Weigh 10.0 g of ham or salami and t

Weigh 10.0 g of ham or salami and transfer to a
blender. Add 100 mL of deionized water to the meat
sample. Liquify the meat sample in the blender for 1
minute. Heat the liquified sample and maintain the temperature
of the sample between 70 o
C and 80 o
C for 15
min.6-9 Allow the sample to cool to room temperature.
Centrifuge the sample at 4960 x g (6000 rpm in a
Beckman GA-10 rotor) for 10 min. Remove the
supernatant. Successively filter the supernatant through
the following filters: Whatman No. 2 and GF/A filters
and 1.2 µm and 0.2 µm Acrodisc filters. Collect the
filtrate for HPLC analysis.
RESULTS AND DISCUSSION
Figure 1 shows a separation of the nitrate and nitrite
standards. Figure 2 shows a separation of nitrate and
nitrite from the ham extract. The amounts of nitrate and
nitrite, as shown in Table 1, were determined to be 5.37
and 11.6 mg/kg, respectively. The dip before the nitrite
peak apparently is due to the elution of chloride (approximately
400 mg/L). The amount of chloride can be
determined using a suppressed conductivity detector in
series with the UV detector (data not shown).
Figure 3 shows a separation of nitrate and nitrite from
the salami extract. As shown in Table 1, the amounts of
nitrate and nitrite in salami were determined to be 98.5 and
108 mg/kg, respectively. Similar to the ham sample, there
is a dip immediately before the nitrite peak due to the
elution of chloride.
Precision
The degree of agreement among individual test
results was determined and expressed as Relative
Standard Deviations (RSDs). Table 3 shows the RSDs
of retention time and peak areas of nitrate and nitrite.
For both ham and salami, peak area RSDs were below
3% and retention time RSDs were less than 0.5%. No
detectable changes in retention time were noticed after
117 injections of salami and ham samples.
Recovery
As shown in Table 2, predetermined amounts of
nitrate or nitrite standards were added to each of the meat
samples and allowed to be absorbed by the meat samples
for 10 min. The amounts of nitrate and nitrite were then
determined following the same extraction and separation
processes. Table 2 shows the recovery results. Over 90%
recoveries of nitrate and nitrite standards from both the
ham and salami samples were obtained.
RSDs RSDs RSDs RSDs
of Nitrite of Nitrate of Nitrite of Nitrate
Peak Area Peak Area Retention Retention
(%) (%) Time (%) Time (%)
Salami, n = 5 2.7 2.9 0.2 0.3
Ham, n = 5 2.3 1.0 0.2 0.2
Linearity and Limit of Detection
Detection limits and linearity data are shown in
Table 4. The coefficients of determination for nitrate
and nitrite were 0.9991 and 0.9995, respectively. These
values were calculated over three orders of magnitude.
Detection limits for nitrate and nitrite, determined at
three times the noise, were 50 µg/L (500 µg/kg) and
30 µg/L (300 µg/kg), respectively.
Nitrate 500 µg/kg–3.75 g/kg 0.9991 500 µg/kg
Nitrite 300 µg/kg–3.00 g/kg 0.9995 300 µg/kg
Concentration Range r2 Detection
Limit
Table 3 Peak Area and Retention Time RSDs
Salami 108.0 98.5 10.8 9.85 Table 4 Detection Limits and Linearity Data
Ham 11.6 5.37 1.16 0.54
Amount of Amount of Concentration Concentration
Nitrite Nitrate of Nitrite in of Nitrate in
(mg/kg) (mg/kg) 100 mL of 100 mL of
Extract (mg/L) Extract (mg/L)
Table 1 Concentration of Nitrate and Nitrite
in the Ham and Salami Samples
Amount Amount Total Recovery
Present Added Recovered (%)
(mg/kg) (mg/kg) (mg/kg)
Nitrite in Salami 108.0 120.0 218.0 92
Nitrate in Salami 98.5 100.0 195.0 97
Nitrite in Ham 11.6 15.0 27.0 103
Nitrate in Ham 5.37 6.50 11.4 92
Table 2 Spike Recovery Data
Determination of Nitrate and Nitrite in Meat Using
High-Performance Anion-Exchange Chromatography
IonPac is a registered trademark of Dionex Corporation.
CONCLUSION
The method described in this Note is a simple and
accurate analytical method for determining nitrate
and nitrite in meat samples. The IonPac AS11
column provides ideal selectivity not only for the
separation of
nitrate and nitrite, but also for the separation of the
analytes from matrix components, which are eluted
mostly in the void.
With the 5-min, 100 mM sodium hydroxide wash
step, retained ions and organic species are eluted.
Thus, this method eliminates the need for time
consuming and costly sample pretreatment using
reversed-phase or ion-exchange cartridges and protein
precipitating reagents.
The DX-500 system (PEEK system) is designed to be
compatible with high-pH eluents such as sodium
hydroxide. Combined with the AS40 autosampler, the
analytical system provides an ion-free environment for
the determination of nitrate and nitrite at the sub-mg/L
(sub-ppm) levels.
PRECAUTIONS
Detectable changes (more than 10%) of nitrate and
nitrite concentrations from the meat extracts were
observed after the extracts were kept at room temperature
for more than 24 h. Analysis should be completed
within 24 h after extraction.
Chloride was present at concentrations of approximately
400 mg/L and 1600 mg/L in the ham and salami
sa

Kết quả (Việt) 2:

Cân 10,0 g ham hoặc xúc xích và chuyển giao cho một
máy xay sinh tố. Thêm 100 ml nước cất để thịt
mẫu. Hóa lỏng các mẫu thịt trong máy xay sinh tố cho 1
phút. Đun nóng mẫu hóa lỏng và duy trì nhiệt độ
của mẫu từ 70 o
C đến 80 o
C trong 15
min.6-9 phép mẫu để nguội đến nhiệt độ phòng.
Máy ly tâm các mẫu ở 4960 xg (6000 rpm trong một
Beckman GA-10 rotor) trong 10 phút. Tháo
nổi. Tiếp lọc gạn qua
các bộ lọc sau: Whatman số 2 và GF Một bộ lọc /
và 1,2 mm và 0,2 mm lọc Acrodisc. Thu thập các
dịch lọc để phân tích HPLC.
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
Hình 1 cho thấy một sự tách biệt của nitrat và nitrit
tiêu chuẩn. Hình 2 cho thấy một sự tách biệt của nitrat và
nitrit từ chiết ham. Lượng nitrat và
nitrit, như thể hiện trong Bảng 1, được xác định là 5,37
và 11,6 mg / kg, tương ứng. Nhúng trước nitrit
cao điểm rõ ràng là do sự rửa giải của clorua (khoảng
400 mg / L). Lượng clorua có thể được
xác định bằng một máy dò độ dẫn đàn áp trong
series với các máy dò UV (dữ liệu không hiển thị).
Hình 3 cho thấy một sự tách biệt của nitrat và nitrit từ
các chiết xuất xúc xích. Như thể hiện trong Bảng 1, lượng
nitrat và nitrit trong xúc xích đã được xác định là 98,5 và
108 mg / kg, tương ứng. Tương tự như các mẫu thịt giăm bông, có
là một sự sụt giảm ngay lập tức trước khi đỉnh nitrit do sự
rửa giải của clorua.
Chính xác
Mức độ thoả thuận giữa các cá nhân kiểm tra
kết quả đã được xác định và thể hiện như là tương đối
chuẩn sai lệch (RSDs). Bảng 3 cho thấy RSDs
thời gian lưu nước và khu vực đỉnh cao của nitrat và nitrit.
Đối với cả hai ham và salami, RSDs vùng đỉnh dưới mức
3% và RSDs thời gian lưu giữ ít hơn 0,5%. Không có
thay đổi phát hiện trong thời gian lưu giữ đã được nhận thấy sau
117 tiêm xúc xích và giăm bông mẫu.
Phục hồi
Như thể hiện trong Bảng 2, xác định trước lượng
tiêu chuẩn nitrat hoặc nitrit đã được thêm vào mỗi thịt
mẫu và cho phép để được hấp thụ bởi các mẫu thịt
trong 10 min. Lượng nitrat và nitrit sau đó đã được
xác định sau quá trình chiết tách và cùng một
quy trình. Bảng 2 cho thấy các kết quả phục hồi. Hơn 90%
hồi phục của tiêu chuẩn nitrat và nitrit từ cả hai
mẫu giăm bông và xúc xích đã thu được.
RSDs RSDs RSDs RSDs
của Nitrit của Nitrate của Nitrit của Nitrate
Đỉnh Diện tích Đỉnh Diện tích Retention Retention
(%) (%) Thời gian (%) Thời gian (% )
Salami, n = 5 2,7 2,9 0,2 0,3
Hàm, n = 5 2,3 1,0 0,2 0,2
Độ tuyến tính và Giới hạn phát hiện
giới hạn phát hiện và dữ liệu tuyến tính được trình bày trong
Bảng 4. các hệ số xác định cho nitrate
và nitrite là 0,9991 và 0,9995, tương ứng. Những
giá trị được tính toán qua ba đơn đặt hàng của các cường độ.
Giới hạn phát hiện cho nitrate và nitrite, xác định tại
ba lần so với tiếng ồn, là 50 mg / L (500 mg / kg) và
30 mg / L (300 mg / kg), tương ứng.
Nitrate 500 mg / kg-3,75 g / kg 0,9991 500 mg / kg
nitrit 300 mg / kg-3,00 g / kg 0,9995 300 mg / kg
Nồng Dải r2 Detection
Limit
Bảng 3 Đỉnh Diện tích và Retention Time RSDs
Salami 108,0 98,5 10,8 9,85 Bảng 4 Detection Giới hạn và tuyến tính dữ liệu
Hàm 11,6 5,37 1,16 0,54
số tiền số tiền Nồng Nồng độ
nitrit Nitrate của Nitrit trong của Nitrate trong
(mg / kg) (mg / kg) 100 mL 100 mL
Extract (mg / L) Extract (mg / L )
Bảng 1 Nồng độ Nitrate và Nitrite
trong các mẫu Ham và Salami
số tiền số tiền Tổng phục hồi
trình bày thêm Tác phục hồi (%)
(mg / kg) (mg / kg) (mg / kg)
Nitrit trong Salami 108,0 120,0 218,0 92
Nitrate trong Salami 98,5 100,0 195,0 97
Nitrit ở Hàm 11.6 15.0 27.0 103
Nitrate ở Hàm 5,37 6,50 11,4 92
Bảng 2 Spike phục hồi dữ liệu
Xác định nitrat và nitrit trong thịt Sử dụng
hiệu suất cao Anion-Exchange Sắc ký
IonPac là thương hiệu được đăng ký của Tập đoàn Dionex.
KẾT LUẬN
phương pháp này được mô tả trong chú giải này là một đơn giản và
phương pháp phân tích chính xác để xác định nitrat
và nitrit trong mẫu thịt. Các IonPac AS11
cột cung cấp chọn lọc lý tưởng không chỉ cho việc
tách
nitrat và nitrit, mà còn cho việc tách các
chất phân tích từ các thành phần ma trận, được tách rửa
chủ yếu trong khoảng không.
Với 5 phút, 100 mM sodium hydroxide rửa
bước, giữ lại các ion và các loài hữu cơ được tách rửa.
vì vậy, phương pháp này giúp loại bỏ sự cần thiết cho thời gian
tiêu thụ và mẫu trước khi điều trị tốn kém sử dụng
giai đoạn đảo ngược hoặc hộp mực trao đổi ion và protein
chất phản ứng kết tủa.
DX-500 hệ thống (hệ thống PEEK) được thiết kế để
tương thích với eluents pH cao như natri
hydroxit. Kết hợp với các mẫu tự động AS40, các
hệ thống phân tích cung cấp một môi trường ion-miễn phí cho
việc xác định nitrat và nitrit tại tiểu mg / L
(sub-ppm) cấp.
THẬN TRỌNG
thay đổi Phát hiện (hơn 10%) nitrat và
nồng độ nitrit từ thịt chiết xuất đã được
quan sát thấy sau khi chiết xuất được giữ ở nhiệt độ phòng
cho hơn 24 h. Phân tích cần được hoàn thành
trong vòng 24 giờ sau khi khai thác.
Chloride đã có mặt ở nồng độ khoảng
400 mg / L và 1600 mg / L trong giăm bông và xúc xích
sa