2.1. Vi sinh vật và môi trường nuôi cấy
chủng vi sử dụng cho sản xuất vitamin B12 là P. freudenreichii
IFO 12.424, mà là một, không bào tử gram dương
hình thành, que hình dạng, và vi khuẩn kỵ khí aerotolerant
và sản xuất vitamin B12 trong tế bào. Các trung
thành phần như sau: Polypepton (Nippon Seiyaku
Co., Tokyo, Nhật Bản), 12,5 g / l; casamino axit (Difco Laboratories,
MI, USA), 11,0 g / l; chiết xuất nấm men (Nippon Seiyaku
Co., Tokyo, Nhật Bản), 2,5 g / l; NaH2PO4 · 2H2O, 2,25 g / l;
MgCl2 · 6H2O, 0,4 g / l; K3PO4, 1,76 g / l; CoCl2 · 6H2O,
0,018 g / l; FeSO4 · 7H2O, 0,01 g / l; Ca-pantothenate, 4 mg / l;
(+) biotin, 0,3 mg / l; glucose, 40 g / l. Đối với sản xuất của vitamin
B12 trong bình lên men, 1 g / l của Tween 80 (Difco
Laboratories, MI, USA), 0,05 g / l của CoCl2 · 6H2O, và
0,07 g / l 5,6-dimethybenzimidazole đã được thêm vào các
phương tiện cơ bản.
Đối với văn hóa hỗn hợp, R. eutropha H16 (ATCC17699) đã được
cũng được sử dụng: trong hoạt động preculture, vi khuẩn được nuôi cấy trong
môi trường giàu nitơ có chứa 10 g / l men chiết xuất,
10 g / l polypepton, 5 g / l chiết xuất thịt và 5 g / l ammonium
sulfate. Các vi khuẩn đã được thu hoạch bằng cách ly tâm và
rửa sạch để loại bỏ nitơ còn lại [24]. Đối với các
hệ thống pha trộn văn hóa, các thành phần tương tự đã được sử dụng như đối với
trồng Propionibacterium.
đang được dịch, vui lòng đợi..
