4.1. siRNAThe siRNA-based method ha

4.1. siRNA
The siRNA-based method has been used to show functional RNAi in axons and to clarify an approach to spatially regulate mRNA transcripts at a subcellular level in neurons [190]. The method has also been adopted to confirm that the RNAi machinery may exist in peripheral nerve axons and function independently from the neuronal cell body or Schwann cells [191]. In order to elucidate the cytoskeletal remodeling process within injured axons after peripheral nerve injury, siRNA-induced RNAi of a NudE-like protein (Ndel1, viewed as an integrator of the cytoskeleton) was performed in transected axons, and the results showed that local silencing of Ndel1 by siRNA dramatically reduced axonal regeneration in vivo [192]. In order to identify intracellular inhibition of neuronal growth signals and look for intrinsic regeneration pathways within axons, it was found that either pharmacological inhibition of PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10) or its mRNA knockdown using siRNA could induce a robust increase in the plasticity of neurite outgrowth in vitro and in vivo [193]. Downregulation of Sprouty2 by siRNAs was found to promote elongative axon growth by activation of the Ras/Raf/ERK pathway [194]. In addition, it has been reported that knockdown of erythropoietinproducing hepatocellular receptor A4 (EphA4) protein by 2 independent siRNAs increases Schwann cell migration and peripheral nerve regeneration [195], and that knockdown of nectin-like 4 (Necl-4) by short hairpin RNA inhibits Schwann cell differentiation and subsequent myelination in cocultures [196].
4.2. miRNAs
miRNAs are a class of w22 nucleotide non-coding RNA molecules that negatively regulate the expression of a wide variety of genes, mainly through direct interaction with the 30-untranslated regions (30-UTR) of their target mRNAs [197]. It is estimated that miRNAs regulate up to 60% of the total human genes at the posttranscriptional level [198]. This fact highlights the pivotal role of miRNAs in a diverse array of physiological and pathological processes. The importance of miRNAs for neural development and degeneration has been delineated [199,200], and their involvement in peripheral nerve injury and regeneration is now been actively studied [201,202].
A recent study [199] showed that the deletion of Dicer (a key molecule in biogenesis of miRNA) disrupted the production of Dicer-dependent miRNAs, impeded peripheral nerve regeneration according to behavioral, functional, and histological examination in vivo, and inhibited axonal growth from neurons in vitro, thus confirming the significance of Dicer-dependent miRNA pathway for successful repair of peripheral nerve injury. The same authors indicated in another study that not only was miRNAs-triggered RNAi observed in transfected peripheral nerves, but RISC, as a RNAi effector complex, was identified in transected axons treated by miRNAs, suggesting a miRNA machinery in response to peripheral nerve lesion [203]. Some newly published studies have investigated the influences of miRNAs on neurite outgrowth from adult dorsal root ganglia (DRGs) neurons following sciatic nerve transection injury [204e207]. These showed that miRNAs could regulate neurite growth from adult DRG neurons in distinct ways: miRNA-21 promoted neurite outgrowth by directly downregulating Sprouty2 (SPRY2) expression [204]; miRNA-222 targeting PTEN promoted neurite outgrowth [206]; while miRNA-145 inhibited neurite outgrowth by inhibiting Robo2 expression [205]. In order to determine the necessity of Dicer and miRNAs for nerve myelination, recent studies showed that the ablation of Dicer1/miRNA from Schwann cells led to glial overproliferation and aberrant myelination, although the specific molecular approaches for gene silencing varied among different studies [208e211].
Based on the importance of Schwann cells for peripheral nerve regeneration, more recently, the miRNA-mediated regulation of Schwann cells’ responses to peripheral nerve injury has been investigated: miR-34a interacted with positive regulators (Notch1 and cyclin D1) of dedifferentiation and proliferation to control cell cycle dynamics in Schwann cells, while miR-140 targeted the transcription factor Egr2, a master regulator of myelination, and modulated myelination in DRG/Schwann cell co-cultures. In addition, miR-140 was reported to target the transcription factor Egr2, a master regulator of myelination, for modulating myelination in DRG/Schwann cell co-cultures [212]; miR-182 inhibited proliferation and migration of Schwann cells by targeting fibroblast growth factor 9 (FGF9) and neurotrimin (NTM) at an early stage following sciatic nerve injury [213]; miR-221 and miR-222 promoted proliferation and migration of Schwann cells by targeting longevity assurance homolog 2 (LASS2) after sciatic nerve injury [214]. Fig. 2 illustrates how the aforementioned siRNAs/miRNAs affect peripheral nerve injury and regeneration.
In terms of their compos

Kết quả (Việt) 1:

4.1. siRNASiRNA dựa trên phương pháp đã được sử dụng để hiển thị các chức năng RNAi trong sợi trục thần kinh và để làm rõ một cách tiếp cận để điều chỉnh trong không gian mRNA bảng điểm ở một mức độ của trong tế bào thần kinh [190]. Phương pháp này cũng đã được áp dụng để xác nhận rằng máy móc RNAi có thể tồn tại trong dây thần kinh ngoại vi sợi trục thần kinh và chức năng một cách độc lập từ thân tế bào thần kinh hoặc các tế bào Schwann [191]. Để làm sáng tỏ quá trình tu sửa cytoskeletal trong vòng sợi trục thần kinh bị thương sau chấn thương thần kinh ngoại vi, gây ra siRNA RNAi NudE như protein (Ndel1, được xem như là một tích hợp tóp) được thực hiện vào sợi trục thần kinh transected, và kết quả cho thấy rằng im lặng địa phương của Ndel1 bằng siRNA giảm đáng kể axonal tái sinh tại vivo [192]. Để xác định các tế bào ức chế sự phát triển thần kinh tín hiệu và tìm kiếm con đường tái sinh nội tại trong vòng sợi trục thần kinh, nó đã được tìm thấy rằng sự ức chế dược PT (phosphatase và tensin homolog đã bị xóa trên nhiễm sắc thể 10) hoặc knockdown mRNA của nó bằng cách sử dụng siRNA có thể gây ra một sự gia tăng mạnh mẽ trong dẻo sự cao hơn neurite trong ống nghiệm và tại vivo [193]. Downregulation Sprouty2 của siRNAs đã được tìm thấy để thúc đẩy tăng trưởng elongative axon bởi kích hoạt của Raf-Ras-ERK đường [194]. Ngoài ra, nó đã báo cáo rằng knockdown erythropoietinproducing tế bào gan receptor A4 (EphA4) protein bằng 2 độc lập siRNAs tăng tế bào Schwann di cư và tái tạo dây thần kinh ngoại vi [195], và rằng knockdown giống như nectin 4 (Necl-4) bởi ngắn hairpin RNA ức chế sự khác biệt tế bào Schwann và sau đó myelination trong cocultures [196].4.2. miRNAsmiRNAs là một lớp các w22 nucleotide không mã hóa RNA phân tử tiêu cực điều hoà sự biểu hiện của một loạt các gen, chủ yếu là thông qua tương tác trực tiếp với các khu vực phải 30 (30-Maldegem) của mục tiêu của họ mRNAs [197]. Chúng tôi ước tính rằng miRNAs điều chỉnh lên đến 60% tổng số gen của con người ở mức độ posttranscriptional [198]. Thực tế này làm nổi bật vai trò then chốt của miRNAs trong một mảng đa dạng của các quá trình sinh lý và bệnh lý. Tầm quan trọng của miRNAs thần kinh phát triển và thoái hóa đã là khoanh [199,200], và sự tham gia của họ trong chấn thương thần kinh ngoại biên và tái sinh bây giờ được nghiên cứu tích cực [201,202].Một nghiên cứu gần đây [199] cho thấy rằng việc xóa Dicer (một phân tử quan trọng trong biogenesis Tam) gián đoạn sản xuất phụ thuộc vào Dicer miRNAs, cản trở các thần kinh ngoại vi tái sinh theo hành vi, chức năng và mô học thi tại vivo và inhibited axonal phát triển từ tế bào thần kinh trong ống nghiệm, do đó xác nhận tầm quan trọng của con đường Tam Dicer-phụ thuộc vào các sửa chữa thành công của chấn thương thần kinh ngoại vi. Các tác giả cùng chỉ ra trong nghiên cứu khác không chỉ được kích hoạt miRNAs RNAi quan sát trong transfected các dây thần kinh ngoại vi, nhưng RISC, như một effector RNAi phức tạp, đã được xác định trong transected các sợi trục thần kinh điều trị bằng miRNAs, cho thấy một máy móc Tam để đáp ứng với tổn thương dây thần kinh ngoại vi [203]. Một số nghiên cứu vừa được công bố đã nghiên cứu sự ảnh hưởng của miRNAs neurite sự cao hơn từ gốc vây lưng lớn hạch (DRG) tế bào thần kinh sau tổn thương dây thần kinh sciatic transection [204e207]. Đây cho thấy rằng miRNAs có thể điều chỉnh neurite tăng trưởng từ DRG dành cho người lớn tế bào thần kinh trong cách riêng biệt: Tam-21 phát huy neurite sự cao hơn bằng cách trực tiếp downregulating Sprouty2 (SPRY2) biểu thức [204]; Tam-222 PT nhắm mục tiêu quảng cáo neurite sự cao hơn [206]; trong khi Tam-145 inhibited neurite sự cao hơn bằng cách ức chế Robo2 biểu hiện [205]. Để xác định sự cần thiết của Dicer và miRNAs cho các dây thần kinh myelination, nghiên cứu gần đây cho thấy, ablation Dicer1/Tam từ tế bào Schwann dẫn đến glial overproliferation và myelination cũng quá khác thường, mặc dù các phương pháp phân tử cụ thể cho các gen im lặng khác nhau giữa các nghiên cứu khác nhau [208e211].Dựa trên tầm quan trọng của các tế bào Schwann cho dây thần kinh ngoại vi tái sinh, gần đây, quy định Tam qua trung gian tế bào Schwann phản ứng với chấn thương thần kinh ngoại vi đã được nghiên cứu: miR-34a tương tác với cơ quan quản lý tích cực (Notch1 và cyclin D1) của dedifferentiation và sự gia tăng kiểm soát chu kỳ tế bào năng động trong các tế bào Schwann, trong khi miR-140 nhắm mục tiêu các yếu tố phiên mã Egr2, một điều chỉnh tổng thể của myelination, và myelination đồ trong nền văn hóa đồng bào DRG/Schwann. Ngoài ra, miR-140 đã được báo cáo để nhắm mục tiêu các yếu tố phiên mã Egr2, một điều chỉnh tổng thể của myelination, cho điều chỉnh myelination ở DRG/Schwann văn hóa đồng bào [212]; miR-182 ức chế sự gia tăng và cuộc di cư của các tế bào Schwann bằng cách nhắm mục tiêu các nhân tố tăng trưởng nguyên bào sợi 9 (FGF9) và neurotrimin (NTM) giai đoạn đầu sau chấn thương thần kinh sciatic [213]; miR-221 và miR-222 thăng gia tăng và cuộc di cư của các tế bào Schwann của nhắm mục tiêu đảm bảo tuổi thọ homolog 2 (LASS2) sau khi tổn thương dây thần kinh hông [214]. Hình 2 mô tả cách nói trên siRNAs/miRNAs ảnh hưởng đến chấn thương thần kinh ngoại biên và tái sinh.Trong điều kiện của compos

Kết quả (Việt) 2:

4.1. siRNA
Phương pháp siRNA trên đã được sử dụng để hiển thị chức năng can thiệp RNA trong sợi trục thần kinh và làm sáng tỏ một cách tiếp cận không gian điều chỉnh bảng điểm mRNA ở mức dưới tế bào trong tế bào thần kinh [190]. Phương pháp này cũng được sử dụng để xác nhận rằng chế can thiệp RNA có thể tồn tại trong sợi trục thần kinh ngoại vi và hoạt động độc lập của cơ quan tế bào thần kinh hoặc tế bào Schwann [191]. Để làm sáng tỏ quá trình tái cytoskeletal trong sợi trục thần kinh bị thương sau khi chấn thương dây thần kinh ngoại biên, siRNA gây ra can thiệp RNA của một protein Nude giống như (Ndel1, được xem như là một tích hợp của khung tế bào) được thực hiện trong sợi trục transected, và kết quả cho thấy rằng sự im lặng địa phương của Ndel1 bởi siRNA giảm đáng kể tái sinh sợi trục in vivo [192]. Để xác định sự ức chế tế bào của tín hiệu tăng trưởng tế bào thần kinh và tìm kiếm con đường tái sinh bên trong sợi trục thần kinh, nó đã được tìm thấy rằng hoặc ức chế dược lý của PTEN (phosphatase và tensin homolog xóa trên nhiễm sắc thể 10) hoặc mRNA của nó dập bằng siRNA có thể gây ra một sự gia tăng mạnh mẽ trong sự dẻo của các kết quả tự nhiên neurite in vitro và in vivo [193]. Ức chế tuyến yên của Sprouty2 bởi siRNAs đã được tìm thấy để thúc đẩy tăng trưởng sợi trục elongative bởi hoạt hóa của đường Ras / Raf / ERK [194]. Ngoài ra, nó đã được báo cáo rằng rời của erythropoietinproducing thụ thể tế bào gan A4 (EphA4) protein bằng 2 siRNAs độc lập làm tăng di cư tế bào Schwann và tái tạo dây thần kinh ngoại biên [195], và rời của nectin giống như 4 (Necl-4) bằng cách kẹp tóc ngắn RNA ức chế sự phân chia tế bào Schwann và myelin hóa tiếp theo trong cocultures [196].
4.2. miRNA
miRNA là một lớp học của các phân tử RNA w22 nucleotide không mã hóa mà điều chỉnh tiêu cực đến sự biểu hiện của một loạt các gen, chủ yếu là thông qua sự tương tác trực tiếp với các khu vực chưa được dịch 30 (30-UTR) của mRNA mục tiêu của họ [197]. Người ta ước tính rằng miRNA điều chỉnh lên đến 60% trong tổng số gen con người ở cấp phiên mã bổ nhiệm [198]. Thực tế này nhấn mạnh vai trò quan trọng của miRNA trong một mảng đa dạng của các quá trình sinh lý và bệnh lý. Tầm quan trọng của miRNA cho phát triển thần kinh và thoái hóa đã được khoanh [199.200], và sự tham gia của họ trong chấn thương thần kinh ngoại vi và tái tạo hiện nay đã tích cực nghiên cứu [201.202].
Một nghiên cứu gần đây [199] cho thấy rằng việc xóa Dicer (một phân tử quan trọng trong phát sinh học của miRNA) gián đoạn việc sản xuất các miRNA Dicer phụ thuộc, cản trở sự tái tạo ngoại thần kinh theo kiểm tra hành vi, chức năng, và mô trong cơ thể, và tăng trưởng sợi trục ức chế từ tế bào thần kinh trong ống nghiệm, do đó xác nhận tầm quan trọng của Dicer phụ thuộc miRNA đường cho sửa chữa thành công chấn thương thần kinh ngoại vi. Các tác giả cũng chỉ ra trong một nghiên cứu rằng không những miRNA-kích hoạt RNAi quan sát thấy trong các dây thần kinh ngoại vi transfected, nhưng RISC, như một effector phức tạp RNAi, đã được xác định trong sợi trục transected điều trị bởi miRNA, cho thấy một máy miRNA để đáp ứng với tổn thương dây thần kinh ngoại biên [ 203]. Một số nghiên cứu mới được công bố đã nghiên cứu ảnh hưởng của miRNA trên kết quả tự nhiên neurite từ người lớn hạch rễ lưng (DRG) tế bào thần kinh sau chấn thương dây thần kinh hông cắt ngang [204e207]. Cho thấy người miRNA có thể điều chỉnh tốc độ tăng trưởng neurite từ tế bào thần kinh DRG người lớn trong cách riêng biệt: miRNA-21 phát huy neurite quả tự nhiên bằng cách trực tiếp downregulating Sprouty2 (SPRY2) biểu hiện [204]; miRNA-222 nhắm mục tiêu thúc đẩy phát triển tự nhiên PTEN neurite [206]; trong khi miRNA-145 ức chế neurite quả tự nhiên bằng cách ức chế Robo2 biểu hiện [205]. Để xác định sự cần thiết của Dicer và miRNA cho myelin hóa thần kinh, các nghiên cứu gần đây cho thấy rằng cắt bỏ của Dicer1 / miRNA từ các tế bào Schwann dẫn đến overproliferation thần kinh đệm và myelin hóa khác thường, mặc dù các phương pháp phân tử cụ thể cho gene im lặng khác nhau giữa các nghiên cứu khác nhau [208e211] .
Căn cứ vào tầm quan trọng của tế bào Schwann nuôi tái sinh thần kinh ngoại vi, gần đây hơn, các quy định miRNA qua trung gian của phản ứng tế bào Schwann 'chấn thương thần kinh ngoại vi đã được điều tra: miR-34a tương tác với các nhà quản dương (Notch1 và cyclin D1) của dedifferentiation và phổ biến để điều khiển động chu kỳ tế bào trong các tế bào Schwann, trong khi miR-140 nhắm vào các yếu tố phiên mã Egr2, một bộ điều chỉnh tổng thể của myelin, và myelin điều chế trong DRG / Schwann tế bào đồng văn hóa. Ngoài ra, miR-140 đã được báo cáo để nhắm mục tiêu các yếu tố phiên mã Egr2, một bộ điều chỉnh tổng thể của myelin, cho điều chỉnh myelin trong DRG / Schwann tế bào đồng văn hóa [212]; miR-182 tăng sinh ức chế và di chuyển của tế bào Schwann bởi mục tiêu tăng trưởng nguyên bào sợi tố 9 (FGF9) và neurotrimin (NTM) ở giai đoạn sớm sau chấn thương dây thần kinh hông [213]; miR-221 và miR-222 đẩy mạnh sự phát triển và di chuyển của tế bào Schwann bởi mục tiêu đảm bảo tuổi thọ homolog 2 (LASS2) sau chấn thương dây thần kinh hông [214]. Sung. 2 mô tả các siRNAs nói trên / miRNA ảnh hưởng đến chấn thương dây thần kinh ngoại vi và tái sinh.
Trong điều kiện của họ compos