Hai phương pháp nhuộm được sử dụng để tiết lộ quá trình deglycosylation hóa trên kháng nguyên TES. nhuộm bạc được dựa trên các phương pháp mô tả bởi Nielsen & Brown (1984) (40). Tóm lại, gel đã được cố định ở 10% axit tricloaxetic cho 60 phút ở 4 ° C. Ba rửa hơn nữa với 10% ethanol và 5% axit axetic đã được thực hiện cho mỗi 10 phút, và sau đó gel được đắm mình trong một giải pháp oxy hóa (0? 1% kali dicromat, axit nitric 0? 2%) trong 5 phút. Sau hai rửa nước cất trong 5 phút, gel được đắm mình trong 0? 2% nitrate bạc trong 30 phút trong bóng tối. Các gel sau đó rửa lại bằng nước khử ion trong 1 phút và nhanh chóng chìm đắm trong một giải pháp giảm (7? 4% natri cacbonat, 0? 037% formaldehyde) trong 1 phút. Ba thay đổi bổ sung cho 30 giây mỗi giảm giải pháp đã được thực hiện cho đến khi sự phát triển của các ban nhạc màu nâu sẫm. Phản ứng được dừng lại bằng cách rửa hai lần với 5% axit axetic và sau đó chụp ảnh. Tất cả các bước được thực hiện dưới khuấy liên tục và ở nhiệt độ phòng.
đang được dịch, vui lòng đợi..
