In the first moment after an enzyme

In the first moment after an enzyme is mixed with substrate, no product has been formed and no intermediates exist. The study of the next few milliseconds of the reaction is called pre-steady-state kinetics. Pre-steady-state kinetics is therefore concerned with the formation and consumption of enzyme–substrate intermediates (such as ES or E*) until their steady-state concentrations are reached.

This approach was first applied to the hydrolysis reaction catalysed by chymotrypsin. Often, the detection of an intermediate is a vital piece of evidence in investigations of what mechanism an enzyme follows. For example, in the ping–pong mechanisms that are shown above, rapid kinetic measurements can follow the release of product P and measure the formation of the modified enzyme intermediate E*. In the case of chymotrypsin, this intermediate is formed by an attack on the substrate by the nucleophilic serine in the active site and the formation of the acyl-enzyme intermediate.

In the figure below, the enzyme produces E* rapidly in the first few seconds of the reaction. The rate then slows as steady state is reached. This rapid burst phase of the reaction measures a single turnover of the enzyme. Consequently, the amount of product released in this burst, shown as the intercept on the y-axis of the graph, also gives the amount of functional enzyme which is present in the assay

Kết quả (Việt) 1:

Ở thời điểm đầu tiên sau khi một loại enzyme được trộn với chất nền, không có sản phẩm đã được hình thành và trung gian không tồn tại. Nghiên cứu của vài mili giây tiếp theo của phản ứng được gọi là động học trước steady nhà nước. Nhà nước trước steady động học là do đó có liên quan với sự hình thành và tiêu thụ của các enzym-bề mặt trung gian (chẳng hạn như ES hoặc E *) cho đến khi đạt được của nồng độ trạng thái ổn định.Cách tiếp cận này lần đầu tiên được áp dụng cho phản ứng thủy phân phản bởi chymotrypsin. Thông thường, phát hiện một trung gian là một phần quan trọng của bằng chứng trong điều tra của những gì cơ chế một enzym sau. Ví dụ, trong các cơ chế bóng-bàn được hiển thị ở trên, các đo đạc động nhanh chóng có thể làm theo phát hành sản phẩm P và đo lường sự hình thành của enzym lần trung gian E *. Trong trường hợp của chymotrypsin, Trung cấp này được hình thành bởi một cuộc tấn công trên bề mặt bởi serine nucleophilic trong hoạt động và sự hình thành của các trung gian acyl-enzym.Trong hình dưới đây, sản xuất enzyme E * nhanh chóng trong vài giây đầu tiên của phản ứng. Tỷ lệ sau đó chậm như đạt đến trạng thái ổn định. Giai đoạn này nhanh chóng bùng nổ của phản ứng các biện pháp duy nhất doanh thu của enzym. Do đó, số lượng sản phẩm phát hành trong này burst, Hiển thị như là đánh chặn trên trục y của biểu đồ, cũng cung cấp cho số lượng chức năng enzym mà là hiện diện trong các khảo nghiệm

Kết quả (Việt) 2:

Trong giây phút đầu tiên sau khi một enzyme được pha trộn với các chất nền, không có sản phẩm đã được hình thành và không có trung gian tồn tại. Các nghiên cứu trong vài mili giây tiếp theo của phản ứng được gọi là động học trước trạng thái ổn định. Động học Pre-trạng thái ổn định do đó liên quan với sự hình thành và tiêu thụ của enzyme-cơ chất trung gian (như ES hay E *) cho đến khi nồng độ trạng thái ổn định của họ là đạt. Phương pháp này lần đầu tiên được áp dụng cho các phản ứng thủy phân xúc tác bởi chymotrypsin. Thông thường, việc phát hiện một chất trung gian là một phần quan trọng của bằng chứng trong cuộc điều tra của cơ chế gì một enzyme sau. Ví dụ, trong cơ chế ping-pong được trình bày ở trên, đo động nhanh có thể làm theo sự ra đời của sản phẩm P và đo lường sự hình thành của các sửa đổi enzyme E trung gian *. Trong trường hợp của chymotrypsin, trung gian này được hình thành bởi một cuộc tấn công trên bề mặt của serine ái nhân trong các trang web đang hoạt động và sự hình thành của các acyl-enzyme trung gian. Trong hình dưới đây, các enzyme sản xuất E * nhanh chóng trong vài giây đầu tiên của phản ứng. Tỷ lệ thì chậm như trạng thái ổn định đạt được. Giai đoạn bùng nổ nhanh chóng của các phản ứng đo doanh thu duy nhất của các enzyme. Do đó, số lượng sản phẩm phát hành trong vụ nổ này, hiển thị như đánh chặn trên trục y của đồ thị, cũng cung cấp cho lượng enzyme chức năng mà hiện diện trong các khảo nghiệm