. Protoplast Fusion Technology Pres

. Protoplast Fusion Technology Presented by MONA ALBUREIKAN
2. What is protoplast fusion?• cell walls are removed.• They only have a cell membrane.• can be obtained by specific lytic enzymes.• It is a physical phenomenon.• it is possible to transfer some useful genes.• The hybrid protoplast = cytoplasm + two fused parent nuclei.• important tools in strain improvement.• Used for prokaryotic and eukaryotic cells.
3. Why use protoplast fusion?• create strains with desired properties.• industrial properties.• one of the most frequently used research tools.• a great potential for genetic analysis.• for strain improvement.
4. Enzymes used for breaking of cell walls:• Various enzymes used for this process.• Cellulase and pectinase or macerozyme for plant cell wall.• Bacterial cell wall are degraded by lysozyme.• Fungal wall degraded by Novozyme -234 ( glucanase and chitinase).• Streptomyces cell wall degraded by lysozyme and achromopeptidase
5. Methods of protoplast fusion:Protoplast fusion classified into two categories:• Spontaneous fusion: - often fuse spontaneously. - fuse through their plasmodesmata.• Induced fusion: - Fusion with the help of fusion inducing chemicals agent. - Normally , do not fuse with each other.
6. How the isolated protoplast can be induced to fuseby three ways;1- Mechanical fusion:• Isolated protoplast are brought into intimate physical contact mechanically• under microscope• using micromanipulator or perfusion micropipette.
7. How the isolated protoplast can be induced to fuse2- Chemofusion:• Several chemicals has been used to induce protoplast fusion.• such as sodium nitrate ,polyethylene glycol, Calcium ions(Ca++ ).• cause the isolated protoplast to adhere each other.• It is a non specific.• It is inexpensive.• It can cause massive fusion product.• It can be cytotoxic and non selecetive and having less fusion frequency.
8. How the isolated protoplast can be induced to fuse3- Electrofusion;• Used electric stimulation.• Used An electric field of low strength (10Kvm-1).• Electrofusion is easy to control.• It is having fusion frequency up to 100%.• It is gives reproducibility.• It is less cytotoxic.• The equipment is sophisticated and expensive.
9. Mechanism of protoplast fusion:
10. Protoplast fusion in bacteria:• In bacteria protoplast can be obtained.• Fusion can be carried out with low frequency in some gram positive organisms.• For gram negative bacteria it is possible to obtain protoplast but regeneration is difficult.• The procedure is highly efficient and yields upto 80% transformants.
11. References;• http://www.biocompare.com/images/bc/006/ArticleI mages/hybridomaguide_0304_8.jpg• http://www.aidic.it/IBIC2008/webpapers/96Verma.p df• http://en.wikipedia.org/wiki/Somatic_fusion• http://www.ihar.edu.pl/ZIKiT/hybrids.php4
12. THANK YOU

Kết quả (Việt) 1:

. Công nghệ nhiệt hạch protoplast trình bày bởi MONA ALBUREIKAN2. là gì protoplast fusion? • thành tế bào sẽ bị loại bỏ. • họ chỉ có một màng tế bào. • có thể thu được bằng các enzym lytic cụ thể. • đó là một hiện tượng vật lý. • nó có thể chuyển một số gen hữu ích. • protoplast lai = tế bào chất + hợp nhất phụ huynh hai hạt nhân. • công cụ quan trọng trong cải thiện căng. • được sử dụng nhất định và sinh vật nhân chuẩn các tế bào.3. tại sao sử dụng protoplast fusion? • tạo giống với thuộc tính mong muốn. • công nghiệp tiết. • một trong những thường xuyên sử dụng công cụ nghiên cứu. • một tiềm năng lớn cho việc phân tích di truyền. • cải thiện căng thẳng.4. được sử dụng để phá vỡ bức tường di động của enzym: • enzym khác nhau được sử dụng cho quá trình này. • Cellulase và pectinase hoặc macerozyme cho nhà máy điện tường. • vách tế bào vi khuẩn đang xuống cấp bởi lysozyme. • nấm tường suy thoái của Novozyme-234 (glucanase và chitinase). • Streptomyces vách tế bào bị suy do lysozyme và achromopeptidase5. phương pháp phản ứng tổng hợp nhiệt hạch: Protoplast protoplast được phân loại thành hai loại: • tự phát kết hợp:-thường cầu chì một cách tự nhiên. -cầu chì qua của họ plasmodesmata. • gây phản ứng tổng hợp: - Fusion với sự giúp đỡ của fusion inducing đại lý hóa chất. -Bình thường, không cầu chì với nhau.6. làm thế nào protoplast bị cô lập có thể được gây ra để fuseby ba cách; 1-cơ khí nhiệt hạch: • cô lập protoplast được mang vào thân mật mechanically• liên hệ vật lý theo microscope• sử dụng micromanipulator hoặc truyền dịch micropipette.7. làm thế nào protoplast bị cô lập có thể được gây ra để fuse2-Chemofusion: • một số hóa chất đã được sử dụng để tạo ra các protoplast fusion. • như natri nitrat, polyethylene glycol, canxi ions(Ca++). • gây ra protoplast bị cô lập để tuân theo nhau. • đó là một không cụ thể. • đó là không tốn kém. • nó có thể gây ra phản ứng tổng hợp lớn sản phẩm. • nó có thể là độc tế bào và không selecetive và có ít hơn tần số phản ứng tổng hợp.8. làm thế nào protoplast bị cô lập có thể được gây ra để fuse3-Electrofusion; kích thích điện sử dụng •. • sử dụng một điện trường của sức mạnh thấp (10Kvm-1). • Electrofusion là dễ dàng để kiểm soát. • nó có tần số tổng hợp lên đến 100%. • đó là cung cấp cho reproducibility. • đó là ít độc tế bào. • thiết bị là phức tạp và tốn kém.9. cơ chế của phản ứng tổng hợp protoplast:10. protoplast fusion trong vi khuẩn: • trong vi khuẩn protoplast có thể thu được. • nhiệt hạch có thể được thực hiện với tần số thấp ở một số sinh vật gram Dương. • đối với vi khuẩn gram âm có thể có được protoplast nhưng tái sinh là khó khăn. • các thủ tục hiệu quả cao và sản lượng tối đa 80% transformants.11. tài liệu tham khảo; • http://www.biocompare.com/images/bc/006/ArticleI mages/hybridomaguide_0304_8.jpg• http://www.aidic.it/IBIC2008/webpapers/96Verma.p df• http://en.wikipedia.org/wiki/Somatic_fusion • http://www.ihar.edu.pl/ZIKiT/hybrids.php412. CẢM ƠN BẠN

Kết quả (Việt) 2:

. Nguyên hình Fusion Công nghệ trình bày bởi Mona ALBUREIKAN
2. Phản ứng tổng hợp nguyên hình là gì? • thành tế bào được loại bỏ. • Họ chỉ có một màng tế bào. • Có thể thu được bằng enzyme lytic cụ thể. • Đây là một hiện tượng vật lý. • có thể chuyển một số gen hữu ích. • Các nguyên hình lai = tế bào chất + hai hạt nhân mẹ hợp nhất. • các công cụ quan trọng trong việc cải thiện sức căng. • Được sử dụng cho các tế bào prokaryote và nhân điển hình.
3. Tại sao sử dụng hợp nguyên hình? • tạo giống với đặc tính mong muốn. • tài sản công nghiệp. • một trong những công cụ nghiên cứu thường xuyên nhất được sử dụng. • một tiềm năng lớn để phân tích di truyền. • cải thiện căng thẳng.
4. Các enzyme dùng để phá vỡ thành tế bào:. • enzyme khác nhau được sử dụng cho quá trình này • Cellulase và pectinase hoặc macerozyme tường tế bào thực vật • vách tế bào vi khuẩn bị phân hủy bởi lysozyme • tường nấm phân hủy bởi Novozyme -234 (glucanase và chitinase)... • tường Streptomyces tế bào bị phân hủy bởi lysozyme và achromopeptidase
5. Phương pháp tổng hợp nguyên hình: nguyên hình hợp phân thành hai loại: • hợp tự phát: - thường cầu chì một cách tự nhiên. . - Cầu chì qua plasmodesmata của họ • cảm ứng nhiệt hạch: - Fusion với sự giúp đỡ của các phản ứng tổng hợp gây đại lý hóa chất. - Thông thường, không kết hợp được với nhau.
6. Làm thế nào các kiểu mẫu đầu tiên cô lập có thể được gây ra để fuseby ba cách; 1- hợp cơ khí: • nguyên hình Isolated được đưa vào tiếp xúc vật lý thân mật một cách máy móc • dưới kính hiển vi • sử dụng vi thao hoặc tưới máu micropipette.
7. Làm thế nào các kiểu mẫu đầu tiên cô lập có thể được gây ra để fuse2- Chemofusion: • Một số hóa chất đã được sử dụng để tạo ra phản ứng tổng hợp nguyên hình • như natri nitrat, polyethylene glycol, các ion canxi (Ca ++) • gây ra các kiểu mẫu đầu tiên bị cô lập để tuân nhau • Nó... là không cụ thể. • Nó là không tốn kém. • Nó có thể gây ra phản ứng tổng hợp sản phẩm lớn. • Nó có thể gây độc tế bào và không selecetive và có kết hợp tần số ít hơn.
8. Làm thế nào các kiểu mẫu đầu tiên cô lập có thể được gây ra để fuse3- Electrofusion;.. • Được sử dụng kích thích điện • Được sử dụng Một điện trường của sức mạnh thấp (10Kvm-1) • Electrofusion là dễ dàng để kiểm soát • Đó là có kết hợp tần số lên đến 100% •.. nó được cho tái lặp. • nó ít gây độc tế bào. • Các thiết bị tinh vi và đắt tiền.
9. Cơ chế của phản ứng tổng hợp nguyên hình:
10. Nguyên hình phản ứng tổng hợp ở vi khuẩn:. • Ở vi khuẩn nguyên hình có thể thu được • Fusion có thể được thực hiện với tần số thấp trong một số vi khuẩn gram dương • Đối với vi khuẩn gram âm có thể để có được kiểu mẫu đầu tiên nhưng tái sinh là khó khăn • Các thủ tục có hiệu quả cao.. và sản lượng tối đa 80% biến nạp.
11. Tài liệu tham khảo; • http://www.biocompare.com/images/bc/006/ArticleI pháp sư / hybridomaguide_0304_8.jpg • http://www.aidic.it/IBIC2008/webpapers/96Verma.p df • http: // en .wikipedia.org / wiki / Somatic_fusion • http://www.ihar.edu.pl/ZIKiT/hybrids.php4
12. CHO TÔI BIẾT