Monolisa™ HBs Ag ULTRA1 plate - 96

Monolisa™ HBs Ag ULTRA

1 plate - 96 tests 72346 5 plates - 480 tests 72348

KIT FOR THE DETECTION OF THE SURFACE ANTIGEN OF THE HEPATITIS B IN HUMAN SERUM OR PLASMA BY THE ENZYME IMMUNOASSAY TECHNIQUE













IVD For In Vitro Diagnostic Use

Manufacturer Quality Control

All manufactured and commercialised reagents are under complete quality system starting from reception of raw material to the final commercialisation of the product.
Each lot is submitted to a quality control and only is released on the market when conforming to the acceptance criteria.
The records relating to production and control of each single lot are kept within our company.




CONTENTS


1 - INTENDED USE

2 - CLINICAL VALUE

3 - PRINCIPLE OF THE MonolisaÔ HBs Ag ULTRA

4 - CONTENTS OF THE MonolisaÔ HBs Ag ULTRA

5 - PRECAUTIONS

6 - HEALTH AND SAFETY INSTRUCTION

7 - MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED

8 - PREPARATION OF REAGENTS

9 - STORAGE CONDITIONS - SHELF LIFE

10 - COLLECTION AND HANDLING OF SPECIMENS

11 - ASSAY PROCEDURE

12 - SYSTEM ADAPTATIONS

13 - CALCULATION AND INTERPRETATION OF THE RESULTS

14 - SPECTROPHOTOMETRIC VERIFICATION OF SAMPLE AND CONJUGATE PIPETING

15 - PERFORMANCES

16 - LIMITS OF THE TEST

17 - REFERENCES











4

1 - INTENDED USE

MonolisaÔ HBs Ag ULTRA assay is a one step enzyme immunoassay technique of the "sandwich" type for the detection of the surface antigen of the Hepatitis B virus (HBs Ag) in the human serum or plasma.

2 - CLINICAL VALUE

The detection of HBs Ag in the serum indicates an infection caused by the hepatitis B virus. It is the first marker to appear and may be observed 2 or 3 weeks before the clinical and biological symptoms of the disease. Its period of presence may be very short (a few days) or very long (several years). HBs Ag persisting beyond 6 months in the serum denotes "chronic hepatitis".
Because of the existence of numerous asymptomatic chronic carriers, hepatitis B represents an important transfusion hazard and the prevention of the transmission is based upon the detection of the HBs Ag at the time of each blood donation.

3 - PRINCIPLE OF THE Monolisa™ HBs Ag ULTRA

MonolisaÔ HBs Ag ULTRA assay is a one step enzyme immunoassay based on the principle of the "sandwich" type using monoclonal antibodies and polyclonal anibodies selected for their ability to bind themselves to the various subtypes of HBs Ag now recognized by the WHO and the most part of variant HBV strains.
The MonolisaÔ HBs Ag ULTRA solid phase is coated with monoclonal antibodies.

The MonolisaÔ HBs Ag ULTRA conjugates are based upon the use of monoclonal antibodies from mouse and polyclonal antibody from goat against the HBs Ag.These antibodies are bound to the peroxidase.
The assay procedure includes the following reaction steps :

1. Distribution of control sera and samples into the wells of the microplate.

This distribution can be visually controlled : there is a clear difference of colouration between empty well and well with sample.This distribution can also be controlled automaticaly by reading at 490/620-700 nm (optional).
2. Distribution of the red coloured conjugate into the wells .

This distribution can also be visually controlled : After the conjugate solution addition, the colour of the well becomes red. It is possible to control automaticaly this distribution by spectrophotometric reading at 490/620-700 nm (optional). The sample deposition can also be controlled at this step of the manipulation by automatic reading at 490/620-700 nm.
3. After incubation at 37°C during one hour and half the unbound conjugate is removed by washing. 4. Distribution of coloured Substrate solution.
This distribution can be visually controlled : there is a clear difference of colouration between empty well and well with the pink substrate solution.This distribution can also be controlled automaticaly by reading at 490 nm (optional).
5. After 30 minutes incubation in presence of the substrate in dark and at room temperature (18-30°C), the presence of the complexed conjugate is shown by a change of colour.
6. Distribution of stopping solution.

This distribution can be visually controlled : The substrate solution wich initialy pink becomes uncoloured for the non reactive sample wells and turn blue to yellow for the positive sample wells.
7. Reading of the optical densities at 450/620-700 nm and interpretation of the results.














5

4 - CONTENTS OF THE Monolisa™ HBs Ag ULTRA All reagents are exclusively for in vitro diagnostic use.

LABEL
NATURE OF THE REAGENTS
PRESENTATION

72346
72348


R1

MICROPLATE : 12 strips of 8 wells each, coated with monoclonal anti-HBs antibodies (mouse)

1 plate

5 plates


R2

CONCENTRATED WASHING SOLUTION (20X) Tris NaCl buffer pH 7.4
Preservative : ProClinTM 300 (0.04%)

1 vial 70 ml

1 vial 235 ml


R3

NEGATIVE CONTROL

Tris HCl buffer containing BSA Preservative : ProClinTM 300 (0.1 %)

2 vials 2 x 2.5 ml

2 vials 2 x 2.5 ml


R4

POSITIVE CONTROL (HUMAN)

Tris HCl buffer containing BSA with addition of mixture of purified HBs Ag from ad and ay subtypes Preservative : ProClinTM 300 (0.1 %)

1 vial 2.5 ml

1 vial 2.5 ml


R6

CONJUGATE DILUENT

Tris HCl buffer pH 7.4 containing BSA, TweenÒ 20, bovine immunoglobulins and mouse immunoglobulins with sample addition control reagent
Preservatives : ProClinTM 300 (0,1%), Ciprofloxacine (10 mg /ml)

1 vial 8 ml

2 vials 2 x 18 ml


R7

CONJUGATE

Mouse Monoclonal anti-HBs antibodies and Goat polyclonal anti-HBs antibodies bound to the peroxidase. Lyophilized.

1 vial sqf 8 ml

2 vials sqf 2 x 18 ml


R8

SUBSTRATE BUFFER
Citric acid and Sodium acetate solution pH 4.0 containing H2O2 (0.015%) and DMSO (4%)

1 vial 60 ml

2 vials 2 x 60 ml


R9

CHROMOGEN PINK COLOURED

Solution containing tetramethyl benzidine (TMB)

1 vial 5 ml

2 vials 2 x 5 ml


R10

STOPPING SOLUTION 1N sulphuric acid solution

1 vial 28 ml

3 vials 3 x 28 ml



5 - PRECAUTIONS

The reliability of the results depends on correct implementation of the following Good Laboratory Practices : • The name of the test, as well as a specific identification number for the test, are written on the frame of
each microtiterplate. This specific identification number is stated on each strip too. Monolisa® HBs Ag ULTRA : Specific ID number = 51
Verify the specific identification number before any use. If the identification number is missing, or different from the stated number corresponding to the assay to be tested, the strip should not be used.
• Do not use expired reagents.

• Do not mix reagents from different lots within a given test run.

REMARK : For washing solution (R2, label identification : 20X coloured green), peroxidase substrate buffer (R8, label identification : TMB buf, coloured blue), chromogen (R9, label identification : TMB 11X, coloured purple) and stopping solution (R10, label identification : 1N coloured red), it is possible to use other lots than those contained in the kit, provided the same lot is used within a given test run. These reagents can be used with some other products of our company. In addition, the wash solution (R2, label identification : 20X coloured green) can be mixed with the 2 other wash solutions included in various Bio-Rad Reagent kits (R2, label identifications : 10X coloured blue or 10X coloured orange) when properly reconstituted, provided only one mixture is used within a given test run.
Contact our technical service for detailed information.



6

• Before use, it is necessary to wait 30 minutes for the reagents to stabilise to room temperature and one hour for diluted wash buffer R2.
• Carefully reconstitute the reagents avoiding any contamination.

• Do not carry out the test in the presence of reactive vapours (acid, alkaline, aldehyde vapours) or dust that could alter the enzyme activity of the conjugates.
• Use glassware thoroughly washed and rinsed with deionized water or preferably, disposable material.

• Do not allow the microplate to dry between the end of the washing operation and the reagent distribution. • The enzyme reaction is very sensitive to metal ions. Consequently, do not allow any metal element to
come into contact with the various conjugate or substrate solutions.

• The development solution (substrate buffer + chromogen) must be coloured pink. The modification of this pink colour within a few minutes after reconstitution indicates that the reagent cannot be used and must be replaced. Preparation of the development solution can be made in a clean disposable single use plastic tray or glass container that has first been pre-washed with 1N HCl and rinsed thoroughly with distilled water and dried. This reagent must be stored in the dark.
• Use a new distribution tip for each sample.

• Well washing is a critical step in this procedure: respect the recommended number of washing cycles and make sure that all wells are completely filled and then completely emptied. Incorrect washing may lead to inaccurate results.
• Never use the same container to distribute conjugate and development solution. • Check the pipettes and other equipment for accuracy and correct operation.
• Do not change the assay procedure.

6 - HEALTH AND SAFETY INSTRUCTIONS

All the reagents included in the kit are intended for "in vitro diagnostic use".

• Wear disposable gloves when handling reagents and samples and thoroughly wash your hands after handling them.
• Do not pipette by mouth.

• The positive control R4 contains purified HBs Ag from subtypes ad and ay prepared with negative human plasma for anti-HCV, anti-HIV1 and anti-HIV2 antibodies and inactivated by warming.
• Because no known test method can offer complete assurance that infectious agents are absent, handle reagents and patient samples as if capable of transmitting infectious disease.
• Any equipment directly in contact with specimens and reagents as well as the washing solutions should b

Kết quả (Việt) 1:

Monolisa ™ HBs Ag ULTRA

1 tấm - 96 bài kiểm tra 72346 5 tấm - 480 xét nghiệm 72348

KIT cho THE phát hiện THE bề mặt kháng nguyên của THE viêm gan siêu vi B IN con người huyết thanh hoặc PLASMA bởi các ENZYME IMMUNOASSAY kỹ thuật


IVD nhất trong Vitro chẩn đoán sử dụng

nhà sản xuất chất lượng điều khiển

Tất cả các chất phản ứng sản xuất và thương mại hóa đang đầy đủ chất lượng hệ thống bắt đầu từ quầy lễ tân của nguyên liệu để thương mại hóa cuối cùng của sản phẩm.
mỗi lô được gửi đến một kiểm soát chất lượng và chỉ được phát hành trên thị trường khi phù hợp với tiêu chí chấp nhận.
các hồ sơ liên quan đến sản xuất và kiểm soát của mỗi lô duy nhất được giữ kín trong công ty của chúng tôi.



nội dung


1 - mục đích sử dụng

2 - giá trị lâm sàng

3 - nguyên tắc của MonolisaÔ HBs Ag ULTRA

4 - nội dung của MonolisaÔ HBs Ag ULTRA

biện pháp phòng ngừa 5 -

6 - sức khỏe và an toàn hướng dẫn

7 - tài liệu yêu cầu nhưng không được cung cấp

8 - chuẩn bị thuốc thử

9 - điều kiện lưu trữ - hạn sử dụng

10 - bộ sưu tập và xử lý của mẫu vật

11 - thủ tục khảo nghiệm

12 - hệ thống chuyển thể

13 - TÍNH TOÁN VÀ GIẢI THÍCH CÁC KẾT QUẢ

14 - SPECTROPHOTOMETRIC XÁC MINH CỦA MẪU VÀ LIÊN HỢP PIPETING

15 - BIỂU DIỄN

16 - GIỚI HẠN CỦA THỬ NGHIỆM

17 - THAM KHẢO


4

1 - SỬ DỤNG DỰ ĐỊNH

MonolisaÔ HBs Ag ULTRA khảo nghiệm là một bước một enzym immunoassay kỹ thuật của loại "bánh sandwich", để phát hiện các kháng nguyên bề mặt viêm gan B virus (HBs Ag) trong huyết thanh của con người hoặc plasma.

2 - giá trị lâm sàng

phát hiện của HBs Ag trong huyết thanh chỉ ra một bệnh nhiễm trùng gây ra do vi rút viêm gan siêu vi B. Đô thị này có điểm đánh dấu đầu tiên xuất hiện và có thể được quan sát thấy 2 hoặc 3 tuần trước khi các triệu chứng lâm sàng và sinh học của bệnh. Nó có thời gian của sự hiện diện có thể rất ngắn (một vài ngày) hoặc rất dài (nhiều năm). HBs Ag sự bền bỉ vượt quá 6 tháng trong huyết thanh biểu thị "viêm gan mãn tính".
vì sự tồn tại của nhiều tàu sân bay không có triệu chứng mãn tính, viêm gan siêu vi B đại diện cho một nguy cơ quan trọng truyền và công tác phòng chống việc truyền dựa trên những phát hiện của HBs Ag vào thời điểm của mỗi tài trợ máu.

3 - nguyên tắc của THE Monolisa ™ HBs Ag ULTRA

MonolisaÔ HBs Ag ULTRA khảo nghiệm là một bước một enzym immunoassay dựa trên nguyên tắc "bánh sandwich" loại sử dụng monoclonal kháng thể và polyclonal anibodies chọn cho khả năng của mình để ràng buộc bản thân để phân nhóm khác nhau của HBs Ag bây giờ được công nhận bởi WHO và hầu hết các phần của biến thể HBV chủng.
The MonolisaÔ HBs Ag siêu rắn pha phủ monoclonal kháng thể.

Conjugates MonolisaÔ HBs Ag ULTRA được dựa trên việc sử dụng của monoclonal kháng thể từ chuột và các kháng thể polyclonal từ dê chống lại các kháng thể HBs Ag.These chắc chắn sẽ peroxidase.
thủ tục khảo nghiệm bao gồm các bước phản ứng sau:

1. Phân phối của kiểm soát huyết thanh và mẫu vào các giếng của microplate.

phân phối này có thể được điều khiển trực quan: đó là một sự khác biệt rõ ràng của tràm giữa trống tốt và tốt với mẫu.Phân phối này cũng có thể kiểm soát automaticaly bởi đọc tại 490/620-700 nm (tùy chọn).
2. Phân phối của các màu đỏ màu liên hợp vào các giếng.

phân phối này có thể cũng được điều khiển trực quan: sau khi bổ sung liên hợp giải pháp, các màu sắc cũng sẽ trở thành màu đỏ. Ta có thể kiểm soát automaticaly phân phối này bằng cách đọc spectrophotometric tại 490/620-700 nm (tùy chọn). Sự lắng đọng mẫu cũng có thể được kiểm soát ở bước này của các thao tác của tự động đọc tại 490/620-700 nm.
3. Sau khi ủ bệnh lúc 37° C trong một giờ và một nửa các liên hợp toạc được lấy ra bằng cách rửa. 4. phân phối màu bề mặt giải pháp.
Phân phối này có thể được điều khiển trực quan: đó là một sự khác biệt rõ ràng của tràm giữa cũng có sản phẩm nào và cũng với các giải pháp chất nền màu hồng.Phân phối này cũng có thể kiểm soát automaticaly bởi đọc tại 490 nm (tùy chọn).
5. Sau 30 phút ấp trong sự hiện diện của chất nền trong bóng tối và ở nhiệt độ phòng (18-30° C), sự hiện diện của liên hợp loại được thể hiện bằng một sự thay đổi của màu sắc.
6. Phân phối của dừng giải pháp.

phân phối này có thể được điều khiển trực quan: mà initialy giải pháp chất nền màu hồng trở thành uncoloured cho phòng không phản ứng mẫu wells và lần lượt xanh sang màu vàng cho tích cực mẫu wells.
7. Đọc sách của mật độ quang học tại 450/620-700 nm và giải thích các kết quả.




5

4 - nội dung của THE Monolisa ™ HBs Ag ULTRA tất cả thuốc thử dành riêng cho sử dụng chẩn đoán trong ống nghiệm.

nhãn
bản chất của thuốc thử
trình bày

72346
72348


R1

MICROPLATE: 12 dải 8 giếng mỗi, phủ một lớp chống-HBs monoclonal kháng thể (chuột)

1 tấm

5 tấm


R2

tập trung rửa giải pháp (20 X) Tris NaCl đệm pH 11.9
chất bảo quản: ProClinTM 300 (0.04%)

1 vial 70 ml

1 vial 235 ml


R3

tiêu cực điều khiển

Tris HCl đệm chứa BSA chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,1%)

2 lọ 2 x 2.5 ml

2 lọ 2 x 2.5 ml


R4

tích cực kiểm soát (con người)

Tris HCl đệm có chứa BSA với bổ sung các hỗn hợp của tinh khiết HBs Ag từ phân nhóm quảng cáo và ay chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,1%)

1 vial 2.5 ml

1 vial 2.5 ml


R6

liên hợp DILUENT

Tris HCl bộ đệm pH 7.4 có BSA, TweenÒ 20, bò globulin miễn dịch và globulin miễn dịch chuột với bổ sung mẫu kiểm soát tinh khiết
chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,1%), Ciprofloxacine (10 mg/ml)

1 vial 8 ml

2 lọ 2 x 18 ml


R7

liên hợp

chuột Monoclonal kháng thể anti-HBs và dê polyclonal anti-HBs kháng thể bị ràng buộc để peroxidase. Sản.

1 lọ sqf 8 ml

2 lọ sqf 2 x 18 ml


R8

bề mặt bộ đệm
axít Citric và natri axetat giải pháp pH 4.0 có H2O2 (0.015%) và DMSO (4%)

1 vial 60 ml

2 lọ 2 x 60 ml


R9

màu hồng CHROMOGEN

giải pháp có chứa tetramethyl benzidine (TMB)

1 vial 5 ml

2 lọ 2 x 5 ml


R10

dừng giải pháp 1N giải pháp axít sunfuric

1 vial 28 ml

3 lọ 3 x 28 ml


biện pháp phòng ngừa 5 -

Độ tin cậy của các kết quả phụ thuộc vào việc thực hiện chính xác của các thực hành tốt phòng thí nghiệm sau: • tên của thử nghiệm, một số nhận dạng cụ thể cho thử nghiệm, được viết vào khung của
mỗi microtiterplate. Này số cụ thể nhận dạng được nêu trên mỗi dải quá. Monolisa ® HBs Ag siêu: Số cụ thể ID = 51
Xác minh số nhận dạng cụ thể trước khi sử dụng bất kỳ. Nếu số nhận dạng là mất tích, hoặc khác tuyên bố số tương ứng với các khảo nghiệm để được kiểm tra, dải không nên được sử dụng.
• không sử dụng hết hạn chất thử.

• không pha trộn thuốc thử từ khác nhau rất nhiều trong một thử nghiệm nhất định chạy.

ghi chú: để rửa giải pháp (R2, nhãn nhận dạng: 20 X màu xanh), peroxidase bề mặt bộ đệm (R8, nhãn nhận dạng: TMB buf, màu xanh), chromogen (R9, nhãn nhận dạng: TMB 11 X, màu tím) và dừng lại giải pháp (R10, nhãn nhận dạng: 1N màu đỏ), nó có thể sử dụng khác rất nhiều so với những người có trong bộ, cung cấp rất nhiều tương tự được sử dụng trong vòng một chạy thử nghiệm nhất định. Các chất phản ứng có thể được sử dụng với một số sản phẩm khác của công ty chúng tôi. Ngoài ra, các giải pháp rửa (R2, nhãn nhận dạng: 20 X màu xanh) có thể được trộn lẫn với 2 rửa các giải pháp khác bao gồm trong các Bio-Rad hoá bộ dụng cụ (R2, giấy tờ chứng nhãn: 10 X màu xanh hoặc 10 X màu da cam) khi đúng được tái lập, cung cấp chỉ có một hỗn hợp được sử dụng trong một thử nghiệm nhất định chạy.
Liên hệ với chúng tôi dịch vụ kỹ thuật cho thông tin chi tiết.


6

• trước khi sử dụng, nó là cần thiết để chờ đợi 30 phút cho chất ổn định nhiệt độ phòng và một giờ cho pha loãng rửa đệm R2.
• cẩn thận reconstitute thử tránh bất kỳ ô nhiễm.

• không thực hiện các bài kiểm tra sự hiện diện của phản ứng hơi (axit, kiềm, Anđêhít chỉ) hoặc bụi mà có thể làm thay đổi hoạt động của enzyme của conjugates.
• thủy tinh sử dụng triệt để rửa sạch và rửa bằng nước deionized hoặc tốt hơn, dùng một lần tài liệu.

• không cho phép microplate để khô giữa kết thúc hoạt động rửa và phân phối thuốc thử. • Phản ứng enzym là rất nhạy cảm với các ion kim loại. Do đó, không cho phép bất kỳ yếu tố kim loại để
tiếp xúc với các khác nhau liên hợp hoặc bề mặt giải pháp.

• giải pháp phát triển (bề mặt bộ đệm chromogen) phải được màu hồng. Sửa đổi này màu hồng trong vòng vài phút sau khi reconstitution cho thấy chất thử không thể được sử dụng và phải được thay thế. Chuẩn bị các giải pháp phát triển có thể được thực hiện trong một sạch dùng một lần sử dụng duy nhất khay hoặc kính container nhựa đầu tiên đã được trước khi rửa với 1N HCl và rửa kỹ lưỡng với nước cất và khô. Thuốc thử này phải được lưu trữ trong bóng tối.
• sử dụng mỗi loại mũi phân phối cho mỗi mẫu.

• rửa cũng là một bước quan trọng trong thủ tục này: tôn trọng được đề nghị số rửa chu kỳ và đảm bảo rằng tất cả wells là hoàn toàn đầy và sau đó hoàn toàn làm trống. Giặt không đúng có thể dẫn đến kết quả không chính xác.
• không bao giờ sử dụng các thùng chứa tương tự để phân phối liên hợp và phát triển giải pháp. • Kiểm tra các ống lấy và thiết bị khác cho độ chính xác và hoạt động chính xác.
• không thay đổi thủ tục khảo nghiệm.

6 - sức khỏe và an toàn hướng dẫn

tất cả các chất phản ứng kèm theo bộ được dự định để "trong ống nghiệm sử dụng chẩn đoán".

• đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các chất phản ứng và các mẫu và triệt để rửa tay sau khi xử lý chúng.
• không pipette bởi miệng.

• điều khiển tích cực R4 chứa tinh khiết HBs Ag từ phân nhóm quảng cáo và ay chuẩn bị với plasma của con người tiêu cực cho chống-HCV, kháng thể Anti-HIV1 và chống-HIV2 và gan bởi sự nóng lên.
• bởi vì không có phương pháp được biết đến thử nghiệm có thể cung cấp đầy đủ đảm bảo rằng các đại lý truyền nhiễm đang vắng mặt, xử lý chất phản ứng và bệnh nhân mẫu như nếu có khả năng truyền bệnh truyền nhiễm.
• bất kỳ thiết bị trực tiếp tiếp xúc với mẫu vật và thuốc thử cũng như các giải pháp Giặt nên b

Kết quả (Việt) 2:

Monolisa ™ HBs Ag ULTRA 1 tấm - 96 kiểm tra 72.346 5 tấm - 480 kiểm tra 72.348 KIT CHO PHÁT HIỆN kháng nguyên bề mặt CỦA viêm gan B trong huyết thanh hoặc PLASMA CỦA Enzyme Immunoassay KỸ THUẬT IVD Đối với trong ống nghiệm chẩn đoán sử dụng kiểm soát chất lượng sản xuất tất cả các sản xuất và thương mại hóa chất phản ứng là theo hệ thống chất lượng hoàn chỉnh bắt đầu từ tiếp nhận nguyên liệu cho việc thương mại hóa cuối cùng của sản phẩm. Mỗi lô được gửi đến kiểm soát chất lượng và chỉ được phát hành trên thị trường khi phù hợp với tiêu chí chấp nhận. Các hồ sơ liên quan đến sản xuất và kiểm soát từng lô duy nhất được lưu giữ trong công ty của chúng tôi. NỘI DUNG 1 - SỬ DỤNG THIẾT KẾ 2 - giá trị lâm sàng 3 - NGUYÊN TẮC CỦA MonolisaÔ HBs Ag ULTRA 4 - NỘI DUNG MonolisaÔ HBs Ag ULTRA 5 - THẬN TRỌNG 6 - SỨC KHỎE VÀ AN TOÀN HƯỚNG DẪN 7 - TÀI LIỆU YÊU CẦU NHƯNG KHÔNG CUNG CẤP 8 - CHUẨN BỊ SINH 9 - ĐIỀU KIỆN BẢO QUẢN - THỜI HẠN SỬ DỤNG 10 - THU VÀ XỬ LÝ MẪU 11 - Định lượng THỦ TỤC 12 - Hệ thống thích nghi 13 - TÍNH VÀ GIẢI THÍCH KẾT QUẢ 14 - QUANG XÁC MINH VÀ MẪU Liên Hợp PIPETING 15 - BIỂU 16 - GIỚI HẠN CỦA KIỂM TRA 17 - THAM KHẢO 4 1 - THIẾT KẾ SỬ DỤNG MonolisaÔ HBs Ag khảo nghiệm ULTRA là một trong những bước kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch enzyme của "bánh sandwich" loại để phát hiện các kháng nguyên bề mặt của virus viêm gan B (HBs Ag) trong huyết thanh hoặc huyết tương. 2 - GIÁ TRỊ LÂM SÀNG Việc phát hiện HBs Ag trong huyết thanh chỉ ra một nhiễm trùng gây ra bởi virus viêm gan B. Đây là dấu hiệu đầu tiên xuất hiện và có thể được quan sát thấy 2 hoặc 3 tuần trước khi các triệu chứng lâm sàng và sinh học của bệnh. Giai đoạn của sự hiện diện có thể rất ngắn (vài ngày) hoặc rất dài (vài năm). HBs Ag sự bền bỉ vượt quá 6 tháng trong huyết thanh biểu thị "viêm gan mạn tính". Bởi vì sự tồn tại của nhiều hãng hàng không có triệu chứng mãn tính, viêm gan B thể hiện một mối nguy hiểm truyền quan trọng và ngăn ngừa việc truyền dữ liệu dựa trên các phát hiện của HBs Ag vào thời điểm đó của từng hiến máu. 3 - NGUYÊN TẮC CỦA Monolisa ™ HBs Ag ULTRA MonolisaÔ HBs Ag khảo nghiệm ULTRA là một trong những bước xét nghiệm miễn dịch enzyme dựa trên nguyên tắc "sandwich" loại sử dụng kháng thể đơn dòng và đa dòng anibodies chọn cho khả năng của họ để ràng buộc bản thân để các phân nhóm khác nhau của HBs Ag giờ được công nhận bởi WHO và hầu hết các phần của các chủng biến đổi HBV. Các MonolisaÔ HBs Ag pha rắn ULTRA được phủ kháng thể đơn dòng. Các MonolisaÔ HBs Ag hợp chất ULTRA được dựa trên việc sử dụng các kháng thể đơn dòng từ chuột và kháng thể đa giá từ dê chống lại các kháng thể HBs Ag.These được ràng buộc với peroxidase. Thủ tục xét nghiệm bao gồm các bước phản ứng sau: 1. . Phân phối kiểm soát huyết thanh và mẫu vào các giếng của microplate phân phối này có thể được kiểm soát trực quan: có một sự khác biệt rõ ràng về cách ve giữa cũng trống rỗng và tốt với sample.This phân phối cũng có thể được kiểm soát bằng cách đọc automaticaly ở mức 490/620-700 nm (tùy chọn). 2. . Phân phối của liên hợp màu đỏ vào các giếng phân phối này cũng có thể được kiểm soát trực quan: Sau khi các giải pháp liên hợp Ngoài ra, màu sắc của cũng trở thành màu đỏ. Có thể kiểm soát automaticaly phân phối này bằng cách đọc quang phổ tại 490 / 620-700 nm (tùy chọn). Các mẫu lắng đọng cũng có thể được kiểm soát ở bước này các thao tác bằng cách đọc tự động tại 490 / 620-700 nm. 3. Sau khi ủ ở 37 ° C trong một giờ và một nửa liên hợp không ràng buộc được loại bỏ bằng cách rửa. . 4 Phân phối giải pháp Substrate màu phân phối này có thể được kiểm soát trực quan: có một sự khác biệt rõ ràng về cách ve giữa cũng trống rỗng và tốt với solution.This nền màu hồng phân phối cũng có thể được kiểm soát bằng cách đọc automaticaly tại 490 nm (tùy chọn). 5 . Sau 30 phút ủ trong sự hiện diện của các chất nền trong bóng tối và ở nhiệt độ phòng (18-30 ° C), sự hiện diện của liên hợp complexed được thể hiện bằng một sự thay đổi về màu sắc. 6. . Phân phối các giải pháp ngăn chặn phân phối này có thể được kiểm soát trực quan: Các giải pháp nền Mà khởi tạo là màu hồng trở nên không bị nhuộm màu cho các giếng mẫu phản ứng và không chuyển sang màu xanh sang màu vàng cho các giếng mẫu tích cực. 7. Đọc sách của mật độ quang tại 450 / 620-700 nm và diễn giải kết quả. 5 4 - NỘI DUNG Monolisa ™ HBs Ag ULTRA tất cả các thuốc thử được dành riêng cho sử dụng trong phòng thí nghiệm chẩn đoán. LABEL BẢN CHẤT CỦA SINH TRÌNH BÀY 72.346 72.348 R1 microplate: 12 dải 8 giếng mỗi, tráng với các kháng thể anti-HBs đơn dòng (con chuột) 1 tấm 5 tấm R2 TẬP TRUNG GIẢI PHÁP GIẶT (20X) Tris pH đệm NaCl 7.4 Chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,04%) 1 lọ 70 ml 1 lọ 235 ml R3 KIỂM SOÁT TIÊU CỰC Tris HCl đệm có chứa BSA Chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,1%) 2 lọ 2 x 2,5 ml 2 lọ 2 x 2,5 ml R4 TÍCH CỰC ĐIỀU KHIỂN (NHÂN) Tris HCl đệm có chứa BSA có bổ sung hỗn hợp của tinh khiết HBs Ag từ quảng cáo và ay phân nhóm bảo quản: ProClinTM 300 (0,1%) 1 lọ 2,5 ml 1 lọ 2,5 ml R6 Liên Hợp pha loãng Tris HCl đệm pH 7,4 chứa BSA, TweenÒ 20, globulin miễn dịch globulin miễn dịch trâu, bò và chuột điều khiển Ngoài mẫu thuốc thử Chất bảo quản: ProClinTM 300 (0,1% ), ciprofloxacine (10 mg / ml) 1 lọ 8 ml 2 lọ 2 x 18 ml R7 Liên Hợp chuột đơn dòng kháng thể anti-HBs và dê đa giá kháng thể anti-HBs ràng buộc với peroxidase. Đông khô. 1 lọ duợc 8 ml 2 lọ duợc 2 x 18 ml R8 nền BUFFER Citric axit và dung dịch natri axetat pH 4,0 chứa H2O2 (0,015%) và DMSO (4%) 1 lọ 60 ml 2 lọ 2 x 60 ml R9 nhiễm sắc PINK MÀU Giải pháp có chứa tetramethyl benziđin (TMB) 1 lọ 5 ml 2 lọ 2 x 5 ml R10 dừng GIẢI PHÁP dung dịch acid sulfuric 1N 1 lọ 28 ml 3 lọ 3 x 28 ml 5 - THẬN TRỌNG Độ tin cậy của các kết quả phụ thuộc vào việc thực hiện đúng những điều sau đây Thực hành tốt phòng thí nghiệm: • Tên của các kiểm tra, cũng như một số nhận dạng cụ thể cho các kiểm tra, được viết trên khung của mỗi microtiterplate. Số xác định cụ thể Điều này được nêu trên mỗi mảnh quá. Monolisa® HBs Ag ULTRA: cụ thể số ID = 51 Kiểm tra mã số cụ thể trước khi sử dụng. Nếu mã số là mất tích, hoặc khác với số ghi tương ứng với các xét nghiệm để được kiểm tra, các dải không nên được sử dụng. • Không sử dụng hóa chất đã hết hạn. • Không trộn lẫn thuốc thử rất nhiều từ khác nhau trong một bài kiểm tra chạy được. Ghi chú : Đối với dung dịch rửa (R2, xác định nhãn: 20X màu xanh lá cây), peroxidase chất nền đệm (R8, xác định nhãn: TMB buf, màu xanh da trời), nhiễm sắc (R9, xác định nhãn: TMB 11x, màu tím) và giải pháp ngăn chặn (R10, nhận dạng nhãn: 1N màu đỏ), có thể sử dụng rất nhiều ngoài những điều được trong các bộ, cung cấp rất nhiều tương tự được sử dụng trong một chạy thử nghiệm nhất định. Những hóa chất có thể được sử dụng với một số sản phẩm khác của công ty chúng tôi. Ngoài ra, các giải pháp rửa (R2, xác định nhãn: 20X màu xanh lá cây) có thể được trộn với 2 giải pháp rửa khác bao gồm trong nhiều Bio-Rad bộ dụng cụ thuốc thử (R2, nhận dạng nhãn: 10X màu xanh hoặc màu cam 10X) khi tái hợp , cung cấp hỗn hợp chỉ có một được sử dụng trong một thử nghiệm chạy được. Liên hệ dịch vụ kỹ thuật của chúng tôi để biết thông tin chi tiết. 6 • Trước khi sử dụng, cần phải chờ 30 phút cho thuốc thử để ổn định nhiệt độ trong phòng và một giờ để pha loãng đệm rửa R2. • Cẩn thận phục hồi các chất phản ứng tránh ô nhiễm bất kỳ. • Không thực hiện việc kiểm tra sự hiện diện của hơi phản ứng (axit, kiềm, hơi aldehyde) hay bụi có thể làm thay đổi hoạt động của enzym của các hợp chất. • Sử dụng thủy tinh rửa sạch và rửa sạch với nước cất hoặc tốt hơn, vật liệu dùng một lần. • Không cho phép các microplate khô từ khi kết thúc các hoạt động rửa và phân phối thuốc thử. • Các phản ứng enzyme rất nhạy cảm với các ion kim loại. Do đó, tôi không cho phép bất kỳ yếu tố kim loại tiếp xúc với các bề mặt liên hợp hoặc giải pháp khác nhau. • Các giải pháp phát triển (chất nền đệm + nhiễm sắc) phải có màu hồng. Việc sửa đổi của màu hồng này trong vòng vài phút sau khi pha chỉ ra rằng thuốc thử không thể được sử dụng và phải được thay thế. Chuẩn bị các giải pháp phát triển có thể được thực hiện trong một sử dụng duy nhất khay nhựa dùng một lần sạch hoặc dụng cụ thủy tinh đã lần đầu tiên được rửa sạch trước với 1N HCl và rửa kỹ bằng nước cất và sấy khô. Thuốc thử này phải được lưu trữ trong bóng tối. • Sử dụng một mẹo phân phối mới cho mỗi mẫu. • rửa cũng là một bước quan trọng trong thủ tục này: tôn trọng số được đề nghị của chu kỳ giặt và chắc chắn rằng tất cả các giếng được lấp đầy hoàn toàn và sau đó hoàn toàn trống . Rửa không đúng có thể dẫn đến kết quả không chính xác. • Không bao giờ sử dụng cùng một container để phân phối liên hợp và phát triển giải pháp. • Kiểm tra ống hút và các thiết bị khác cho chính xác và hoạt động chính xác. • Không thay đổi các thủ tục xét nghiệm. 6 - HƯỚNG DẪN AN TOÀN VÀ SỨC KHỎE Tất cả các thuốc thử bao gồm trong bộ được dành cho "trong ống nghiệm sử dụng chẩn đoán". • Mang găng tay dùng một lần khi xử lý thuốc thử và mẫu và triệt để rửa tay sau khi xử lý chúng. • Không pipette bằng miệng. • Việc kiểm soát tích cực R4 chứa tinh khiết HBs Ag từ quảng cáo và những kiểu phụ ay chuẩn bị với huyết tương người âm tính với anti-HCV, chống HIV1 và chống HIV2 kháng thể và bất hoạt bởi sự nóng lên. • Bởi vì không có phương pháp kiểm tra được biết đến có thể cung cấp sự đảm bảo đầy đủ mà tác nhân gây bệnh vắng mặt, xử lý hóa chất và mẫu bệnh phẩm như khả năng truyền bệnh truyền nhiễm. • Bất kỳ thiết bị tiếp xúc trực tiếp với bệnh phẩm và hóa chất cũng như rửa các giải pháp nên b