Protein preparation and 2-dimension

Protein preparation and 2-dimensional (2-D) electrophoresis were followed the method described by Yoon et al.
[28]. Cultures of strains were washed twice with ice-cold
phosphate-buffered saline (PBS; Invitrogen Co., Carlsbad,
CA, USA), and the samples were ground directly in liquid
nitrogen with a mortar and pestle. Sample lysis solution
containing 8 M urea (GE Healthcare, Uppsala, Sweden),
2 M thiourea (GE Healthcare), 4 % (w/v) 3-[(3-cholamidopropyl) dimethyl-ammonio]-1-propanesulfonate
(CHAPS; Sigma-Aldrich), 1 % (w/v) dithiothreitol (DTT;
Sigma-Aldrich), and 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride
(PMSF; Sigma-Aldrich) was mixed with ground samples.
Trichloroacetic acid precipitation was performed to concentrate and purify the proteins in the lysis solution extract.
Protein pellets were dissolved with rehydration solution
[8 M urea, 2 % (w/v) CHAPS, and 0.002 % (w/v) bromophenol blue (Sigma-Aldrich)]

Kết quả (Việt) 1:

Chuẩn bị protein và 2 chiều (2-D) điện được tiếp nối phương pháp mô tả bởi Yoon et al.[28]. nền văn hóa của chủng đã được rửa sạch hai lần với lạnhdung dịch muối đệm phosphat (PBS; Invitrogen co, Carlsbad,CA, Hoa Kỳ), và các mẫu đất trực tiếp trong chất lỏngnitơ với vữa và pestle. Mẫu lysis giải phápcó 8 M urê (GE y tế, Uppsala, Thuỵ Điển),2 M thiourea (GE chăm sóc sức khỏe), 4% (w/v) 3-[(3-cholamidopropyl) Dimetyl-ammonio] -1-propanesulfonate(CHAPS; Sigma-Aldrich), 1% (w/v) dithiothreitol (DTT;Sigma-Aldrich), và 1 mM phenylmethylsulfonyl florua(PMSF; Sigma-Aldrich) được trộn với đất mẫu.Axit tricloaxetic mưa được thực hiện để tập trung và tinh chế các protein trong các chiết xuất giải pháp lysis.Bột viên protein bị giải thể thức giải pháp[8phút urê, 2% (w/v) CHAPS và 0,002% (w/v) bromophenol màu xanh (Sigma-Aldrich)]