Column Development, Fraction Collec

Column Development, Fraction Collection, and Analysis of Fractions
The stopper in the top of the column must be airtight. Adjust the screw clamp so that the flow rate of the column is about 5 to 10 mL/hr. Collect
1- mL fractions in test tubes in a fraction collector. Transfer the contents of every other fraction to a quartz cuVttte and measure the absorbance at 280 nm or use a UV monitor if available. For a blank, use Tris buffer. Record the A2S0 values in your notebook. When you begin to detect protein eluting from the column (A2S0 > 0), measure the A2SQ of every fraction. On a single sheet of graph paper, plot A2m vs. fraction number. Continue collecting fractions until no more protein is eluted (about 30 fractions). Save all frac¬tions that have A2S0 over 0.2.
When you are finished with the Sephadex column, pour the gel into a container labeled “used Sephadex G-50.” The gel may be recycled and used later.

Kết quả (Việt) 1:

Phát triển cột, phần thu thập và phân tích của phân sốCác stopper ở đầu cột phải kín. Điều chỉnh kẹp vít để tốc độ dòng chảy của cột là khoảng 5-10 mL/hr. thu thập1-mL các phân số trong ống nghiệm trong một nhà sưu tập phần nhỏ. Chuyển nội dung của mỗi phần nhỏ khác để cuVttte thạch anh và đo lường hấp thu tại 280 nm hoặc sử dụng một UV giám sát nếu có sẵn. Đối với một trống, sử dụng bộ đệm Tris. Ghi lại các giá trị A2S0 trong máy tính xách tay của bạn. Khi bạn bắt đầu để phát hiện protein eluting từ cột (A2S0 > 0), đo A2SQ của mỗi phần. Trên một tờ giấy vẽ sơ đồ, lô A2m vs phần số. Tiếp tục thu thập các phần phân đoạn cho đến khi không có protein hơn là eluted (khoảng 30 phần phân đoạn). Lưu tất cả frac¬tions có A2S0 hơn 0,2.Khi bạn đã kết thúc với các cột Sephadex, đổ gel vào một thùng có nhãn "được sử dụng Sephadex G-50." Các gel có thể được tái chế và sử dụng sau này.

Kết quả (Việt) 2:

Phát triển cột, Fraction Collection, và phân tích của các phân số
Các stopper ở phía trên cùng của cột phải kín. Điều chỉnh kẹp vít do vậy tốc độ dòng chảy của các cột là khoảng 5-10 ml / hr. Thu thập
các phần phân đoạn 1- mL trong ống nghiệm ở một nhà sưu tập phần. Chuyển nội dung của tất cả các phần khác để một cuVttte thạch anh và đo độ hấp thụ ở 280 nm hoặc sử dụng một màn hình UV nếu có. Đối với một trống, sử dụng đệm Tris. Ghi các giá trị trong máy tính xách tay của bạn A2S0. Khi bạn bắt đầu để phát hiện protein tẩy rửa từ cột (A2S0> 0), đo A2SQ của mỗi phần. Trên một tờ giấy vẽ, âm mưu A2M so với số thập phân. Tiếp tục thu thập các phần phân đoạn cho đến khi không có nhiều protein được tách rửa (khoảng 30 phân). Lưu tất cả frac¬tions có A2S0 qua 0.2.
Khi bạn đã kết thúc với các cột Sephadex, đổ gel vào một thùng đựng có nhãn "dùng Sephadex G-50." Các gel có thể được tái chế và sử dụng sau này.