2.9 Culture of insect cells Insect

2.9 Culture of insect cells
Insect cell culture was started in 1915 but no cell line capable of replicating indefinitely was established until 1962. In that year Grace showed the ability of the insect cell line Antheraea eucalypti to replicate indefinitely in Animal cells: basic concepts 31 vitro (Brooks and Kurtti, 1971). The insect cell lines most frequently cultured in vitro are Sf-9, High-FiveTM, and S2. Sf-9 cells are derived from the IPLBSF-21 cell line, isolated by Vaughn et al. (1977) from pupal ovarian tissue of the fall armyworm Spodoptera frugiperda. This cell line is commonly used for bioproduct expression employing baculovirus as vectors, similarly to the High-FiveTM cell line. High-FiveTM cells (BTI-TN-5BI-4) are derived from Trichoplusia ni cells and are frequently employed due to their capacity to express high protein levels when compared with other insect cell lines, such as Sf-9 cells (Rhiel et al., 1997). This cell line shows high growth rates in adherent culture, and can easily be adapted to grow in suspension and in serum-free media. The S2 cell line, isolated from late stage fruit fly Drosophila melanogaster embryos, was established in 1969 by Schneider, from hundreds of 20–24-hour-old embryos (Schneider, 1972). This cell line can be genetically modified and is capable of stably expressing heterologous proteins, being easily adapted to suspension growth. A comparison between insect and mammalian cell culture technology shows various similarities and differences. Due to the fact that insect cell lines typically derive from specific organs or non-differentiated embryonic tissues, the same cell line can proliferate in suspension or in adherent manner (in monolayer). This versatility in growth mode, which contrasts with most mammalian cell lines, increases the choices of bioreactor types and culture strategies for production. Contact inhibition shown by various mammalian cell lines is low or absent for insect cells, and they tend to aggregate in suspension or in adherent cultures. Adherent insect cell release from solid surfaces generally does not require trypsinization, unlike anchorage-dependent mammalian cells. Insect cells, like mammalian cells, need rigorous aseptic manipulation during cell transfer, inoculation, and propagation in bioreactors. A minimal inoculum density is required for both cell types. Typically, insect and mammalian cell cultures are initiated with inocula of 1–2 3 105 cells per milliliter of liquid medium (Agathos, 1991). Table 2.3 summarizes the major differences and similarities between these cells

Kết quả (Việt) 1:

2,9 văn hóa của côn trùng tế bào Côn trùng di động văn hóa đã được bắt đầu vào năm 1915, nhưng không có dòng tế bào có khả năng sao chép vô thời hạn được thành lập cho đến năm 1962. Trong năm đó ân sủng cho thấy khả năng của dòng côn trùng tế bào Antheraea eucalypti để nhân rộng vô hạn định ở động vật tế bào: khái niệm cơ bản 31 ống nghiệm (Brooks và Kurtti, 1971). Các tế bào côn trùng đường hầu hết thường xuyên văn hóa trong ống nghiệm là Sf-9, cao-FiveTM và S2. SF-9 tế bào có nguồn gốc từ IPLBSF-21 cho dòng tế bào, cô lập bởi Vaughn et al. (1977) từ mô pupal buồng trứng của mùa thu armyworm Spodoptera frugiperda. Dòng tế bào này thường được sử dụng cho các biểu hiện bioproduct sử dụng baculovirus như vectơ, tương tự với dòng tế bào cao-FiveTM. Tế bào cao-FiveTM (BTI-TN-5BI-4) có nguồn gốc từ tế bào Trichoplusia ni và thường xuyên được sử dụng do khả năng của họ để thể hiện mức độ protein cao khi so sánh với dòng côn trùng di động khác, chẳng hạn như Sf-9 tế bào (Rhiel và ctv., 1997). Dòng tế bào này cho thấy mức tăng trưởng cao trong văn hóa dính, và có thể dễ dàng được thích nghi để phát triển trong hệ thống treo và trong huyết thanh miễn phí phương tiện truyền thông. S2 cho dòng tế bào, bị cô lập từ cuối giai đoạn quả bay Drosophila melanogaster phôi, được lập năm 1969 thông Schneider, từ hàng trăm 20-24 giờ tuổi phôi (Schneider, 1972). Dòng tế bào này có thể được biến đổi và có khả năng ổn định thể hiện protein heterologous, được dễ dàng thích nghi với sự phát triển hệ thống treo. Một so sánh giữa côn trùng và động vật có vú di động văn hóa công nghệ cho thấy nhiều điểm tương đồng và khác biệt. Do thực tế là côn trùng di động đường thường lấy được từ các cơ quan cụ thể hoặc phòng không phân biệt mô phôi, dòng tế bào tương tự có thể sinh sôi nảy nở trong đình chỉ hoặc dính cách (trong monolayer). Tính linh hoạt này trong chế độ tăng trưởng, tương phản với động vật có vú đặt di động dây chuyền, làm tăng sự lựa chọn của các loại bioreactor và văn hóa chiến lược sản xuất. Ức chế liên hệ Hiển thị bởi dòng tế bào động vật có vú khác nhau là thấp hoặc vắng mặt cho côn trùng tế bào, và họ có xu hướng để tổng hợp trong đình chỉ hoặc trong nền văn hóa dính. Phiên bản di động côn trùng dính từ bề mặt rắn nói chung không yêu cầu trypsinization, không giống như các tế bào động vật có vú phụ thuộc vào anchorage. Tế bào côn trùng, như tế bào động vật có vú, cần nghiêm ngặt aseptic thao tác trong các tế bào chuyển, tiêm chủng, và tuyên truyền trong bioreactors. Với mật độ inoculum tối thiểu là cần thiết cho cả hai loại tế bào. Thông thường, côn trùng và nền văn hóa tế bào động vật có vú được bắt đầu với inocula của 1-2 3 105 tế bào cho một milliliter của chất lỏng trung bình (Agathos, 1991). 2.3 Bảng tóm tắt các khác biệt lớn và điểm tương đồng giữa các tế bào