An increase in CO2 tends to increas

An increase in CO2 tends to increase Hþ and HCO3 – in reaction (3), consequently increasing medium acidity. In compensation, the increase in HCO3 – causes NaHCO3 formation through reaction (4), until an equilibrium is reached at pH 7.4. In summary, a medium pH decrease due to a CO2 increase in the gas phase is neutralized by the action of sodium bicarbonate, with the pH stabilizing at 7.4. Traditionally, culture media are buffered with sodium bicarbonate at a final concentration of 24 mM. When cells are growing at low densities or are in a lag phase, they do not produce CO2 in sufficient quantities to maintain the pH at an optimal value. Decreasing the CO2 content in the gaseous phase results in an increase in the culture equilibrium pH. Therefore, the control of CO2 concentration allows appropriate maintenance of culture pH (Kilburn, 1991). This type of buffering is of low cost, non-toxic, and also provides other chemical benefits for the cells. Each basal medium has its own bicarbonate 24 Animal Cell Technology concentration and CO2 tension recommended to attain the correct pH and osmolality values. Table 2.2 indicates the recommended NaHCO3 and CO2 concentrations for a set of commonly employed basal media. The gas phase in contact with cell culture in an incubator is usually adjusted to 5–10% of CO2 in volume (90–95% air). In some situations, the utilization of a system with a higher buffering capacity is needed. In this case, organic buffers can be employed, and in this category, the most widely used is Hepes (N-2-hydroxyethylpiperazine-N9-2-ethanesulfonic acid). Buffering with Hepes is most effective at the 7.2–7.6 pH range, and this compound is more resistant to rapid alterations in culture conditions. When using Hepes, a controlled gaseous atmosphere for mammalian cell growth is not required. Some media are efficiently buffered by Hepes and bicarbonate mixtures. Nevertheless, Hepes is relatively expensive, and is toxic for cells in concentrations above 100 mM. For insect cells, culture medium is buffered with sodium phosphate, and the use of CO2 or pH indicators is not required

Kết quả (Việt) 1:

Sự gia tăng trong CO2 có xu hướng tăng Hþ và HCO3-trong phản ứng (3), do đó tăng độ chua vừa. Trong bồi thường, sự gia tăng trong HCO3-nguyên nhân NaHCO3 hình thành thông qua phản ứng (4), cho đến khi đạt đến một trạng thái cân bằng ở pH 7.4. Tóm lại, giảm độ pH trung bình do sự gia tăng khí CO 2 trong giai đoạn khí vô hiệu hóa do các hành động của sodium bicarbonate, với độ pH ổn định tại 7.4. Theo truyền thống, văn hóa phương tiện truyền thông được đệm với natri bicacbonat tại nồng độ cuối cùng của 24 mM. Khi tế bào phát triển tại mật độ thấp hoặc đang trong một giai đoạn tụt hậu, họ không tạo ra CO2 với số lượng đủ để duy trì độ pH tại một giá trị tối ưu. Giảm CO2 nội dung trong các kết quả khí giai đoạn trong sự gia tăng trong văn hóa cân bằng độ pH. Vì vậy, sự kiểm soát của nồng độ CO 2 cho phép bảo dưỡng thích hợp của văn hóa độ pH (Kilburn, 1991). Loại đệm là chi phí thấp, không độc hại, và cũng có thể cung cấp lợi ích hóa học khác cho các tế bào. Mỗi phương tiện cơ sở có bicacbonat 24 động vật di động công nghệ tập trung và căng thẳng CO2 được khuyến khích để đạt được chính xác độ pH và giá trị osmolality. 2.2 bảng chỉ ra các nồng độ NaHCO3 và CO2 được đề nghị cho một tập hợp các phương tiện truyền thông cơ sở thường được sử dụng. Giai đoạn khí liên lạc với di động văn hóa trong một vườn ươm thường được điều chỉnh cho 5-10% của CO2 trong khối lượng (90-95% máy). Trong một số trường hợp, việc sử dụng của một hệ thống với công suất đệm cao là cần thiết. Trong trường hợp này, các bộ đệm hữu cơ có thể được sử dụng, và trong thể loại này, được sử dụng rộng rãi nhất là Hepes (N-2-hydroxyethylpiperazine-N9-2-ethanesulfonic acid). Đệm với Hepes là hiệu quả nhất tại dãy 7.2-7.6 pH, và hợp chất này là khả năng chống để thay đổi nhanh chóng trong điều kiện văn hóa. Khi sử dụng Hepes, một bầu không khí khí kiểm soát cho tăng trưởng tế bào động vật có vú là không cần thiết. Một số phương tiện truyền thông hiệu quả được đệm bằng Hepes và bicacbonat hỗn hợp. Tuy nhiên, Hepes là tương đối đắt tiền, và là độc hại cho tế bào ở nồng độ trên 100 mM. Côn trùng tế bào, văn hóa Trung bình đệm với natri phosphat, và việc sử dụng các chỉ số CO2 hoặc pH là không cần thiết

Kết quả (Việt) 2:

Sự gia tăng CO2 có xu hướng tăng HTH và HCO3 - trong phản ứng (3), do đó tăng độ chua vừa. Bồi thường, sự gia tăng HCO3 - gây NaHCO3 hình thành thông qua phản ứng (4), cho đến một trạng thái cân bằng đạt được ở mức pH 7.4. Tóm lại, giảm độ pH trung bình do sự gia tăng CO2 trong pha khí được trung hoà bởi các hành động của natri bicarbonate, với độ pH ổn định ở mức 7.4. Theo truyền thống, môi trường nuôi cấy được đệm với sodium bicarbonate ở nồng độ cuối cùng của 24 mM. Khi các tế bào đang phát triển với mật độ thấp hoặc đang trong giai đoạn trễ, họ không sản xuất CO2 đủ số lượng để duy trì độ pH tại một giá trị tối ưu. Giảm hàm lượng CO2 trong kết quả pha khí làm tăng độ pH cân bằng văn hóa. Do đó, việc kiểm soát nồng độ CO2 cho phép bảo dưỡng thích hợp của pH văn hóa (Kilburn, 1991). Đây là loại đệm là chi phí thấp, không độc hại, và cũng cung cấp các lợi ích khác cho các hóa tế bào. Mỗi phương tiện cơ bản có nồng độ bicarbonate Công nghệ 24 động vật di động và CO2 căng thẳng của nó được đề nghị để đạt được độ pH và độ thẩm thấu các giá trị chính xác. Bảng 2.2 chỉ ra NaHCO3 và CO2 nồng độ khuyến cáo cho một tập hợp các phương tiện truyền thông thường được sử dụng cơ bản. Các pha khí tiếp xúc với nền văn hóa tế bào trong lồng thường được điều chỉnh từ 5-10% CO2 về khối lượng (90-95% không khí). Trong một số trường hợp, việc sử dụng một hệ thống với một khả năng đệm cao hơn là cần thiết. Trong trường hợp này, bộ đệm hữu cơ có thể được sử dụng, và trong thể loại này, được sử dụng rộng rãi nhất là Hepes (acid N-2-hydroxyethylpiperazine-N9-2-ethanesulfonic). Buffering với Hepes là hiệu quả nhất trong phạm vi pH 7,2-7,6, và hợp chất này là khả năng chống biến đổi nhanh chóng trong điều kiện nuôi cấy. Khi sử dụng Hepes, một bầu không khí khí kiểm soát tăng trưởng tế bào động vật có vú cho là không cần thiết. Một số phương tiện truyền thông hiệu quả được đệm bởi Hepes và hỗn hợp bicarbonat. Tuy nhiên, Hepes là tương đối đắt, và là độc hại cho các tế bào ở nồng độ cao hơn 100 mM. Đối với các tế bào của côn trùng, môi trường nuôi cấy được đệm với sodium phosphate, và việc sử dụng các chỉ số CO2 hoặc pH là không cần thiết