sublethally injured or dormant bact

sublethally injured or dormant bacteria often cannot be detected. In addition, culture-based analysis of viability is not an adequate predictor for probiotic functionality, which should be the ultimate marker for technological developments, as recently shown by Ma¨tto ¨ et al.. Therefore, in the field of probiotics, additional methods should be used to study cell physiology for fundamental research, process development and monitoring, and product assessment. Molecular methods such as flow cytometry and fluorescence in situ hybridization can be used to assess viability in products, as recently shown for the quality assessment of commercial probiotic capsules and non-dairy drinks. Flow cytometry also enables subpopulations to be distinguished and physically sorted for further characterization; therefore, this technique can be particularlyuseful for studying stress adaptation mechanisms of subpopulations.
Currently, one important limitation for establishing optimal conditions for probiotic production is the absence of profile targets with respect to optimum cell physiology leading to high functionality of probiotics in the gut. In a recent study (unpublished work cited by de Vries et al.), DNA microarrays were used to monitor the gene expression ofLactobacillus plantarumin surgically removed intestinal segments. The specific expression of genes encoding sugar uptake and metabolism, amino acid biosynthesis, cell division and stress-related genes was observed, indicating survival, metabolic acitivity and growth of probiotics in the gut. This approach could be a powerful and high-throughput tool not only for providing insight into in vivo host–microbe interactions, but also for developing physiological profile targets for probiotic production. More generally, the ‘omics’ technologies — transcriptomics, proteomics and metabolomics —could be used to assess and compare the physiological profiles of probiotics in the gut, at different stages of production, and following their addition to food. One possible aim for process development and optimization could be to obtain cells during and after production that have similar profiles to cells in the gut, in addition to high cell yield and viability.
Flow cytometry and PCR methods might provide rapid and efficient tools for the characterization of cell physiology during and after production. After the identification of biomarkers for cell functionality by ‘omics’ methods, new fluorescent stains for these biomarkers could be developed and applied for process monitoring and product quality control. For example flow cytometry can quantify specific intracellular proteins and measure membrane integrity. Recently, automated flow cytometry has been developed and used to monitor continuous fermentations at the single-cell level.

Kết quả (Việt) 1:

vi khuẩn sublethally bị thương hoặc không hoạt động thường không thể được phát hiện. Ngoài ra, văn hóa dựa trên phân tích của khả năng không phải là một yếu tố dự báo đầy đủ cho chức năng probiotic, nên điểm đánh dấu cuối cùng cho phát triển công nghệ, như được hiển thị gần đây của Ma¨tto ¨ et al... Vì vậy, trong lĩnh vực chế phẩm sinh học, phương pháp bổ sung nên được sử dụng để nghiên cứu tế bào sinh lý học để nghiên cứu cơ bản, quá trình phát triển và theo dõi và đánh giá sản phẩm. Các phương pháp phân tử như chảy cytometry và sự phát huỳnh quang trong situ lai ghép có thể được sử dụng để đánh giá khả năng trong sản phẩm, như gần đây chỉ ra cho việc đánh giá chất lượng của thương mại probiotic viên nang và thức uống sữa. Dòng chảy cytometry cũng cho phép các quần thể được phân biệt và cơ thể được sắp xếp cho thêm đặc tính; do đó, kỹ thuật này có thể là particularlyuseful để nghiên cứu cơ chế thích ứng căng thẳng của quần thể.Hiện nay, một trong những hạn chế quan trọng để thiết lập các điều kiện tối ưu cho sản xuất probiotic là sự vắng mặt của hồ sơ mục tiêu đối với di động tối ưu sinh lý và dẫn đến các chức năng cao của probiotics trong ruột. Trong một nghiên cứu gần đây (chưa được công bố công việc trích dẫn bởi de Vries et al.), DNA microarrays được sử dụng để giám sát các gen biểu hiện ofLactobacillus plantarumin phẫu thuật loại bỏ ruột phân đoạn. Biểu hiện cụ thể của gen mã hóa phân chia tế bào hấp thụ và chuyển hóa, sinh tổng hợp acid amin, đường và gen liên quan đến căng thẳng được quan sát thấy, sự sống còn, trao đổi chất acitivity và tăng trưởng của các chế phẩm sinh học trong ruột. Cách tiếp cận này có thể là một công cụ mạnh mẽ và thông lượng cao, không chỉ cho việc cung cấp cái nhìn sâu sắc vào máy chủ lưu trữ tại vivo-vi khuẩn tương tác, mà còn để phát triển các mục tiêu sinh lý hồ sơ probiotic sản xuất. Nói chung, các công nghệ 'omics'-transcriptomics, proteomic và metabolomics-có thể được sử dụng để đánh giá và so sánh các hồ sơ sinh lý của probiotics trong ruột, ở các giai đoạn khác nhau của sản xuất, và sau của họ bổ sung cho thực phẩm. Một trong những mục tiêu có thể cho quá trình phát triển và tối ưu hóa có thể để có được các tế bào trong và sau khi sản xuất có tương tự như hồ sơ cho các tế bào trong ruột, ngoài tế bào cao năng suất và khả năng.Lưu thông cytometry và phương pháp PCR có thể cung cấp nhanh chóng và hiệu quả công cụ cho các đặc tính của tế bào sinh lý học trong và sau khi sản xuất. Sau khi nhận dạng của biomarkers cho di động chức năng bằng phương pháp 'omics', vết bẩn huỳnh quang mới cho những biomarkers có thể được phát triển và áp dụng cho quá trình giám sát và sản phẩm quản lý chất lượng. Ví dụ, dòng chảy cytometry có thể định lượng protein nội bào cụ thể và đo lường màng toàn vẹn. Gần đây, dòng chảy tự động cytometry đã được phát triển và được sử dụng để giám sát liên tục fermentations ở mức độ đơn bào.

Kết quả (Việt) 2:

sublethally thương hoặc vi khuẩn không hoạt động thường không thể phát hiện. Ngoài ra, phân tích dựa trên nuôi khả năng sống không phải là một yếu tố dự báo đầy đủ cho các chức năng probiotic, mà nên là điểm đánh dấu cuối cùng cho sự phát triển công nghệ, như gần đây thể hiện bởi Matto ¨ et al .. Vì vậy, trong lĩnh vực probiotics, phương pháp bổ sung nên được sử dụng để nghiên cứu sinh lý học tế bào cho nghiên cứu cơ bản, quá trình phát triển và giám sát, và đánh giá sản phẩm. Phương pháp phân tử như dòng cytometry và huỳnh quang tại chỗ lai có thể được sử dụng để đánh giá khả năng tồn tại trong các sản phẩm, như gần đây thể hiện cho việc đánh giá chất lượng của viên nang probiotic thương mại và đồ uống không sữa. Đo dòng tế bào cũng cho phép nhóm quần thể được phân biệt và thể chất được sắp xếp cho đặc hơn nữa; Do đó, kỹ thuật này có thể được particularlyuseful để nghiên cứu cơ chế thích ứng căng thẳng của quần xã.
Hiện nay, một trong những hạn chế quan trọng cho việc thiết lập các điều kiện tối ưu cho sản xuất probiotic là sự vắng mặt của các chỉ tiêu hồ sơ liên quan đến sinh lý tế bào tối ưu hàng đầu cho chức năng cao của probiotics trong ruột với. Trong một nghiên cứu gần đây (các tác phẩm chưa được trích dẫn bởi de Vries et al.), Hóa DNA đã được sử dụng để theo dõi các biểu hiện gen ofLactobacillus plantarumin đoạn ruột phẫu thuật cắt bỏ. Các biểu hiện cụ thể của gen mã hóa sự hấp thu đường và sự trao đổi chất, axit amin tổng hợp, phân chia tế bào và gen liên quan đến stress đã được quan sát, cho thấy sự tồn tại, acitivity trao đổi chất và tăng trưởng của vi khuẩn probiotic trong ruột. Cách tiếp cận này có thể là một công cụ mạnh mẽ và thông lượng cao không chỉ để cung cấp cái nhìn sâu sắc vào trong cơ thể tương tác vật chủ vi khuẩn, mà còn để phát triển các mục tiêu sinh lý hồ sơ cá nhân để sản xuất probiotic. Tổng quát hơn, công nghệ của omics '- transcriptomics, proteomics và metabolomics -could được sử dụng để đánh giá và so sánh các cấu sinh lý của chế phẩm sinh học trong ruột, ở các giai đoạn khác nhau của sản xuất, và sau họ bổ sung vào thực phẩm. Một mục tiêu tốt cho quá trình phát triển và tối ưu hóa có thể được để có được các tế bào trong và sau khi sản xuất mà có cấu hình tương tự như tế bào trong ruột, ngoài năng suất di động cao và khả năng tồn tại.
Dòng chảy cytometry và phương pháp PCR có thể cung cấp công cụ nhanh chóng và hiệu quả cho các đặc tính sinh lý học tế bào trong và sau khi sản xuất. Sau khi xác định các chỉ dấu sinh học cho các chức năng tế bào bằng phương pháp 'omics', vết huỳnh quang mới cho các chỉ dấu sinh học có thể được phát triển và áp dụng cho quá trình giám sát và kiểm soát chất lượng sản phẩm. Ví dụ đo dòng tế bào có thể định lượng protein trong tế bào cụ thể và đo toàn vẹn của màng. Gần đây, đếm tế bào dòng chảy tự động đã được phát triển và được sử dụng để giám sát quá trình lên men liên tục ở cấp độ tế bào đơn.