Three-dimensional test. The three-d

Three-dimensional test. The three-dimensional test gives phenotypic evidence of ESBL-induced inactivation of extend- ed-spectrum cephalosporins or aztreonam without relying on demonstration of inactivation of the þ-lactamases by a þ-lac- tamase inhibitor. In this test, developed by Thomson (393), the surface of the susceptibility plate is inoculated by standard methods for disk diffusion testing, but additionally a circular slit is cut in the agar concentric with the margin of the plate. A heavy inoculum of the test organism (109 to 1010 CFU of cells) is pipetted into the slit. þ-Lactam-impregnated disks are then placed on the surface of the agar 3 mm outside of the inocu- lated circular slit. þ-Lactamase-induced inactivation of each test antibiotic is detected by inspection of the margin of the zone of inhibition in the vicinity of its intersection with the circular three-dimensional inoculation. The presence of þ-lac- tamase-induced drug inactivation is visualized as a distortion or discontinuity in the usually circular inhibition zone or the production of discrete colonies in the vicinity of the inoculated slit.
A modification of the test involves removing a cylindrical plug of agar (diameter, 4 mm), 2 mm from the antibiotic disks (393, 409). This cup is then filled with a milky suspension of the test organism. The modified test is interpreted as positive if the inhibition zone around the þ-lactam antibiotic disk is distorted in such a way that growth of the test organism appears within the zone, behind the cup, and fully reaching the cup.
Disadvantages of the test include the need for an additional indirect test if inhibition zones are small or absent. The indi- rect test is performed by inoculating the surface of the agar with a fully susceptible strain, such as Escherichia coli ATCC 25922, and then inoculating the circular cut in the agar with the suspension of the test organism. This precludes simultaneous determination of antibiotic susceptibilities but does permit in- vestigation of the þ-lactamases of organisms for which inhibi- tion zones are very small.
If the indirect test is used, the three-dimensional test is more sensitive than the double-disk diffusion test (393, 409), but if the indirect test is not used, sensitivity declines (31).

Kết quả (Việt) 2:

Thử nghiệm ba chiều. Các thử nghiệm ba chiều cho bằng chứng kiểu hình của bất hoạt ESBL gây ra các cephalosporin ed phổ extend- hoặc aztreonam mà không dựa vào trình diễn của bất hoạt của þ-lactamase của một chất ức chế tamase þ-lac-. Trong thử nghiệm này, được phát triển bởi Thomson (393), bề mặt của tấm nhạy cảm được tiêm bằng các phương pháp tiêu chuẩn để thử nghiệm kháng sinh, nhưng thêm một khe tròn được cắt trong tâm thạch với lề của tấm. Một truyền chất nặng nề của các sinh vật thử nghiệm (109-1010 CFU của tế bào) được pipetted vào khe. đĩa þ-Lactam tẩm sau đó được đặt trên bề mặt của thạch 3 mm bên ngoài của inocu- lated khe tròn. þ-lactamase gây ra sự bất hoạt của mỗi kháng sinh thử nghiệm được phát hiện qua sự kiểm tra của biên của vùng ức chế trong vùng lân cận giao nhau của nó với việc tiêm phòng ba chiều vòng tròn. Sự hiện diện của þ-lac- bất hoạt thuốc tamase gây ra được hình dung như là một biến dạng hoặc gián đoạn trong vùng ức chế thường tròn hoặc sản xuất thuộc địa rời rạc trong vùng lân cận của khe cấy.
Một sửa đổi của các thử nghiệm liên quan đến việc loại bỏ một plug trụ agar (đường kính 4 mm), 2 mm từ các đĩa kháng sinh (393, 409). Chén này sau đó được lấp đầy với một hệ thống treo sữa của sinh vật thử nghiệm. Các bài kiểm tra sửa đổi được hiểu là tích cực nếu vùng ức chế xung quanh đĩa kháng sinh þ-lactam là bị bóp méo theo cách như vậy mà tốc độ tăng trưởng của vi khuẩn thử nghiệm xuất hiện trong khu vực, sau chén, đạt đầy đủ các cốc.
Nhược điểm của bài kiểm tra bao gồm sự cần thiết cho một bài kiểm tra gián tiếp bổ sung nếu khu ức chế là nhỏ hoặc không có. Các thử nghiệm gián được thực hiện bằng cách cấy bề mặt của thạch với một chủng đầy đủ mẫn cảm, như Escherichia coli ATCC 25.922, và sau đó cấy cắt tròn trong thạch với hệ thống treo của sinh vật thử nghiệm. Điều này ngăn cản xác định đồng thời tính nhạy cảm kháng sinh nhưng không cho phép vestigation trong- của þ-lactamase của các sinh vật mà khu sự ức chế là rất nhỏ.
Nếu xét nghiệm gián tiếp được sử dụng, thử nghiệm ba chiều nhạy hơn gấp đôi đĩa thử nghiệm khuếch tán (393, 409), nhưng nếu kiểm tra gián tiếp không được sử dụng, độ nhạy giảm (31).