2.2. Experimental procedureBatch ex

2.2. Experimental procedure

Batch experiments were performed in 120 ml serum bottles
with a working volume of 50 ml. The substrate concentration was kept at 5 mM and 500ml of pre-culture was used as an
inoculum. Glucose was used as the sole carbon source for all
experiments unless otherwise stated. Batch experiments to
investigate the effect of initial pH (4e7) on H2 production and
cell growth were performed at 30C and 150 rpm. Growth and
H2 production at different temperatures (25Ce40C) were
performed using a temperature gradient incubator (Test Tube
Oscillator, Terra-tec, Australia) at optimal pH and 100 oscillation/min. Twenty-five milliliter tubes with 10 ml culture
medium, supplemented with glucose (5 mM) was inoculated
with 100ml pre-culture and incubated in temperature gradient
at the optimal initial pH (observed from pH experiment). The
incubation time for optimal pH and temperature was 24 h. H2
production at optimal pH and temperature was conducted in
duplicate cultivations.
Carbon material balance was calculated by multiplying the
yield obtained for each carbon containing metabolite by the
respective number of carbons present in the molecular
formula. The sum of total carbon mass obtained for individual
metabolite was then divided by the number of carbon atoms
in 1 mol of substrate used. The cellular composition of CMC-1
isolate was assumed to be CH1.67O0.20N0.27[16]. The CO2 in the
liquid phase was ignored during the carbon balance
calculations.
Cell growth and cumulative H2 production kinetic studies
on glucose were performed at optimal pH and temperature.
Specific growth rate (h
1
) was calculated by substituting the
data points at exponential curve in equationm ¼Δln OD600/Δt.
Cumulative H2 production was calculated as described by Lee
and Rittmann (2009)[17]. The H2 yield values were calculated
by converting the amount of end-point H2 gas produced (ml) to
moles (mol) using the ideal gas equation for respective cultivation temperatures, dividing by the product of initial milli
molar glucose concentration (mM) and the culture media
volume (ml). The fermentation time for kinetic study was 24 h
and was conducted in duplicate cultivations.
The isolate was tested for substrate utilization efficiency
and end product metabolite production when grown in
galactose, mannose, xylose and arabinose for 24 and 48 h.
Batch fermentations with monomeric hemicellulose sugars
were performed in triplicate cultivations.

Kết quả (Việt) 1:

2.2. thử nghiệm thủ tụcHàng loạt thí nghiệm đã được thực hiện trong 120 ml huyết thanh chaivới một khối lượng làm việc 50 ml. Nồng độ chất nền được lưu giữ tại 5 mM và 500ml Pre-văn hóa đã được sử dụng như là mộtinoculum. Đường được sử dụng như là nguồn cacbon duy nhất cho tất cảCác thử nghiệm trừ khi được nêu. Hàng loạt thí nghiệm đểđiều tra hiệu quả của ban đầu vn (4e7) trên H2 sản xuất vàtăng trưởng tế bào đã được thực hiện tại 30C và 150 vòng/phút. Tăng trưởng vàH2 sản xuất ở nhiệt độ khác nhau (25Ce40C) đãthực hiện bằng cách sử dụng một vườn ươm gradient nhiệt độ (ống nghiệmDao động, Terra-tec, Úc) tại pH tối ưu và 100 dao động/tối thiểu hai mươi lăm milliliter ống với văn hóa 10 mlTrung bình, bổ sung với glucose (5 mM) được tiêm chủngvới 100ml Pre-văn hóa và ủ trong gradient nhiệt độở Ban đầu pH tối ưu, (quan sát thấy từ pH thử nghiệm). Cácthời gian ủ bệnh cho pH tối ưu và nhiệt độ là 24 h. H2sản xuất tại pH tối ưu và nhiệt độ được tiến hànhcanh trùng lặp.Cân bằng vật chất Carbon đã được tính toán bằng cách nhân sựnăng suất thu được cho mỗi cacbon có chứa chất chuyển hóa bởi cácsố tương ứng của cacbon hiện diện trong các phân tửcông thức. Tổng của tất cả cacbon khối lượng thu được cho cá nhânchất chuyển hóa sau đó được chia cho số nguyên tử cacbonở 1 mol của bề mặt được sử dụng. Các thành phần di động của CMC-1isolate được giả định là CH1.67O0.20N0.27 [16]. Các khí CO 2 trong cácgiai đoạn chất lỏng được bỏ qua trong sự cân bằng cacbontính toán.Tăng trưởng tế bào và tích lũy H2 sản xuất động lực họctrên đường đã được thực hiện tại pH tối ưu và nhiệt độ.Tốc độ tăng trưởng cụ thể (h1) đã được tính toán bằng cách thay thế cácđiểm dữ liệu tại các đường cong mũ trong equationm ¼Δln OD600/Δt.Tích lũy H2 sản xuất đã được tính toán như được mô tả bởi Leevà Rittmann (năm 2009) [17]. Giá trị sản lượng H2 được tính toánbằng cách chuyển đổi số tiền cuối điểm H2 khí sản xuất (ml) đểnốt ruồi (mol) bằng cách sử dụng phương trình khí lý tưởng cho trồng tương ứng nhiệt độ, phân chia theo sản phẩm ban đầu millinồng độ mol glucose (mM) và phương tiện truyền thông văn hóakhối lượng (ml). Thời gian lên men cho nghiên cứu kinetic là 24 hvà được tiến hành đồng trùng lặp.Isolate đã được thử nghiệm cho chất nền sử dụng hiệu quảvà sản phẩm cuối cùng sản xuất chất chuyển hóa khi trồng tronggalactoza, mannose, xylose và arabinose cho 24 và 48 h.Lô fermentations với monomeric hemicellulose đườngđã được thực hiện trong triplicate canh.

Kết quả (Việt) 2:

2.2. Thủ tục thử nghiệm hàng loạt các thí nghiệm đã được thực hiện trong 120 ml chai huyết thanh với một khối lượng công việc của 50 ml. Nồng độ chất nền được lưu giữ tại 5 mM và 500ml pre-văn hóa đã được sử dụng như là một nguồn bệnh. Glucose được sử dụng làm nguồn carbon duy nhất cho tất cả các thí nghiệm, trừ khi có quy định khác. Thí nghiệm hàng loạt để nghiên cứu ảnh hưởng của pH ban đầu (4e7) trên H2 sản xuất và tăng trưởng tế bào được thực hiện ở 30C và 150 rpm. Tăng trưởng và H2 sản xuất ở nhiệt độ khác nhau (25Ce40C) đã được thực hiện bằng cách sử dụng một gradient nhiệt độ lồng ấp (Test ống Oscillator, Terra-tec, Australia) tại pH tối ưu và 100 dao động / phút. Hai mươi lăm ống ml với văn hóa 10 ml môi trường, bổ sung glucose (5 mM) đã được tiêm với 100ml pre-văn hóa và ủ trong gradient nhiệt độ tại pH ban đầu tối ưu (quan sát từ thí nghiệm pH). Các thời gian ủ bệnh của pH và nhiệt độ tối ưu là 24 h. H2 sản xuất tại pH và nhiệt độ tối ưu đã được tiến hành trong canh tác trùng lặp. cân bằng vật chất Carbon đã được tính toán bằng cách nhân năng suất thu được cho mỗi carbon chứa chất chuyển hóa bởi các số tương ứng của cacbon có trong phân tử thức. Tổng của tổng khối lượng cacbon thu được cho cá nhân chất chuyển hóa sau đó được chia cho số nguyên tử carbon trong 1 mol của chất nền được sử dụng. Các thành phần tế bào của CMC-1 phân lập được giả định là CH1.67O0.20N0.27 [16]. Các CO2 trong pha lỏng đã bị bỏ qua trong khi số dư carbon tính toán. tăng trưởng tế bào và sản xuất H2 tích lũy nghiên cứu động học trên đường được thực hiện ở pH và nhiệt độ tối ưu. Tốc độ tăng trưởng cụ thể (h ? 1 ) đã được tính toán bằng cách thay thế các điểm dữ liệu ở đường cong hàm mũ trong equationm ¼Δln OD600 / Δt. sản xuất H2 tích lũy được tính như mô tả của Lee và Rittmann (2009) [17]. Các giá trị sản lượng H2 được tính toán bằng cách chuyển đổi các lượng khí H2 điểm kết thúc sản xuất (ml) để nốt ruồi (mol) bằng cách sử dụng phương trình khí lý tưởng cho nhiệt độ canh tác tương ứng, chia cho các sản phẩm của milli ban đầu nồng độ glucose mol (mM) và phương tiện truyền thông văn hóa khối lượng (ml). Thời gian lên men để nghiên cứu động học là 24 h và được tiến hành trong canh tác trùng lặp. phân lập được thử nghiệm cho hiệu quả sử dụng chất nền và kết thúc sản xuất chất chuyển hóa sản phẩm khi trồng trong galactose, mannose, xylose và arabinose cho 24 và 48 h. mẻ lên men với hemicellulose monomeric đường đã được thực hiện trong canh tác ba bản.