Excluding the freeze & thaw method,

Excluding the freeze & thaw method, in the present study a meaningful relationship was found among other three methods in which DNA extraction using Bioneer kit and to a lesser degree phenol-chlorophorm methods showed higher sensitivities. No Legionella were detected by freeze & thaw method, though 8.9, 17.7, and 26.6 percent of samples yielded Legionella contamination when Qiagen kit, classic phenol-chlorophorm and Bioneer kit methods were used, respectively. Two assumptions can be made here: a) relatively low concentrations of Legionella were present in these samples; b) the depletion of DNA amplification capacity rooted from the composition of
water samples and presence of PCR inhibitors such as calcium and magnesium ions which may interfere with DNA extraction reagents and cause inhibition. Insufficient DNA yield due to low concentrations of Legionella could have led to negative results in our study when the method of freeze & thaw was conducted. Moreover, DNA yield might be out of the range of conventional PCR assay because of the small amount of bacteria in these samples that reflected the situation under real anthropogenic environmental conditions. This also indicates that DNA purification may be more relevant and a critical step when the amount of DNA in sample is very low [20].

Kết quả (Việt) 1:

Không bao gồm phương pháp đóng băng và tan băng, trong nghiên cứu hiện nay một mối quan hệ có ý nghĩa được tìm thấy trong số ba phương pháp khác trong đó khai thác DNA bằng cách sử dụng Bioneer kit và đến một mức độ thấp hơn phenol-chlorophorm phương pháp cho thấy cao nhạy cảm. Không có Legionella đã được phát hiện bởi đóng băng và tan băng phương pháp, mặc dù 8.9, 17.7 và 26,6% mẫu mang lại ô nhiễm Legionella khi Qiagen kit, phenol-chlorophorm cổ điển và Bioneer kit phương pháp được sử dụng, tương ứng. Hai giả định có thể được thực hiện ở đây: một) các nồng độ tương đối thấp của Legionella đã có mặt trong các mẫu; b) sự suy giảm của DNA khuếch đại năng lực bắt nguồn từ từ các thành phần củaCác mẫu nước và sự hiện diện của Đảng Cộng sản Romania ức chế chẳng hạn như các ion canxi và magiê có thể can thiệp với DNA khai thác chất phản ứng và gây ức chế. Không đủ sản lượng DNA do các nồng độ thấp của Legionella có thể đã dẫn tới các kết quả tiêu cực trong nghiên cứu của chúng tôi khi các phương pháp đóng băng và tan băng được tiến hành. Hơn nữa, năng suất DNA có thể ra khỏi phạm vi của thông thường PCR khảo nghiệm vì số lượng nhỏ các vi khuẩn trong các mẫu phản ánh tình hình dưới điều kiện môi trường thực anthropogenic. Điều này cũng chỉ ra rằng ADN lọc có thể có liên quan hơn và một bước quan trọng khi số lượng DNA trong mẫu là rất thấp [20].

Kết quả (Việt) 2:

Nếu loại trừ việc đóng băng tan chảy & phương pháp, trong các nghiên cứu hiện tại một mối quan hệ có ý nghĩa đã được tìm thấy trong số ba phương pháp khác mà khai thác sử dụng DNA Bioneer kit và đến một mức độ thấp hơn phương pháp phenol-chlorophorm cho thấy sự nhạy cảm cao. Không Legionella được phát hiện bằng phương pháp đông lạnh và rã đông, mặc dù 8.9, 17.7, và 26,6 phần trăm mẫu mang lại ô nhiễm Legionella khi Qiagen kit, cổ điển phenol-chlorophorm và phương pháp kit Bioneer đã được sử dụng, tương ứng. Hai giả định có thể được thực hiện ở đây: a) Nồng độ tương đối thấp của Legionella đã có mặt trong các mẫu; b) sự suy giảm công suất khuếch đại DNA bắt nguồn từ các thành phần của
các mẫu nước và sự hiện diện của các chất ức chế PCR như calcium và magnesium ion có thể gây cản với thuốc thử chiết DNA và gây ức chế. Sản lượng DNA không đủ do nồng độ thấp của Legionella có thể dẫn đến những kết quả tiêu cực trong học của chúng tôi khi các phương pháp đóng băng và tan băng đã được tiến hành. Hơn nữa, sản lượng DNA có thể được ra khỏi phạm vi của các xét nghiệm PCR thông thường vì số lượng nhỏ các vi khuẩn trong các mẫu đó phản ánh tình hình trong điều kiện môi trường do con người thực sự. Điều này cũng cho thấy rằng thanh lọc DNA có thể phù hợp hơn và là một bước quan trọng khi số lượng DNA trong mẫu là rất thấp [20].