4.3.2.1 Preparation of Bacterial Sp

4.3.2.1 Preparation of Bacterial Spore Suspensions
TIle production and harvesting of spore crops is not a procedure for the
novice, as it requires extensive knowledge, training, and experience. Each
species and even strain of a species can require special handling in order to
obtain good yields with maximum thermal resistance. The methods used can
impact directly on the resultant thermal resistance of the spores obtained.
Th erefore, a reader interested in following such a procedure would be well
advised to consult more detailed works on the subject, such as that of Gould
and Hurst (1969) .
Sporulation is a process that follows the cessation of all vegetative
growth (i.e., cellular division) . To produce the maximum number of spores
requires the production ofan appropriate number of vegetative cells of the
microorganism. The resultant culture is then allowed to form spores in a
suitable sporulation medium and incubated until sporulation ceases. During
incubation of cultures for spore production, continuous microscopic
examination of the cultures is extremely important in order to determine
when spore harvest is indicated. Incubation should be long enough to obtain
mature spores from a high percentage of the cell population. However, with
some species, incubation should not be extended much beyond this.
Regermination, (i.e., germination of some of the spores produced in the
culture), may occur (Stumbo, 1973). The yield (i.e., the proportion of cells
that have given birth to spores) is a major factor in the preparation of a
spore lot. It is interesting to note that spores isolated from underprocessed
and/or spoiled product generally exhibit low yields (i.e., from 1 to 10%) .
Some empirical rules for the formulation of a sporulation media are
known, such as control of pH at the end of growth phase, reduction in
available carbon, and presence of complex nitrogen sources (i.e., protein
hydrolyzates). However, optimal sporulation media tend to be specific to
the particular strain for which they were designed. Spore yields can vary by
a factor of from 1 to 10 using the same method and within laboratories.
The spores are harvested at the end of the incubation period. The
harvested spores should be washed at least five times with sterile distilled
water and appropriate centrifugation. Following washing, spores should be
treated by sonication to destroy sporangia and vegetative cells and free the
spores. The sonicated spores are then washed with sterile water at least 10
more times using centrifugation and resuspension. The recovered spores can
be suspended in sterile distilled water in vials and stored refrigerated or
fozen at -15--20°C. They can also be suspended in a 50% aqueous glycerol
solution containing 0.25% Tween 80; however, these should kept

refrigerated, not frozen . When needed, a frozen spore suspension should be
thawed by placing the vial in lukewarm (ca. 30°C) water for several minutes.

Kết quả (Việt) 1:

4.3.2.1 chuẩn bị đình chỉ do vi khuẩn SporeSản xuất gạch và thu hoạch các loại cây trồng spore không phải là một thủ tục cho cácmới làm quen, vì nó đòi hỏi kiến thức sâu rộng, đào tạo và kinh nghiệm. Mỗiloài và thậm chí căng thẳng của một loài có thể yêu cầu xử lý đặc biệt đểcó được năng suất vụ mùa tốt với sức đề kháng nhiệt tối đa. Các phương pháp được sử dụng có thểtác động trực tiếp vào cuộc kháng chiến kết quả nhiệt của các bào tử thu được.Th erefore, một độc giả quan tâm đến sau một thủ tục sẽ được tốtnên tham khảo ý kiến các công trình chi tiết hơn về chủ đề, chẳng hạn như Gouldvà Hurst (1969).Sporulation là một quá trình sau sự chấm dứt của tất cả thực vậttăng trưởng (tức là, phân chia tế bào). Để sản xuất số lượng tối đa của các bào tửyêu cầu sản xuất ofan số thích hợp của các tế bào thực vật của cácvi sinh vật. Văn hóa kết quả sau đó được cho phép để hình thức bào tử trong mộtphù hợp sporulation trung bình và ủ cho đến khi sporulation hết. Trong thời gianủ bệnh của nền văn hóa spore sản xuất, liên tục viCác xét nghiệm của các nền văn hóa là rất quan trọng để xác địnhkhi thu hoạch spore được chỉ định. Ủ bệnh nên đủ lâu để có đượctrưởng thành bào tử từ một tỷ lệ phần trăm cao của dân số di động. Tuy nhiên, vớimột số loài, ủ bệnh nên không được mở rộng ra ngoài đây.Regermination, (tức là, nảy mầm của một số các bào tử được sản xuất trong cácvăn hóa), có thể xảy ra (Stumbo, 1973). Năng suất (tức là, tỷ lệ của các tế bàomà đã được sinh ra bào tử) là một nhân tố chính trong việc chuẩn bị mộtSpore nhiều. Nó là thú vị để lưu ý rằng bào tử cô lập từ underprocessedvà/hoặc sản phẩm hư hỏng thường triển lãm các sản lượng thấp (tức là, từ 1 đến 10%).Một số quy tắc thực nghiệm cho việc xây dựng một phương tiện truyền thông sporulationđược biết đến, chẳng hạn như kiểm soát pH vào cuối giai đoạn tăng trưởng, giảmcó sẵn cacbon, và sự hiện diện của các nguồn nitơ phức tạp (tức là, proteinhydrolyzates). Tuy nhiên, phương tiện truyền thông tối ưu sporulation có xu hướng được cụ thể chosự căng thẳng cụ thể mà chúng được thiết kế. Spore sản lượng có thể thay đổi tùy theomột yếu tố của từ 1 đến 10 bằng cách sử dụng cùng một phương pháp và trong phòng thí nghiệm.Các bào tử được thu hoạch vào cuối thời kỳ ủ bệnh. Cácthu hoạch bào tử nên được rửa sạch ít nhất là năm lần với vô trùng chưng cấtnước và thích hợp số. Sau rửa, bào tử nênđiều trị bằng sonication để tiêu diệt túi và các tế bào thực vật và miễn phí cácbào tử. Các bào tử sonicated sau đó được rửa với vô trùng nước ít nhất 10thông tin thêm thời gian bằng cách sử dụng số và resuspension. Các bào tử phục hồi có thểđược treo trong vô trùng nước cất trong lọ và lưu trữ trong tủ lạnh hoặcfozen tại -15-20 ° C. Họ cũng có thể bị đình chỉ trong một nhóm glycerol dung 50%giải pháp có chứa 0,25% Tween 80; Tuy nhiên, này nên giữlàm lạnh, không đông lạnh. Khi cần thiết, một hệ thống treo spore đông lạnh nênxả đá bằng cách đặt chai thuốc trong ấm (ca. 30° C) nước trong vài phút.

Kết quả (Việt) 2:

4.3.2.1 Chuẩn bị vi khuẩn Spore Đuổi
sản xuất gạch và thu hoạch các loại cây trồng bào tử không phải là một thủ tục cho
người mới, vì nó đòi hỏi mở rộng kiến thức, đào tạo và kinh nghiệm. Mỗi
loài và thậm chí căng thẳng của một loài có thể yêu cầu xử lý đặc biệt để
có được năng suất tốt với kháng nhiệt tối đa. Các phương pháp được sử dụng có thể
tác động trực tiếp vào nhiệt kháng kết quả của các bào tử thu được.
Erefore Th, một độc giả quan tâm đến sau như một thủ tục sẽ được cũng
nên tham khảo ý kiến công trình chi tiết hơn về chủ đề này, chẳng hạn như của Gould
và Hurst (1969) .
hình thành bào tử là một quá trình mà sau sự chấm dứt của tất cả các thực vật
tăng trưởng (tức là, phân chia tế bào). Để sản xuất số lượng tối đa của các bào tử
đòi hỏi phải sản xuất ofan số lượng thích hợp của tế bào sinh dưỡng của
vi sinh vật. Thì nền văn hóa kết quả được cho phép để tạo thành các bào tử trong một
môi trường hình thành bào tử phù hợp và ủ cho đến khi hình thành bào tử chấm dứt. Trong thời gian
ủ bệnh của nền văn hóa cho sản xuất bào tử, liên tục vi
kiểm tra của các nền văn hóa là vô cùng quan trọng để xác định
khi thu hoạch bào tử được chỉ định. Ươm tạo nên đủ dài để có được
bào tử trưởng thành từ một tỷ lệ phần trăm cao của quần thể tế bào. Tuy nhiên, với
một số loài, ủ bệnh nên không được gia hạn nhiều hơn này.
Regermination, (tức là, sự nảy mầm của một số các bào tử được sản xuất trong các
nền văn hóa), có thể xảy ra (Stumbo, 1973). Năng suất (tức là, tỷ trọng của các tế bào
đó đã sinh ra bào tử) là một yếu tố quan trọng trong việc chuẩn bị của một
bào tử rất nhiều. Nó là thú vị để lưu ý rằng các bào tử phân lập từ underprocessed
và / hoặc sản phẩm hư hỏng thường biểu hiện năng suất thấp (tức là 1-10%).
Một số quy tắc thực nghiệm để xây dựng một phương tiện truyền thông hình thành bào tử
được, được biết đến như kiểm soát pH ở cuối của giai đoạn tăng trưởng, giảm
carbon có sẵn, và sự hiện diện của các nguồn nitơ phức tạp (ví dụ, protein
hydrolyzates). Tuy nhiên, phương tiện truyền thông tối ưu hình thành bào tử có xu hướng cụ thể cho
các chủng cụ thể mà họ đã thiết kế. Sản lượng bào tử có thể thay đổi theo
hệ số 1-10 bằng cách sử dụng cùng một phương pháp và trong phòng thí nghiệm.
Các bào tử được thu hoạch vào cuối thời kỳ ủ bệnh. Các
bào tử thu hoạch nên được rửa ít nhất năm lần với cất vô trùng
nước và ly tâm thích hợp. Sau rửa, bào tử nên được
điều trị bằng cách sonication để tiêu diệt các túi bào tử và tế bào sinh dưỡng và giải phóng các
bào tử. Sau đó các bào tử sonicated được rửa bằng nước vô trùng ít nhất 10
lần trở lên sử dụng ly tâm và resuspension. Các bào tử có thể phục hồi
được treo lơ lửng trong nước cất vô trùng trong lọ nhỏ và được lưu trữ trong tủ lạnh hoặc
fozen tại -15--20 ° C. Họ cũng có thể được treo lơ lửng trong một dung dịch glycerol 50%
dung dịch chứa 0,25% Tween 80; Tuy nhiên, đó nên giữ trong tủ lạnh, không đông lạnh. Khi cần thiết, dịch bào tử đông lạnh nên rã đông bằng cách đặt các chai thuốc trong ấm (khoảng 30 ° C) nước trong vài phút.