Sample CollectionThe samples were o

Sample Collection

The samples were obtained from pulp and paper industry wastewater, sugarcane rhizosphere and bagass in Ahvaz, Iran. Soil samples were collected in sterilized plastic bags from a depth of 10–15 cm below the earth’s surface. All the samples were kept at 4 °C until used.

Isolation and Screening of Bacteria Strains

10 g of air-dried soil samples, bagass, degraded tree barks and 10 mL of wastewater were transferred to 250-mL Erlenmeyer flasks containing 100 mL of sterile saline solution (0.9 % w/v NaCl) [13]. The flasks were incubated for 120 min at 40 °C under shaking (130 rpm). Then, 1-mL aliquots were added to 9 mL sterile saline solution and serial dilutions (10−1–10−9) were prepared. About 100 μl of 10−3 and 10−5 dilutions were spread on Petri plates containing nutrient agar supplemented with 2–4 mg/mL of Amphotericin B. Individual bacterial colonies from the plates were screened on Petri plates containing nutrient agar supplemented with 0.5 mM guaiacol to detect laccase activity [14]. The plates were incubated at 25–33 °C for 96 h. The isolation and screening procedures were repeated several times until the isolates were found to be pure. The laccase-producing strains were examined for morphological, physiological and biochemical characteristics with reference to growth conditions and production of laccase. Isolated bacteria were maintained on nutrient agar medium in slants at 4 °C. Pre-culturing medium contained (w/v): nutrient broth (0.8 %), meat extract (1 %), peptone (1 %), tryptone (1 %) and NaCl (0.05 %).The cultures were incubated at 37 °C on a rotary shaker at 180 rpm. After 18 h, 5 % (v/v) of liquid culture was used to inoculate the laccase production medium containing (w/v): yeast extract (0.15 %), tryptone (0.15 %) and NaCl (0.5 %). Cultures were incubated at 37 °C on a rotary shaker at 200 rpm [12].

Kết quả (Việt) 1:

Bộ sưu tập mẫuCác mẫu được lấy từ bột giấy và xử lý nước thải công nghiệp giấy, mía rhizosphere và bagass ở Ahvaz, Iran. Mẫu đất đã được thu thập trong túi nhựa tiệt trùng từ độ sâu 10-15 cm dưới bề mặt trái đất. Tất cả các mẫu được lưu giữ tại 4 ° C cho đến khi được sử dụng.Cách ly và kiểm tra các chủng vi khuẩn10 g mẫu đất air-dried, bagass, suy thoái cây sủa và 10 mL nước thải đã được chuyển giao cho 250-mL Erlenmeyer bình chứa 100 mL của giải pháp mặn vô trùng (0,9% w/v NaCl) [13]. Các bình được ủ trong 120 phút ở 40 ° C theo lắc (130 rpm). Sau đó, 1 mL aliquots đã được thêm vào giải pháp mặn vô trùng 9 mL và nối tiếp dilutions (10−1-10−9) đã được chuẩn bị. Khoảng 100 μl 10−3 và 10−5 dilutions đã được lan truyền trên Petri tấm chứa agar dinh dưỡng bổ sung với 2-4 mg/mL Amphotericin sinh cá nhân do vi khuẩn thuộc địa từ bản kẽm đã được chiếu trên đĩa Petri chứa agar dinh dưỡng bổ sung với 0,5 mM guaiacol để phát hiện các hoạt động laccase [14]. Các tấm được ủ tại 25-33 ° C cho 96 h. Sự cô lập và kiểm tra thủ tục đã được lặp đi lặp lại nhiều lần cho đến khi các chủng đã được tìm thấy sẽ được tinh khiết. Laccase sản xuất giống đã được kiểm tra cho các đặc điểm hình Thái, sinh lý và sinh hóa với tham chiếu đến các điều kiện phát triển và sản xuất của laccase. Phân lập vi khuẩn đã được duy trì trên agar dinh dưỡng trung bình ở nghiêng 4 ° c. Trước khi đánh trung bình chứa (w/v): dinh dưỡng canh (0.8%), thịt extract (1%), chế phẩm peptone (1%), tryptone (1%) và NaCl (0,05%). Các nền văn hóa đã được ủ ở 37 ° C trên một shaker quay tại 180 vòng/phút. Sau 18 h, 5% (v/v) của văn hóa lỏng được sử dụng để cấy laccase sản xuất phương tiện chứa (w/v): nấm men extract (0,15%), tryptone (0,15%) và NaCl (0.5%). Nền văn hóa đã được ủ ở 37 ° C trên một shaker quay 200 rpm [12].

Kết quả (Việt) 2:

Bộ sưu tập mẫu

Các mẫu được lấy từ bột và giấy công nghiệp xử lý nước thải, mía vùng rễ và bagass ở Ahvaz, Iran. Các mẫu đất được thu thập trong các túi nhựa tiệt trùng ở độ sâu 10-15 cm dưới bề mặt trái đất. Tất cả các mẫu được giữ ở 4 ° C cho đến khi sử dụng.

Phân lập và sàng lọc các vi khuẩn chủng

10 g mẫu khô trong không khí đất, bagass, vỏ cây bị suy thoái và 10 ml nước thải đã được chuyển giao cho 250 ml bình Erlenmeyer có chứa 100 ml dung dịch vô trùng dung dịch muối (0,9% w / v NaCl) [13]. Các bình được ủ cho 120 phút ở 40 ° C dưới lắc (130 rpm). Sau đó, 1 ml dung dòch đã được thêm vào 9 ml dung dịch muối vô trùng và pha loãng nối tiếp (10-1-10-9) đã được chuẩn bị. Khoảng 100 ml 10-3 và 10-5 pha loãng đã được lan truyền trên các đĩa Petri chứa môi trường thạch dinh dưỡng bổ sung 2-4 mg / mL Amphotericin B. cá nhân thuộc địa của vi khuẩn từ các tấm đã được sàng lọc trên các đĩa Petri chứa môi trường thạch dinh dưỡng bổ sung 0,5 mM guaiacol để phát hiện hoạt động laccase [14]. Các tấm được ủ ở 25-33 ° C trong 96 h. Các thủ tục cô lập và sàng lọc được lặp đi lặp lại nhiều lần cho đến khi phân lập được tìm thấy là tinh khiết. Các chủng laccase sản xuất được kiểm tra về đặc điểm hình thái, sinh lý và sinh hóa với tham chiếu đến các điều kiện phát triển và sản xuất của laccase. Vi khuẩn phân lập được duy trì trên dinh dưỡng môi trường thạch trong slants ở 4 ° C. Pre-nuôi trung bình chứa (w / v):. Canh dinh dưỡng (0,8%), chiết xuất từ thịt (1%), peptone (1%), tryptone (1%) và NaCl (0,05%) Các nền văn hóa đã được ủ ở 37 ° C trên một shaker quay tại 180 rpm. Sau 18 giờ, 5% (v / v) của văn hóa lỏng được sử dụng để cấy các phương tiện sản xuất laccase có chứa (w / v): Chiết xuất từ nấm men (0,15%), tryptone (0,15%) và NaCl (0,5%). Nuôi cấy được ủ ở 37 ° C vào một shaker quay tại 200 rpm [12].