Materials and methodsSample collect

Materials and methods

Sample collection and DNA extraction

Plant material was collected from five non-native populations in five provinces of China: Jiangsu (JS), Shanghai (SH), Fujian (FJ), Hong Kong (HK), and Taiwan (TW) and three native populations in three states of United States: NC, GA, and FL (Table 1; Figs. 1, 2). The sampling sites in the United States were located at or close to the well-documented source locations for S. alterniflora in China, e.g., Morehead City (NC), Altamaha Estuary (GA), and Tampa Bay (FL) (Xu & Zhuo, 1985). At each site, individuals

were sampled close and perpendicular to shorelines from areas accessible on foot and separated by a minimum of 10 m apart to minimize the possibility of resampling large clones. For each individual, a leaf sample 10 cm in length was collected with a scissor and stored in plastic bags with silica gels for DNA extraction (Doyle & Doyle, 1987). A piece of leaf tissue weighing approximately 0.3 g was used to extract genomic DNA using the CTAB method of Doyle & Doyle (1987). The quantity and quality of genomic DNA were estimated spectrophotometrically using NanoDrop ND-100 (NanoDrop Technologies Inc., Rockland, DE, USA), as well as visually by ethidium bromide staining on agarose gels.

Chloroplast DNA sequencing and analysis

The trnT-trnF chloroplast intergenic spacer region (partial) was amplified and sequenced in this study considering this spacer was also used in the study of Blum et al. (2007) which provided a detailed cpDNA haplotypes (chlorotypes) information across 30 pop- ulations in the United States. We randomly selected
8–14 individuals from each population to conduct
PCR amplification and sequencing using the universal

Kết quả (Việt) 1:

Vật liệu và phương phápBộ sưu tập mẫu và khai thác DNANguyên liệu thực vật được thu thập từ năm không phải là bản dân tại năm tỉnh của Trung Quốc: Giang tô (JS), Thượng Hải (SH), phúc kiến (FJ), Hong Kong (HK), và Đài Loan (TW) và ba dân bản địa trong ba tiểu bang của Hoa Kỳ: NC, GA và FL (bảng 1; Figs. 1, 2). Các trang web mẫu tại Hoa Kỳ đã được đặt tại hoặc gần với các vị trí các tài liệu nguồn cho S. alterniflora ở Trung Quốc, ví dụ như, Morehead City (NC), Altamaha cửa sông (GA), và Tampa Bay (FL) (Xu & Trác, 1985). Tại mỗi trang web, cá nhân là lấy mẫu gần và vuông góc với bờ biển từ khu vực thể truy cập vào chân và ngăn cách bởi một tối thiểu 10 m ngoài để giảm thiểu khả năng phương lớn bắt chước. Đối với mỗi cá nhân, một lá mẫu 10 cm chiều dài được thu thập với một hình cắt kéo và được lưu trữ trong túi nhựa với silica gel cho khai thác DNA (Doyle & Doyle, 1987). Một mảnh lá mô cân nặng khoảng cách 0.3 g được sử dụng để trích xuất các gen DNA bằng cách sử dụng phương pháp CTAB Doyle & Doyle (1987). Số lượng và chất lượng của gen DNA được ước tính spectrophotometrically bằng cách sử dụng NanoDrop ND-100 (NanoDrop Technologies Inc., Rockland, DE, Hoa Kỳ), cũng như trực quan của ethidium bromua nhuộm trên agarose gel.Trình tự ADN lạp lục và phân tíchTrnT-trnF Lạp lục intergenic spacer vùng (một phần) được khuếch đại và trình tự trong nghiên cứu này xem xét này spacer được sử dụng trong nghiên cứu của Blum et al. (2007) mà cung cấp một chi tiết cpDNA haplotypes (chlorotypes) thông tin trên 30 pop-ulations tại Hoa Kỳ. Chúng tôi lựa chọn ngẫu nhiên8-14 cá nhân từ mỗi dân để tiến hànhĐảng Cộng sản Romania khuếch đại và trình tự bằng cách sử dụng universal

Kết quả (Việt) 2:

Vật liệu và phương pháp thu thập mẫu DNA và khai thác nguyên liệu thực vật được thu thập từ năm dân số không có nguồn gốc tại năm tỉnh của Trung Quốc: Giang Tô (JS), Thượng Hải (SH), Phúc Kiến (FJ), Hong Kong (HK), và Đài Loan (TW) và ba số dân bản xứ ở ba tiểu bang của Hoa Kỳ: (. Bảng 1; Figs 1, 2) NC, GA, và FL. Các điểm lấy mẫu ở Hoa Kỳ được đặt tại hoặc gần các địa điểm nổi nguồn tài liệu cho S. alterniflora ở Trung Quốc, ví dụ như, Morehead City (NC), Altamaha Estuary (GA), và Tampa Bay (FL) (Xu & Zhuo , 1985). Tại mỗi địa điểm, cá nhân đã được lấy mẫu gần gũi và vuông góc với bờ biển từ khu vực truy cập trên chân và cách nhau bởi tối thiểu là 10 m ngoài để giảm thiểu khả năng resampling nhái lớn. Đối với mỗi cá nhân, một mẫu lá 10 cm đã được thu cùng với một kéo, được lưu trữ trong các túi nhựa với Gel silica để chiết xuất DNA (Doyle & Doyle, 1987.). Một mảnh của mô lá trọng lượng khoảng 0,3 g được sử dụng để trích xuất DNA của bộ gen bằng cách sử dụng phương pháp CTAB của Doyle và Doyle (1987). Số lượng và chất lượng của DNA của bộ gen đã được ước tính bằng cách sử dụng quang phổ NanoDrop NĐ-100 (NanoDrop Technologies Inc., Rockland, DE, Mỹ), cũng như trực quan bằng ethidium bromide nhuộm trên gel agarose. sequencing DNA Lục lạp và phân tích Các trnT-trnF lục lạp vùng đệm intergenic (một phần) được khuếch đại và trình tự trong nghiên cứu này xem xét spacer này cũng được sử dụng trong các nghiên cứu của Blum et al. (2007) trong đó cung cấp một haplotype cpDNA chi tiết (chlorotypes) thông qua 30 ulations pop- tại Hoa Kỳ. Chúng tôi lựa chọn ngẫu nhiên từ 8-14 cá nhân mỗi người dân để tiến hành khuếch đại PCR và giải trình tự bằng cách sử dụng phổ