was 50°C for 2 min, increased at 15°C/
min to 180°C, and then held at 180°C for 4 min.
Samples of 1 or 2 mL of culture/sediment mixture were
removed for PCDD/F extraction using a sterile anoxic syringe
with an 18-gauge needle. (The entire 3 mL culture in the
tube experiment examining 1,2,4,7,8 and 1,3,4,7,8-PeCDF
dechlorination was extracted.) Samples were extracted and
prepared for analysis as described previously (33). Briefly,
after sample centrifugation, the aqueous phase was removed
to a separate vial, 2,2′,5-TrCB was added as a surrogate
standard to the sediment residue, and then the sediment
phase was rinsed with 1 mL of acetone to remove water. The
solid phase was extracted overnight with 3 mL of 2:1 volume/
volume (vol/vol) toluene/acetone solution and then for 4 h
with 1 mL of 2:1 vol/vol toluene/acetone solution and was
then rinsed with 1 mL of toluene. After each step, the solvent
phase was combined with the aqueous phase. Finally, the
pooled solvent was back-extracted by adding NaCl. Interfering
organic compounds were removed by passing the solvent
phase througha2mLglass pipette filled with Florisil (SigmaAldrich, St. Louis, MO) and eluting with 3 volumes of toluene.
The extract was then concentrated to about 2 mL. PCDD/Fs
and chlorobenzenes were analyzed using an Agilent 6890
gas chromatograph equipped with a 5973N mass selective
detector (GC-MS; Agilent Technologies, Inc., Santa Clara,
CA) and a HP-5MS (Agilent Technologies, Inc., Santa Clara,
CA) column (60 m×0.25 mm i.d.). The temperature program
was initial temperature at 70°C, increased by 10°C/min to
170°C, increased by 2°C/min to 200°C, increased by 5°C/
min to 220°C and held for 16 min, increased by 5°C/min
to 235 °C and held for 7 min, and finally, increased by 5
°C/min to 280°C. The post-run temperature was 300°C for
5 min. PCDD/Fs were detected and identified on the basis
of the retention times of standards and their target ions (m/z
460, OCDD; 374, 1,2,3,4,7,8-HxCDF; 340, PeCDFs; 306,
TeCDFs; and 186, 2,2′,5-TrCB). A qualifying ion was monitored to assure the correct identification (m/z458, OCDD;
376, 1,2,3,4,7,8-HxCDF; 342, PeCDFs; 304, TeCDFs; and 256,
2,2′,5-TrCB). The response factors of each PCDD/F congener
compared to the surrogate, 2,2′,5-TrCB, were calculated over
five concentration levels as a linear calibration curve. The
approximate detection limit for the PCDD/Fs was 1 ppb.
The PCDD/Fs were quantified on the basis of the
calibration curve and presented as averages of duplicate or

Kết quả (Việt) 1:

Để xác định trung gian dechlorination của 1,2,3,4,7,8-HxCDF, hai thí nghiệm riêng biệt được thực hiện bằng cách sử dụng1,2,4,7,8-PeCDF hoặc 1,3,4,7,8-PeCDF như là các halogenatedbề mặt. Trong thử nghiệm đầu tiên, 28 mL ống đã tăng vọtvới giải pháp chứng khoán toluene của một trong hai 1,2,4,7,8-PeCDF hoặc1,3,4,7,8-PeCDF và toluene đã được cho phép để volatilize. Tổng cộng3 ml của nền văn hóa đã được bổ sung, và những hư danh cuối cùngnồng độ của PeCDF là 2µM. ống đã hy sinh tạithiết lập và sau 1 và 2 tháng. Hai hoạt động ống và mộtautoclaved kiểm soát ống đã được chuẩn bị cho mỗi điểm thời giancho cả hai PeCDF congeners. Trong thử nghiệm thứ hai,khô trầm tích (0,15 g) đã được thêm vào chai 60 mL huyết thanhtheo sau spiking 0,25 mL của một cổ phiếu μm (50 mg/L) 147giải pháp của 1,2,4,7,8-PeCDF hoặc 1,3,4,7,8-PeCDF (trong toluene),tương ứng. Sau khi volatilization của toluene, 15 mL của văn hóađược chuyển cho mỗi chai dưới vô trùng và kỵ khíCác điều kiện để đạt được một tập trung trên danh nghĩa cuối cùng của1,2,4,7,8-PeCDF hoặc 1,3,4,7,8-PeCDF của 2.45µM. Thiết lập,nền văn hóa trong các thí nghiệm cả hai nhận được 12µM 1,2,3,4-TeCBvà các axít butyric, chiết xuất nấm men lên men và vitamin cổCác giải pháp ở nồng độ tương tự như thử nghiệm với1,2,3,4,7,8-HxCDF. Các nền văn hóa đã được rung động trong bóng tối tại120 rpm tại 28° C.Phân tích Methods.Headspace mẫu (cách 0.1 mL)phân tích cho chloroethenes và Eten bằng cách sử dụng một Agilent 6890sắc ký khí được trang bị với một GS-GasPro (AgilentCông nghệ, Inc, Santa Clara, CA) cột (30 m × 0.32ID mm) và một đầu báo lửa ion hóa. Chương trình lò nướng nhiệt độ là 50° C cho 2 phút, tăng lên 15° C /phút đến 180° C, và sau đó được tổ chức tại 180° C trong 4 phút.Mẫu 1 hoặc 2 ml của văn hóa/trầm tích hỗn hợpgỡ bỏ cho PCDD/F khai thác sử dụng một ống tiêm vô trùng thiếu ôxyvới một 18-đo kim. (3 mL toàn bộ văn hóa ở cácống thử nghiệm kiểm tra 1,2,4,7,8 và 1,3,4,7,8-PeCDFdechlorination được chiết xuất.) Mẫu đã được chiết xuất vàchuẩn bị sẵn sàng để phân tích như mô tả trước đó (33). Một thời gian ngắn,sau khi mẫu số, pha dung dịch nước đã được gỡ bỏđể một chai thuốc riêng biệt, 2, 2 ', 5-TrCB đã được bổ sung như là một thay thếtiêu chuẩn để các dư lượng trầm tích, và sau đó là trầm tíchgiai đoạn được rửa với 1 mL axeton để loại bỏ nước. Cácrắn giai đoạn được chiết xuất qua đêm với 3 mL của khối lượng 2:1 /khối lượng (vol/vol) toluene/axeton giải pháp và sau đó cho 4 hvới 1 mL của giải pháp 2:1 vol/vol toluene/axeton vàsau đó rửa với 1 mL toluene. Sau mỗi bước, dung môigiai đoạn đã được kết hợp với giai đoạn dung dịch nước. Cuối cùng, cácnhững dung môi được chiết xuất trở lại bằng cách thêm NaCl. Can thiệphợp chất hữu cơ đã được gỡ bỏ bằng cách đi qua dung môigiai đoạn througha2mLglass pipette đầy với Florisil (SigmaAldrich, St. Louis, MO) và eluting với 3 khối lượng toluene.Các chiết xuất sau đó tập trung vào khoảng 2 mL. PCDD/Fsvà chlorobenzenes được phân tích bằng cách sử dụng một Agilent 6890sắc ký khí được trang bị với một khối lượng 5973N chọn lọcMáy dò (GC-MS; Agilent công nghệ, Inc, Santa Clara,CA) và một HP-5MS (Agilent công nghệ, Inc, Santa Clara,CA) cột (60 m × 0.25 mm ID). Chương trình nhiệt độlà nhiệt độ ban đầu tại 70° C, tăng 10° C/phút170° C, tăng 2° C/phút đến 200° C, tăng 5° C /phút đến 220° C và tổ chức cho 16 phút, tăng 5° C/phút235 ° c và được tổ chức trong 7 phút, và cuối cùng, tăng thêm 5° C/phút đến 280° C. Nhiệt độ sau chạy là 300 ° C cho5 phút PCDD/Fs đã được phát hiện và được xác định trên cơ sởlần lưu giữ các tiêu chuẩn và mục tiêu của các ion (m/z460, OCDD; 374, 1,2,3,4,7,8-HxCDF; 340, PeCDFs; 306,TeCDFs; và 186, 2, 2 ', 5-TrCB). Một ion đủ điều kiện đã được giám sát để đảm bảo việc xác định chính xác (m/z458, OCDD;376, 1,2,3,4,7,8-HxCDF; 342, PeCDFs; 304, TeCDFs; và 256,2, 2 ', 5-TrCB). Các yếu tố phản ứng của mỗi cùng loại PCDD/Fso với các đại diện, 2, 2 ', 5-TrCB, được tính trênnăm cấp độ tập trung như là một đường cong hiệu chuẩn tuyến tính. Cácphát hiện gần đúng hạn cho PCDD/Fs là 1 ppb.PCDD/Fs đã định lượng trên cơ sở của cácđường cong hiệu chuẩn và trình bày là trung bình của bản sao hoặc