Identifying the individual proteins

Identifying the individual proteins after separation
The second stage of protein profiling is to identify the individual proteins that have
been separated from the starting mixture. This used to be a difficult proposition but
peptide mass fingerprinting has provided a rapid and accurate identification procedure.
Peptide mass fingerprinting was made possible by advances in mass spectrometry.
Mass spectrometry was originally designed as a means of identifying a compound from
the mass-to-charge ratios of the ionized forms that are produced when molecules of the
compound are exposed to a high-energy field. The standard technique could not be
used with proteins because they are too large to be ionized effectively, but matrixassisted
laser desorption ionization time-of-flight (MALDI-TOF), gets around this problem,
at least with peptides of up to 50 amino acids in length. Of course, most proteins
are much longer than 50 amino acids, and it is therefore necessary to break them into
fragments before examining them by MALDI-TOF. The usual approach is to digest
the protein with a sequence-specific protease, such as trypsin, which cleaves proteins
immediately after arginine or lysine residues. With most proteins, this results in a series
of peptides 5–75 amino acids in length.

Kết quả (Việt) 1:

Xác định protein cá nhân sau khi ly thânGiai đoạn thứ hai của protein profiling là xác định các protein cá nhân mà cóđược tách ra khỏi hỗn hợp bắt đầu. Điều này sử dụng để là một mệnh đề khó khăn nhưngpeptide mass fingerprinting đã cung cấp một thủ tục xác định nhanh chóng và chính xác.Peptide fingerprinting khối lượng được thực hiện bởi những tiến bộ trong mass spectrometry.MASS spectrometry ban đầu được thiết kế như một phương tiện xác định các hợp chất từtỷ lệ khối lượng phụ trách của các ion hóa các hình thức đó được tạo ra khi các phân tử của cáchợp chất được tiếp xúc với một lĩnh vực năng lượng cao. Tiêu chuẩn kỹ thuật có thể khôngđược sử dụng với protein vì họ là quá lớn để được ion hóa một cách hiệu quả, nhưng matrixassistedlaser desorption ion hóa thời gian của chuyến bay (MALDI-TOF), được xung quanh vấn đề này,ít với peptide lên đến 50 các axit amin trong chiều dài. Tất nhiên, hầu hết proteincó nhiều thời gian hơn 50 các axit amin, và do đó cần thiết để phá vỡ chúngmảnh vỡ trước khi xem xét họ bởi MALDI TOF. Các phương pháp thông thường là tiêu hóaprotein với protease trình tự cụ thể, chẳng hạn như trypsin, cleaves proteinngay sau khi dư lượng arginine hoặc lysine. Với hầu hết các protein, kết quả là một loạt cácpeptide 5-75 axit amin trong chiều dài.

Kết quả (Việt) 2:

Xác định các protein riêng lẻ sau khi ly thân
Giai đoạn thứ hai của profiling protein là xác định các protein riêng lẻ đã
được tách ra từ hỗn hợp bắt đầu. Đây từng là một đề xuất khó khăn nhưng
khối lượng peptide vân tay đã được cung cấp một thủ tục xác định nhanh chóng và chính xác.
Peptide fingerprinting khối lượng đã được thực hiện bởi những tiến bộ trong khối phổ.
Khối phổ đầu được thiết kế như một phương tiện để xác định một hợp chất từ
khối-to- tính tỷ lệ của các hình thức ion hóa được sản xuất khi các phân tử của
hợp chất được tiếp xúc với một lĩnh vực năng lượng cao. Các tiêu chuẩn kỹ thuật không thể được
sử dụng với protein vì chúng quá lớn để được ion hóa có hiệu quả, nhưng matrixassisted
giải hấp bằng laser ion hóa thời gian của chuyến bay (MALDI-TOF), được xung quanh vấn đề này,
ít nhất là với các peptide lên tới 50 axit amin chiều dài. Tất nhiên, hầu hết các protein
được lâu hơn nhiều so với 50 axit amin, và do đó nó là cần thiết để phá vỡ chúng thành
những mảnh trước khi xem xét bởi MALDI-TOF. Cách tiếp cận thông thường là để tiêu hóa
protein bằng protease trình tự cụ thể, chẳng hạn như trypsin, phân cắt protein
ngay sau khi arginine hay lysine dư lượng. Với hầu hết các protein, điều này dẫn đến một loạt
các peptide 5-75 axit amin trong chiều dài.