Cả hai chất lỏng và agar gelled am vừa được sử dụng cho cácvăn hóa của protocorms (trong đó xuất hiện 50-70 ngày sau khi hạt giốngnảy mầm) và chỉ củng cố agar am đã được sử dụng cho nền văn hóagiả thân phân đoạn (từ cơ sở cây giống với 2-3chồi hoặc nút). Vừa được bổ sung khác nhaunồng độ (0, 1.0 hoặc 2,0 mg l 1) và kết hợp của auxins(axit axetic một Naphtalen (NAA) và 2,4-D) và cytokinins (BAPvà kinetin (KN)). Độ pH của môi trường được điều chỉnh để 5.8 trướcđể gelling với 0,8% agar (HiMedia). Agar gelled trung bình (100 ml)hoặc 50 ml của chất lỏng vừa được dispensed vào 250 ml Erlenmeyerbi-đông và autoclaved tại 121 8 c cho 20 phút 15 psi. Văn hóa tàuvới tiêm chủng hạt giống hoặc explants được duy trì trong một nền văn hóaPhòng có một 14-h, lúc 60 mmol m 2 s 1 được cung cấp bởi photoperiodđèn huỳnh quang trắng mát mẻ (Philips Truelight 36 W/86 65008 KB7, Philips, Ấn Độ) tại 25 2 8C. Các nền văn hóa lỏng (khoảng 100protocorms mỗi bình nón 250 ml có chứa 50 ml chất lỏng vừa)đã được lưu giữ trên một nền tảng shaker rpm 100 trong văn hóa phòng dướinhiệt độ giống hệt nhau và điều kiện ánh sáng.Sau 2 tuần lễ tiêm chủng, hạt đã được gỡ bỏ một cách ngẫu nhiên vàphân tán trong một giọt nước trên một slide kính và quan sát dưới mộtkính hiển vi ánh sáng (Labophot, Nikon, Nhật bản). Kể từ khi tất cả các hạt bị sưngnảy mầm, hạt giống nảy mầm tỷ lệ phần trăm được xác định bởi cáccông thức sau (vì thế khác biệt sưng lên từ unswollenhạt giống):
đang được dịch, vui lòng đợi..
