PRIMARY METABOLISM AND PRECURSOR SU

PRIMARY METABOLISM AND PRECURSOR SUPPLY
The taxane core is derived via the plastidial 2-C-methyl-D-erythritol phosphate (MEP) pathway (Eisenreich et al.,
1996), in which isopentenyl diphosphate (IPP) and
dimethylallyl diphosphate (DMAPP), the universal
precursors of all terpenes, are built from pyruvate and
glyceraldehyde-3-phosphate through the intermediate 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate (DXP). This process has
been reviewed (Rohmer, 1999; Eisenreich et al., 2001;
Kutzuyama and Seto, 2003). A T. cuspidata plant cell
culture cDNA library yielded expressed sequence tags
(ESTs) encoding each of the seven enzymes involved in
the plastidial pathway (Jennewein et al., 2004b). Like all diterpenoids, taxanes are based on geranyl-geranyl diphosphate, which is derived from one molecule
of DMAPP and three molecules of IPP via head to tail
condensation. Taxus geranylgeranyl diphosphate syn-thase (GGPPS) was first isolated by the Croteau group
from T. canadensis cells and later by the Verpoorte group
from T. baccata cells (Hefner et al., 1998; Laskaris et al.,
2000), and the protein was characterized as a typical
prenyltransferase. The cDNA clone isolated by Croteau’s
group encoded a 32-kDa protein that assembled into a
functional ~60-kDa homodimer. As expected, the amino
acid sequence included a plastidial transit peptide. To
examine the influence of GGPPS on the taxoid pathway,
time course transcription profiling was carried out and
showed that presumably neither constitutive nor induced
GGPPS is rate limiting for taxol synthesis (Hefner et al.,
1998). In the T. cuspidata cDNA library (Schoendorf et
al., 2001), ESTs representing GGPPS were quite abundant, representing 1.7% of the clones (Jennewein et
al., 2004b).

Kết quả (Việt) 2:

Chuyển hóa chính và tiền thân CUNG
Lõi taxane có nguồn gốc thông qua plastidial phosphate 2-C-methyl-D-erythritol (MEP) đường (Eisenreich et al,.
1996), trong đó isopentenyl diphosphate (IPP) và
dimethylallyl diphosphate (DMAPP), phổ quát
tiền thân của tất cả các tecpen, được xây dựng từ pyruvate và
glyceraldehyde-3-phosphate qua trung gian 1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate (DXP). Quá trình này đã
được xem xét (Rohmer, 1999;. Eisenreich et al, 2001;
Kutzuyama và Seto, 2003). Một nhà máy T. cuspidata di động
văn hóa thư viện cDNA mang lại thể hiện trình tự các thẻ
(ESTs) mã hóa mỗi một trong bảy enzym tham gia vào
con đường plastidial (Jennewein et al., 2004b). Giống như tất cả diterpenoids, taxanes được dựa trên geranyl-geranyl diphosphate, trong đó có nguồn gốc từ một phân tử
của DMAPP và ba phân tử của IPP qua đầu đến đuôi
ngưng tụ. Taxus geranylgeranyl diphosphate syn-thase (GGPPS) lần đầu tiên được phân lập bởi nhóm Croteau
từ các tế bào T. canadensis và sau đó là nhóm Verpoorte
từ các tế bào T. baccata (Hefner et al, 1998;. Laskaris et al,.
2000), và các protein được mô tả như là một điển hình
prenyltransferase. Clone cDNA cô lập bởi Croteau của
nhóm mã hóa một protein 32 kDa đó lắp ráp thành một
chức năng ~ 60-kDa homodimer. Theo dự kiến, các amin
chuỗi acid bao gồm một peptide quá cảnh plastidial. Để
kiểm tra ảnh hưởng của GGPPS trên đường taxoid,
thời gian khóa học sao chép hồ sơ được thực hiện và
cho thấy có lẽ không phải cấu cũng không gây ra
GGPPS là tỷ lệ hạn chế để tổng hợp taxol (Hefner et al,.
1998). Trong T. cuspidata cDNA thư viện (Schoendorf et
al., 2001), đại diện cho ESTs GGPPS khá dồi dào, chiếm 1,7% của các dòng vô tính (Jennewein et
al., 2004b).