Gram reactionProvided  that  the  G

Gram reaction
Provided  that  the  Gram-stained  smear  has  been  made
from a pure culture,  if any cells have  retained  the crysta
violet–iodine complex  then  the bacterium  is  regarded a
being Gram-positive. It is not unusual for some of the cell
to decolourize, particularly older cells or those producing
endospores.  In  some  of  the  Bacillus  species,  such  as  B
circulans, all of  the  cells usually decolourize. Endospore
in  a  Gram-stain  are  seen  as  unstained  areas  within  the
mother cell. The production of endospores could indicate
that  the bacterium  is a Bacillus (aerobic) or a Clostridium
(anaerobic) species.
Other tests to distinguish between Gram-
positive and Gram-negative bacteria
If  the  results of  the Gram stain are equivocal, other  test
are available to aid in the differentiation of Gram-positiv
and Gram-negative bacteria.
LANA test
A  swab  is  impregnated  with  L-alanine-4-nitroanilide
(LANA).  A  colony  is  touched  with  the  swab  and  the
swab will  turn  yellow  if  the bacterium  is Gram-negativ
(Fig. 2.29).
KOH test
A  loopful of  the bacterium  is  taken  from a non-selective 
medium  (blood agar) and mixed with an equal amount 
of 3% potassium hydroxide (KOH) on a clean microscope 
slide. After thorough mixing the loop is lifted at intervals 
to see whether a gel is forming. If the bacterium is Gram-
negative a viscous gel  forms within 60 seconds while no 
gel is formed if the bacterium is Gram-positive (Fig. 2.30).
Susceptibility to vancomycin
The majority of Gram-positive bacteria  (except  for  some 
lactobacilli and some enterococci) are susceptible to van-
comycin whereas all Gram-negative bacteria are  resistant 
(Fig. 2.31).
Cellular morphology (shape)
In  this  primary  identification  bacteria  are  regarded  as 
being either a coccus or a rod, filamentous bacteria being 
viewed  as  elongated  rods.  Pleomorphic  bacteria  such  as 
Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes and Rhodococcus equi 
can appear coccal but there are usually a few rod-shaped 
cells  present  in  the  Gram-stained  smear,  and  they  are   
classified  as  rods  for  purposes  of  identification.  Listeria
monocytogenes  also  tends  to  produce many  coccal  forms 
especially from young cultures.
Growth or no-growth on McConkey agar
Commercial  firms may  prepare more  than  one  type  of 
MacConkey  agar. These differ  in  the  composition of  the 
bile  salts  and  as  to  whether  or  not  crystal  violet  (anti-
Gram-positive)  is  present.  It  is  advisable  to  use  a Mac-
Conkey  agar  that  inhibits  the majority of Gram-positive 
bacteria, will  support  the  growth  of  all members  of  the 
Enterobacteriaceae but is selectively inhibitory to the other 
Gram-negative bacteria
Catalase test
This test detects the enzyme catalase that converts hydro-
gen peroxide  to water  and  gaseous oxygen.  The  reagent, 
3% hydrogen peroxide, should be stored at +4°C in a dark 
bottle. Extra care must be taken if the bacterium has been 
grown on blood agar, because  the presence of  red blood 
cells can lead to a false-positive reaction.
•  Method 1: A loopful of the bacterial growth is taken 
from the top of the colonies avoiding the blood agar 
medium. The bacterial cells are placed on a clean 
microscope slide and a drop of 3% hydrogen 
peroxide is added. An effervescence of oxygen gas, 
within a few seconds, indicates a positive reaction 
(Fig. 2.32).

Kết quả (Việt) 1:

Phản ứng gramMiễn là bôi nhọ gam màu đã được thực hiệntừ một nền văn hóa thuần túy, nếu các tế bào bất kỳ đã giữ lại đượcViolet-iốt phức tạp sau đó là loại vi khuẩn được coi mộtlà Gram dương. Nó không phải là bất thường đối với một số tế bàođể decolourize, các tế bào đặc biệt lớn hoặc những người sản xuấtendospores. Ở một số loài trực khuẩn, chẳng hạn như Bcirculans, tất cả các tế bào thường decolourize. EndosporeGam vết được xem như là các khu vực unstained trong cáctế bào mẹ. Sản xuất endospores có thể chỉ ravi khuẩn là trực khuẩn một (aerobic) hoặc một ClostridiumCác loài (kỵ khí).Các xét nghiệm khác để phân biệt giữa gam-vi khuẩn Gram âm và tích cựcNếu kết quả của vết Gram là thử nghiệm không phân minh, các thẻ kháccó sẵn để hỗ trợ trong sự khác biệt của gam-positivvà vi khuẩn Gram âm.LANA testMột tăm bông tẩm với L-alanine-4-nitroanilide(LANA). Một thuộc địa xúc động với tăm bông và cáctăm bông sẽ chuyển sang màu vàng nếu vi khuẩn Gram-negativ(Hình 2,29).KOH testLoopful của vi khuẩn được lấy từ một không-chọn lọc Trung bình (máu agar) và trộn với một số tiền bằng nhau 3% kali hydroxit (KOH) trên kính hiển vi sạch Slide. Sau khi triệt để trộn vòng lặp được nâng lên khoảng để xem liệu một gel hình thành. Nếu vi khuẩn Gram-phủ định một hình thức nhớt gel trong vòng 60 giây trong khi không có gel được hình thành nếu vi khuẩn Gram dương (hình 2.30).Tính nhạy cảm với vancomycinPhần lớn các vi khuẩn Gram dương (ngoại trừ một số lactobacilli và một số enterococci) là dễ bị van-comycin trong khi tất cả các vi khuẩn Gram âm có khả năng chịu (Hình 2,31).Hình thái tế bào (hình dạng)Trong này chính xác định vi khuẩn được coi là là một coccus hoặc một cái que thằng, sợi vi khuẩn đang được xem như là thanh thuôn dài. Các vi khuẩn hình chẳng hạn như Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes và Rhodococcus đẳng có thể xuất hiện coccal nhưng có thường là một vài hình que Các tế bào hiện nay trong bôi nhọ gam màu, và họ là phân loại que cho mục đích nhận dạng. Listeria monocytogenes cũng có xu hướng để sản xuất dưới nhiều hình thức coccal đặc biệt là từ các nền văn hóa nhỏ.Sự phát triển hoặc không có tăng trưởng trên McConkey agarCông ty thương mại có thể chuẩn bị nhiều hơn một loại MacConkey agar. Những khác biệt trong thành phần của các Các muối mật và như để có hoặc không pha lê tím (anti-Gram dương) được trình bày. Đó là khuyến khích để sử dụng một máy Mac-Agar Conkey ức chế đa số Gram dương vi khuẩn, sẽ hỗ trợ sự tăng trưởng của tất cả các thành viên của các Enterobacteriaceae nhưng là ức chế chọn lọc khác Vi khuẩn Gram âmCatalase testKiểm tra này phát hiện enzym catalase chuyển đổi mụcgen peroxide để nước và khí oxy. Hoá, 3% hydrogen peroxide, nên được lưu trữ tại + 4 ° C trong một tối chai. Thêm chăm sóc phải được thực hiện nếu vi khuẩn đã trồng trên máu agar, bởi vì sự hiện diện của màu đỏ máu Các tế bào có thể dẫn đến một phản ứng dương tính sai.• Phương pháp 1: một loopful của vi khuẩn phát triển được thực hiện từ trên đỉnh của các thuộc địa tránh máu agar phương tiện truyền thông. Các tế bào vi khuẩn được đặt trên một sạch sẽ slide kính hiển vi và giảm 3% hiđrô peroxide được thêm vào. Một sự sôi nổi khí oxy, trong vòng vài giây, cho thấy một phản ứng tích cực (Hình 2,32).

Kết quả (Việt) 2:

Phản ứng Gram
Miễn là smear nhuộm Gram đã được thực hiện
từ một nền văn hóa thuần túy, nếu bất kỳ tế bào đã giữ lại Crysta
phức tạp tím-iodine sau đó vi khuẩn được coi một
là Gram dương. Nó không phải là bất thường đối với một số các tế bào
để decolourize, các tế bào đặc biệt lớn tuổi hoặc những người sản xuất
endospores. Trong một số loài vi khuẩn Bacillus, như B
circulans, tất cả các tế bào thường decolourize. Endospore
trong một Gram stain được coi là khu vực không nhiễm ô trong
tế bào mẹ. Việc sản xuất endospores có thể chỉ ra
rằng vi khuẩn là một Bacillus (aerobic) hay Clostridium
(kỵ khí) loài.
Các xét nghiệm khác để phân biệt giữa Gram-
vi khuẩn dương và Gram âm
Nếu kết quả của các vết bẩn Gram là không rõ ràng, kiểm tra khác
có sẵn để hỗ trợ trong việc phân biệt Gram positiv
vi khuẩn và Gram âm.
LANA kiểm tra
Một miếng gạc được ngâm tẩm với L-alanine-4-nitroanilide
(LANA). Một thuộc địa được xúc động với tăm bông và
tăm bông sẽ chuyển sang màu vàng nếu vi khuẩn là Gram Negativ
(Hình. 2.29).
KOH thử nghiệm
Một loopful của vi khuẩn được lấy từ một không chọn lọc 
trung bình (thạch máu) và trộn với một bằng lượng 
của 3% potassium hydroxide (KOH) trên kính hiển vi sạch 
slide. Sau khi trộn đều các vòng lặp được nâng lên trong khoảng thời gian 
để xem liệu một gel được hình thành. Nếu vi khuẩn Gram- là
tiêu cực một dạng gel nhớt trong vòng 60 giây, trong khi không có 
gel được hình thành nếu vi khuẩn là vi khuẩn Gram dương (Hình. 2.30).
Tính nhạy cảm với vancomycin
Phần lớn các vi khuẩn Gram dương (ngoại trừ một số 
lactobacilli và một số khuẩn ) là dễ bị van-
comycin trong khi tất cả các vi khuẩn Gram âm kháng 
(hình. 2.31).
hình thái tế bào (hình dạng)
Ở vi khuẩn xác định chính này được coi là 
được, hoặc một một thứ vi trùng hoặc một cây gậy, vi khuẩn dạng sợi được 
xem như thanh kéo dài. Vi khuẩn Pleomorphic như 
Trueperella pyogenes (Arcanobacterium) và Rhodococcus equi 
có thể xuất hiện coccal nhưng thường có một vài hình que 
tế bào hiện diện trong tế bào cổ nhuộm Gram, và chúng được   
phân loại như thanh cho mục đích nhận dạng. Listeria
monocytogenes cũng có xu hướng tạo ra nhiều hình thức coccal 
đặc biệt là từ các nền văn hóa thanh niên.
Tăng trưởng hoặc không có tăng trưởng về McConkey agar
công ty thương mại có thể chuẩn bị nhiều hơn một loại 
MacConkey thạch. Những khác biệt trong thành phần của 
muối mật và là có hay không tím tinh thể (chống
vi khuẩn Gram dương) là hiện tại. Đó là khuyến khích để sử dụng một Mac-
thạch Conkey ức chế phần lớn các vi khuẩn Gram dương 
vi khuẩn, sẽ hỗ trợ sự tăng trưởng của tất cả các thành viên của 
Enterobacteriaceae nhưng có chọn lọc ức chế sự khác 
vi khuẩn Gram âm
catalase kiểm tra
thử nghiệm này phát hiện enzyme catalase đó chuyển đổi thủy
gen peroxide để nước và ôxy dạng khí. Thuốc thử, 
3% hydrogen peroxide, nên bảo quản ở + 4 ° C trong bóng tối 
chai. Chăm sóc bổ sung phải được thực hiện nếu vi khuẩn đã được 
phát triển trên môi trường thạch máu, bởi vì sự hiện diện của máu đỏ 
các tế bào có thể dẫn đến một phản ứng dương tính giả.
• Phương pháp 1: Một loopful của sự tăng trưởng của vi khuẩn được lấy 
từ đỉnh của các thuộc địa tránh thạch máu 
trung bình. Các tế bào vi khuẩn được đặt trên một sạch 
kính hiển vi và giảm 3% hydrogen 
peroxide được thêm vào. Một sủi khí oxy, 
trong vòng vài giây, cho thấy một phản ứng tích cực 
(Hình. 2.32).