Quy trình chuẩn khảo nghiệm (đối với mẫu với 5-100 mg ml-1 protein)
Chuẩn bị 5-8 độ pha loãng của một protein (thường là BSA) tiêu chuẩn với một loạt các 5-100 protein mg.
Pha loãng mẫu protein chưa biết để có được protein 5-100 mg / 30 ml.
Thêm 30 ml mỗi dung dịch tiêu chuẩn hoặc mẫu protein không biết đến một ống nghiệm dán nhãn thích hợp.
Đặt hai ống trống. Đối với đường cong chuẩn, thêm 30 ml H2O thay vì các giải pháp tiêu chuẩn. Đối với các mẫu protein không rõ, thêm 30 ml đệm chuẩn bị protein thay thế. Giải pháp protein thường được khảo nghiệm trùng lặp hoặc ba lần.
Thêm 1,5 ml thuốc thử Bradford vào mỗi ống và trộn đều.
Ủ ở nhiệt độ phòng (RT) trong ít nhất 5 phút. Hấp thụ sẽ tăng theo thời gian; mẫu nên ủ ở RT không quá 1 giờ.
Đo độ hấp thụ ở 595 nm.
thủ tục Microassay
Chuẩn bị năm giải pháp tiêu chuẩn (1 ml mỗi) chứa 0, 10, 20, 30, 40 và 50 mg ml-1 BSA
Pipet 800 ml mỗi dung dịch chuẩn và mẫu (có chứa cho <50 mg ml-1 protein) vào một ống nghiệm sạch, khô. Giải pháp protein thường được khảo nghiệm trùng lặp hoặc ba lần.
Thêm 200 ml thuốc nhuộm thuốc thử tập trung vào mỗi ống và xoáy.
Thực hiện theo các thủ tục được mô tả ở trên cho các thủ tục khảo nghiệm tiêu chuẩn.
đang được dịch, vui lòng đợi..