A sensitive and reproducible real-t

A sensitive and reproducible real-time PCR assay targeting the nuc gene of Staphylococcus aureus was applied for quantification of this microorganism in artificially and naturally contaminated raw milk samples. The S. aureus cell equivalents (SCEs) estimated by the real-time PCR method were two log scales higher than colony forming units (CFUs) estimated from a plate count method in artificially contaminated milk. The repeatability of the real-time PCR assay including the DNA isolation procedure was assessed by analysing the data derived from naturally contaminated samples. The relative standard deviation of the log-transformed data of four real-time PCR measurements including duplicate DNA isolations ranged between 11.3 and 1.0%. When analysing 80 bovine and 107 caprine naturally contaminated raw milk samples, the real-time PCR method yielded 19.3% more positive samples than the plate count method. With the exception of one sample, SCEs were always higher than CFUs. The difference between SCEs and CFUs was highly variable, and it was not possible to correlate real-time PCR-derived SCEs and CFUs. However, as each SCE detected by real-time PCR indicates a S. aureus cell, which is or has been present in the sample, this method offers the advantage of a retrospective analysis even of processed samples to aid food poisoning-related risk assessment

Kết quả (Việt) 1:

Một nhạy cảm và thể sanh sản nhiều thời gian thực Đảng Cộng sản Romania khảo nghiệm nhắm mục tiêu các gen nuc của Staphylococcus aureus áp dụng cho các định lượng của vi sinh vật này trong mẫu sữa nguyên nhân tạo và tự nhiên bị ô nhiễm. Các S. aureus di động tương đương (SCEs) ước tính bằng phương pháp PCR thời gian thực là hai đăng quy mô cao hơn thuộc địa hình thành các đơn vị (CFUs) dự kiến từ một phương pháp đếm tấm trong giả tạo bị ô nhiễm sữa. Độ của các khảo nghiệm Đảng Cộng sản Romania thời gian thực, trong đó có thủ tục cô lập DNA được đánh giá bởi phân tích các dữ liệu có nguồn gốc từ mẫu tự nhiên bị ô nhiễm. Độ lệch chuẩn tương đối của các dữ liệu chuyển đổi đăng nhập của Đảng Cộng sản Romania phép đo thời gian thực bao gồm trùng lặp DNA isolations trải dài giữa 11.3 và 1,0%. Khi phân tích 80 bò và 107 caprine tự nhiên ô nhiễm sữa nguyên mẫu, phương pháp PCR thời gian thực mang lại mẫu 19,3% thêm tích cực hơn phương pháp tính tấm. Ngoại trừ một trong những mẫu, SCEs đã luôn luôn cao hơn CFUs. Sự khác biệt giữa SCEs và CFUs hay thay đổi, và nó đã không thể tương quan thời gian thực nguồn gốc PCR SCEs và CFUs. Tuy nhiên, như mỗi SCE phát hiện bởi Đảng Cộng sản Romania thời gian thực cho thấy một tế bào S. aureus, hay đã được trình bày trong mẫu, phương pháp này cung cấp lợi thế của một phân tích quá khứ ngay cả các mẫu chế biến để hỗ trợ đánh giá rủi ro liên quan đến ngộ độc thực phẩm

Kết quả (Việt) 2:

Một xét nghiệm PCR real-time nhạy cảm và tái sản xuất với gen nuc của Staphylococcus aureus đã được áp dụng để định lượng vi sinh vật này trong nhân tạo và tự nhiên bị nhiễm bẩn mẫu sữa nguyên liệu. Các tế bào tương đương S. aureus (SCEs) ước lượng bằng phương pháp real-time PCR là hai log quy mô cao hơn thuộc địa hình thành các đơn vị (CFUs) ước tính từ một phương pháp đếm tấm trong sữa nhân tạo có nhiễm. Độ lặp lại của xét nghiệm PCR thời gian thực bao gồm các thủ tục ly DNA được đánh giá bằng cách phân tích các dữ liệu thu được từ các mẫu bị ô nhiễm một cách tự nhiên. Độ lệch chuẩn tương đối của dữ liệu log-chuyển bốn đo PCR thời gian thực bao gồm phân lập DNA lặp lại dao động từ 11,3 và 1,0%. Khi phân tích 80 bò và 107 thuộc về dê tự nhiên bị nhiễm bẩn mẫu sữa nguyên liệu, phương pháp real-time PCR thu được 19,3% mẫu dương tính hơn so với phương pháp đếm tấm. Với ngoại lệ của một mẫu, SCEs luôn cao hơn so CFUs. Sự khác biệt giữa SCEs và CFUs là rất khác nhau, và nó đã không thể để tương quan thời gian thực SCEs PCR-nguồn gốc và CFUs. Tuy nhiên, vì mỗi SCE phát hiện bằng PCR thời gian thực cho thấy một tế bào S. aureus, đang hoặc đã có mặt trong mẫu, phương pháp này có lợi thế của một phân tích hồi thậm chí các mẫu xử lý để giúp đánh giá nguy cơ ngộ độc thực phẩm liên quan