Each pool of mosquitoes (not exceed

Each pool of mosquitoes (not exceeding 40 individuals) were
placed into a 1.7 mL polypropylene tube (Eppendorf, Hauppauge,
NY) and ground with a pestle (Kontes) and 500 ml of Dulbecco’s
minimal essential medium (DMEM) (Gibco) supplemented with
10% fetal bovine serum (FBS), 100 U/mL of penicillin and
streptomycin, 1 U/mL of fungizone and gentamycin. The
homogenized mosquitoes were then centrifuged at 15,000 g for
1 min. Triturate was then transferred to a new tube and frozen at
270uC. 100 ml of thawed triturate was then plated onto a 96-well
cell culture plate (Corning). 50 ml of a Vero cell suspension was
then added to the same well and placed into an incubator at 37uC
and 5% carbon dioxide. The cell and homogenized mosquito
mixture was then monitored daily for cytopathic effect (CPE) for
10 days. Medium from those wells presenting signs of CPE
(presumptive positives) were removed and placed at 270uC until
use [29].

Kết quả (Việt) 1:

Mỗi hồ bơi của muỗi (không vượt quá 40 cá nhân)Đặt vào một 1,7 mL polypropylene ống (Eppendorf, Hauppauge,NY) và đất với một pestle (Kontes) và 500 ml của Dulbeccotối thiểu cần thiết trung bình (DMEM) (Gibco) bổ sung10% thai nhi bò huyết thanh (FBS), 100 U/mL penicillin vàstreptomycin, 1 U/mL fungizone và gentamycin. Cácmuỗi homogenized đã được sau đó ly 15.000 g cho1 min. Triturate sau đó được chuyển đến một ống mới và bị đóng băng270uC. 100 ml triturate xả đá đã được sau đó mạ lên 96 giếngtế bào văn hóa tấm (Corning). 50 ml của hệ thống treo tế bào Vero làsau đó, thêm vào cùng một tốt và đặt vào một vườn ươm tại 37uCvà 5% điôxít cacbon. Các tế bào và homogenized muỗihỗn hợp được sau đó theo dõi hàng ngày cho cytopathic có hiệu lực (CPE) cho10 ngày. Trung bình từ những giếng trình bày các dấu hiệu của CPE(tích cực ngai vàng) đã được gỡ bỏ và được đặt ở 270uC cho đến khisử dụng [29].

Kết quả (Việt) 2:

Mỗi hồ bơi của muỗi (không quá 40 cá nhân) được
đặt vào một mL polypropylene ống 1,7 (Eppendorf, Hauppauge,
NY) và mặt đất với một cái chày (Kontes) và 500 ml Dulbecco
trung cần thiết tối thiểu (DMEM) (Gibco) có bổ sung
10 % huyết thanh thai bò (FBS), 100 U / mL penicillin và
streptomycin, 1 U / mL fungizone và gentamycin. Các
con muỗi đồng nhất sau đó được ly tâm ở 15.000 g trong
1 phút. Nghiền thành bột sau đó đã được chuyển giao cho một ống mới và đông lạnh ở
270uC. 100 ml nghiền thành bột tan ra sau đó được mạ lên 96 giếng
tấm nuôi cấy tế bào (Corning). 50 ml dung dịch treo tế bào Vero được
sau đó thêm vào cũng như nhau và được đặt vào lồng kính tại 37uC
và 5% carbon dioxide. Các tế bào và đồng nhất muỗi
hỗn hợp sau đó được theo dõi hàng ngày cho hiệu ứng bệnh lý tế bào (CPE) cho
10 ngày. Trung từ những giếng trình bày dấu hiệu của CPE
(dương khoán) đã được gỡ bỏ và được đặt tại 270uC cho đến khi
sử dụng [29].