Lincomycin hydrochloride was purcha

Lincomycin hydrochloride was purchased
commercially as Lincomix® Soluble Powder
(Pharmacia & Upjohn, Kalamazoo MI). All
antibiotic treatments were prepared as a dust
in 20 g confectioners sugar, and applied
across the top bars of frames in the brood
chamber. We chose 200 mg lincomycin
applied three times, one week apart, as our
targeted dose and treatment regime, respectively. The choice of 200 mg lincomycin
was based on microbiological assay in
which comparable zones of inhibition were
observed between lincomycin and OTC
(Kochansky et al., 2001). The treatment
regime is similar to that currently used for
OTC dust, and results in a total colony exposure of 600 mg antibiotic.
2.2. Target animal safety
2.2.1. Colonies and treatments
Twenty queenright colonies with no visible signs of disease and containing no
surplus honey were maintained in 2-story,
10-frame Langstroth hives in Beltsville MD.
We chose 200 mg lincomycin as our targeted dose, but also examined higher doses
(600 mg = 3X; 1000 mg = 5X) for toxicity
to bees to fulfill FDA requirements for target animal safety. Therefore, colonies were
randomly subdivided into five treatment
groups consisting of (1) untreated control
(no sugar; no drug); (2) sugar treated control
(no drug); (3) 200 mg lincomycin hydrochloride; (4) 600 mg lincomycin hydrochloride; and (5) 1000 mg lincomycin hydrochloride. Each treated group (2–5) received an
application every seven days, until a total
of nine applications were made. This represents three times what we would consider
a normal treatment regime, but was included
to meet Food and Drug Administration
(FDA) requirements for target animal safety.
The study began on July 20, 2000 and was
terminated 68 days later on September 25,
2000.
2.2.2. Monitoring adult mortality
Test colonies were maintained on a concrete pad, and an area (0.25 m2) at each
colony entrance was marked with indelible
crayon. Dead adult bees in the marked area
were recorded one-day, four-days and sevendays after each treatment for the duration
of the study. After each recording, dead bees
were removed from the marked area. During
the study, the presence of immature brood
was used as an indication of a viable laying
queen. At the end of the study, the queen
was visually observed.
2.2.3. Monitoring larval mortality
Two areas (100 cells each; approx. 25 cm2
each) on a frame containing larval bees were
marked in every colony immediately prior to
548 M.F. Feldlaufer et al.
the first, fourth and eighth treatment. The
number of larvae in each area was recorded
and seven days post-treatment, the number
of capped cells in each area was used as a
measure of toxicity to larval bees. Eighteen
days post-treatment, marked areas were
inspected for emerging/emerged brood. Due
to a dearth of pollen and nectar, all colonies
were fed four liters sugar syrup (sugar:water;
2:1) and were given a 300 g pollen patty
(pollen:sugar; 4:1) two weeks prior to the
eighth treatment, to ensure immature brood
for the last portion of the larval toxicity
study.
2.2.4. Data analysis
2.2.4.1. Adults
Counts of dead adult bees Biểu tượng cảm xúc like were
transformed using log (Y + 1) to remove the
dependency of the variance on the mean.
ANOVA on the transformed counts were
conducted using Proc Mixed (SAS Institute,
1997). Our independent variables were treatment (200, 600, 1000 mg lincomycin;
untreated; and sugar-treated), number of
days following treatment (one, four, seven),
and time of year (seasonal). For these analyses, various repeated measures covariance
structures were estimated, with colony as
the repeated measure. A compound symmetric covariance structure was preferred
on both AIC and BIC measures (see SAS
Institute, 1997). Power analysis was performed using the repeated measures module of the Pass 2000 software (Pass, 2000).
2.2.4.2. Larvae
The proportions of larvae sealed seven
days post-treatment relative to the number of
initial larvae marked were transformed using
a standard arcsine transformation (sine–1
(square root of Y)). An ANOVA of the transformed proportions was run using Proc
Mixed (SAS, 1997). Our independent variables were treatment (200, 600, 1000 mg
lincomycin; untreated; and sugar-treated)
and time of year (seasonal, i.e. beginning,
middle and end of study). As with adults,
we used a repeated measures compound
symmetric covariance structure, with colony
as the repeated measure.
2.3. Field efficacy
2.3.1. Colonies and treatments
A quarantine apiary was established in
Pennsville NJ, consisting of 19 colonies
with visible AFB. These colonies were
previously treated by the owner with
Terramycin® patties earlier in the year, but
remained resistant to treatment. Comb samples from all colonies were subsequently
tested in Beltsville MD by disk diffusion
and indicated resistant P. larvae.
Colonies were scored as to their degree of
disease similar to Hitchcock et al. (1970).
The disease was considered “light”, if fewer
than 10 diseased cells per colony were
found; “moderate”, if 11–100 diseased cells
per colony were found; and “severe”, if
greater than 100 diseased cells were found
per colony. Based on this scoring system,
four colonies were considered “light”, six
colonies “moderate”, and nine, “severe”.
Colonies were dusted with lincomycin in
20 g confectioners sugar three times,
one week apart, in doses of either 100 mg,
200 mg or 400 mg active ingredient per
application. This represents the targeted dose
(200 mg), and additional doses (one-half
the targeted dose and twice the targeted
dose) required by FDA for antibiotic efficacy studies. Table I presents the individual doses administered to the colonies in
our study. Colonies were re-scored with
regard to their disease rating prior to the
third treatment and subsequently evaluated
45-days after the third treatment. Colonies in
which there were no visible signs of new
disease at this time were considered recovered.
2.3.2. Data analysis
The number of colonies rated as either
“diseased” or “recovered” (no disease) at the beginning and end of the study was analyzed using a 2 × 2 contingency table and
chi-square.

Kết quả (Việt) 1:

Lincomycin Hiđrôclorua được muathương mại như Lincomix ® hòa tan bột(Pharmacia & Upjohn, Kalamazoo MI). Tất cảphương pháp điều trị kháng sinh đã được chuẩn bị như một bụitrong 20 g confectioners đường, và áp dụngtrên các thanh hàng đầu của khung trong bố mẹbuồng. Chúng tôi đã chọn lincomycin 200 mgáp dụng 3 lần một tuần apart, như chúng tôinhắm mục tiêu theo liều lượng và điều trị chế độ, tương ứng. Sự lựa chọn của 200 mg lincomycinDựa trên khảo nghiệm vi sinh ởnhững khu vực so sánh của sự ức chếquan sát thấy giữa lincomycin và OTC(Kochansky et al., 2001). Điều trịchế độ là tương tự như hiện đang được sử dụng choOTC bụi, và kết quả trong một tiếp xúc tất cả thuộc địa của kháng sinh 600 mg. 2.2. mục tiêu động vật an toàn2.2.1. thuộc địa và phương pháp điều trịHai mươi queenright thuộc địa với không có dấu hiệu có thể nhìn thấy của bệnh và có không cómật ong thặng dư được duy trì trong 2-câu chuyện,10-khung tổ ong Langstroth tại Beltsville MD.Chúng tôi đã chọn 200 mg lincomycin là liều được nhắm mục tiêu của chúng tôi, nhưng cũng kiểm tra liều cao hơn(600 mg = 3 X; 1000 mg = 5 X) cho độc tínhđể con ong để đáp ứng yêu cầu FDA cho nhắm mục tiêu an toàn động vật. Do đó, thuộc địa đãngẫu nhiên được chia ra thành 5 điều trịNhóm bao gồm kiểm soát không được điều trị (1)(không có đường; không có ma túy); (2) đường xử lý kiểm soát(không có ma túy); (3) 200 mg lincomycin Hiđrôclorua; (4) 600 mg lincomycin Hiđrôclorua; và (5) 1000 mg lincomycin Hiđrôclorua. Mỗi nhóm được điều trị (2-5) đã nhận được mộtứng dụng mỗi bảy ngày, cho đến khi tổng cộngchín ứng dụng đã được thực hiện. Điều này đại diện cho ba lần những gì chúng tôi sẽ xem xétmột chế độ bình thường điều trị, nhưng đã được bao gồmđể đáp ứng thực phẩm và Cục quản lý dược(FDA) các yêu cầu đối với mục tiêu động vật an toàn.Nghiên cứu bắt đầu vào ngày 20 tháng 7 năm 2000 và đãchấm dứt 68 ngày sau ngày 25 tháng 9,năm 2000. 2.2.2. Giám sát tỷ lệ tử vong dành cho người lớnThử nghiệm thuộc địa đã được duy trì trên một pad bê tông, và diện tích (0,25 m2) tại mỗithuộc địa lối vào được đánh dấu với không thể xóa nhòabút chì. Các con ong chết dành cho người lớn trong khu vực được đánh dấuđã ghi lại một ngày, 4-ngày và sevendays sau mỗi lần điều trị trong suốt thời giancủa nghiên cứu. Sau khi ghi âm mỗi, con ong chếtđã được gỡ bỏ từ khu vực được đánh dấu. Trong thời giannghiên cứu này, sự hiện diện của brood nonđược sử dụng như là một dấu hiệu của một lắp đặt khả thinữ hoàng. Vào cuối của nghiên cứu, hoàng hậuđược quan sát trực quan.2.2.3. Giám sát tỷ lệ tử vong ấu trùng Hai khu vực (100 tế bào mỗi; có cự ly khoảng 25 cm2mỗi) trên một khung chứa ấu ong đãđánh dấu trong mỗi thuộc địa ngay lập tức trước khi đến548 M.F. Feldlaufer et al.đầu tiên, thứ tư và thứ tám điều trị. Cácsố lượng các ấu trùng trong từng khu vực đã được ghi lạivà bảy ngày sau điều trị, sốcủa các tế bào mũ trong từng khu vực đã được sử dụng như là mộtbiện pháp của các độc tính để ấu ong. Mười támngày sau điều trị, đánh dấu khu vực đãkiểm tra cho bố mẹ đang nổi lên/nổi lên. Dođể một khan hiếm của phấn hoa và mật hoa, tất cả thuộc địađược cho ăn lít bốn xi-rô đường (đường: nước;2:1) và đã được trao một patty phấn hoa 300 g(phấn hoa: đường; 4:1) hai tuần trước khi cácđiều trị thứ tám, để đảm bảo non broodcho phần cuối cùng của ấu trùng độc tínhnghiên cứu.2.2.4. dữ liệu phân tích2.2.4.1. người lớnBuôn lậu con ong chết dành cho người lớn, Biểu tượng cảm xúc thích đãchuyển đổi bằng cách sử dụng đăng nhập (Y + 1) để loại bỏ cácphụ thuộc của phương sai trên trung bình.ANOVA chuyển lậu đãtiến hành bằng cách sử dụng Proc hỗn hợp (SAS viện,Năm 1997). biến độc lập của chúng tôi là điều trị (200, 600, 1000 mg lincomycin;không được điều trị; "và điều trị đường), sốngày sau khi điều trị (một, 4, 7),và thời gian của năm (theo mùa). Cho các phân tích, khác nhau lặp đi lặp lại các biện pháp hiệp phương saicấu trúc được ước tính, với các thuộc địa nhưCác biện pháp lặp đi lặp lại. Một cấu trúc hợp chất đối xứng hiệp phương sai được ưa thíchvề các biện pháp AIC lẫn BIC (xem SASViện, 1997). Điện phân tích được thực hiện bằng cách sử dụng các mô-đun lặp đi lặp lại các biện pháp của phần mềm năm 2000 Pass (đèo, 2000).2.2.4.2. ấu trùngTỷ lệ của ấu trùng niêm phong bảyngày sau điều trị tương đối so với số lượngẤu trùng ăn đầu tiên đánh dấu được chuyển bằng cách sử dụngmột biến đổi tiêu chuẩn arcsine (Sin-1(bậc hai của Y)). Một ANOVA tỷ lệ chuyển đổi chạy bằng cách sử dụng ProcHỗn hợp (SAS, 1997). Chúng tôi biến độc lập đã là điều trị (200, 600, 1000 mglincomycin; không được điều trị; và điều trị đường)và thời gian của năm (theo mùa, tức là bắt đầu,Trung và kết thúc của nghiên cứu). Như với người lớn,chúng tôi sử dụng một hợp chất lặp đi lặp lại các biện phápcấu trúc đối xứng hiệp phương sai, với thuộc địanhư các biện pháp lặp đi lặp lại. 2.3. lĩnh vực hiệu quả2.3.1. thuộc địa và phương pháp điều trịMột apiary cách ly được thành lập nămPennsville NJ, bao gồm 19 thuộc địavới AFB có thể nhìn thấy. Các thuộc địa đãtrước đây được điều trị bởi chủ sở hữu vớiTerramycin ® patties trước đó trong năm, nhưngvẫn đề kháng với điều trị. Lược mẫu từ tất cả các thuộc địa đã sau đókiểm tra trong Beltsville MD bởi đĩa phổ biếnvà chỉ định ấu trùng kháng P.. Thuộc địa đã được ghi như của mức độbệnh tương tự để Hitchcock et al. (1970).Bệnh được coi là "ánh sáng", nếu ít hơnhơn 10 bệnh tế bào một thuộc địatìm thấy; Các tế bào bệnh "vừa phải", nếu 11-100một thuộc địa đã được tìm thấy; và nếu "nghiêm trọng",lớn hơn 100 tế bào bệnh đã được tìm thấymột thuộc địa. Dựa trên điều này hệ thống,bốn thuộc địa được coi là "ánh sáng", sáuthuộc địa "trung bình", và chín, "nghiêm trọng".Thuộc địa đã phủi bụi với lincomycin trong20 g confectioners đường ba lần,một tuần apart, liều lượng của một trong hai 100 mg,thành phần hoạt động 200 mg hoặc 400 mg mỗiứng dụng. Điều này đại diện cho liều được nhắm mục tiêu(200 mg), và bổ sung liều (một nửaliều được nhắm mục tiêu và hai lần các được nhắm mục tiêuliều) theo yêu cầu của FDA kháng sinh hiệu quả nghiên cứu. Tôi trình bày các liều cá nhân tổ chức cho các thuộc địa trong bảngnghiên cứu của chúng tôi. Thuộc địa đã được ghi lại vớiliên quan đến đánh giá bệnh của họ trước khi cácThứ ba điều trị và sau đó đánh giá45-days after the third treatment. Colonies inwhich there were no visible signs of newdisease at this time were considered recovered. 2.3.2. Data analysisThe number of colonies rated as either“diseased” or “recovered” (no disease) at the beginning and end of the study was analyzed using a 2 × 2 contingency table andchi-square.

Kết quả (Việt) 2:

Lincomycin hydrochloride được mua
thương mại như là Lincomix® hòa tan bột
(Pharmacia & Upjohn, Kalamazoo MI). Tất cả các
phương pháp điều trị kháng sinh đã được chuẩn bị như một bụi
trong 20 g bánh kẹo đường, và được áp dụng
trên thanh trên cùng của khung hình trong các ấp
buồng. Chúng tôi đã chọn 200 mg lincomycin
áp dụng ba lần, một tuần ngoài, như chúng tôi
chế độ liều và điều trị nhắm mục tiêu, tương ứng. Sự lựa chọn của 200 mg lincomycin
được dựa trên xét ​​nghiệm vi sinh vật trong
đó khu so sánh được của sự ức chế đã được
quan sát thấy giữa lincomycin và OTC
(Kochansky et al., 2001). Việc điều trị
chế độ tương tự như đang sử dụng cho
bụi OTC, và kết quả trong một tổng phơi bầy 600 mg kháng sinh.
2.2. Nhắm mục tiêu an toàn động vật
2.2.1. Thuộc địa và phương pháp điều trị
Hai mươi thuộc địa queenright không có dấu hiệu của bệnh tật và không chứa
dư mật ong đã được duy trì trong 2 tầng,
10 khung hình tổ ong Langstroth tại Beltsville MD.
Chúng tôi chọn 200 mg lincomycin là liều nhắm mục tiêu của chúng tôi, nhưng cũng đã kiểm tra liều cao
(600 mg = 3X 1000 mg = 5X) cấp độc hại
cho ong để thực hiện yêu cầu FDA cho an toàn động vật mục tiêu. Do đó, các thuộc địa bị
chia ngẫu nhiên thành năm điều trị
nhóm, gồm (1) kiểm soát không được điều trị
(không có đường, không có ma túy); (2) đường được điều trị kiểm soát
(không dùng thuốc); (3) 200 mg lincomycin hydroclorid; (4) 600 mg lincomycin hydroclorid; và (5) 1000 mg lincomycin hydroclorid. Mỗi nhóm được điều trị (2-5) đã nhận được một
ứng dụng mỗi bảy ngày, cho đến khi tổng
số chín ứng dụng đã được thực hiện. Điều này thể hiện ba lần những gì chúng ta sẽ xem xét
một chế độ điều trị bình thường, nhưng đã được bao gồm
để đáp ứng quản lý Thực phẩm và Dược phẩm
(FDA) yêu cầu về an toàn động vật mục tiêu.
Nghiên cứu bắt đầu vào ngày 20 Tháng Bảy năm 2000 và đã
chấm dứt 68 ngày sau ngày 25 tháng Chín,
2000 .
2.2.2. Giám sát tỷ lệ tử vong lớn
thuộc địa kiểm tra được duy trì trên một bệ bê tông, và một khu vực (0.25 m2) tại mỗi
lối thuộc địa đã được đánh dấu bằng không thể xóa nhòa
chì màu. Ong trưởng thành chết trong các khu vực được đánh dấu
đã được ghi lại trong một ngày, bốn ngày và sevendays sau mỗi điều trị trong suốt thời gian
nghiên cứu. Sau mỗi lần ghi âm, ong chết
được loại bỏ khỏi các khu vực được đánh dấu. Trong
nghiên cứu này, sự hiện diện của bố mẹ chưa trưởng thành
đã được sử dụng như một dấu hiệu của một đặt khả thi
nữ hoàng. Vào cuối của cuộc nghiên cứu, nữ hoàng
đã được quan sát trực quan.
2.2.3. Giám sát tỷ lệ tử vong của ấu trùng
hai khu vực (100 tế bào mỗi;. Khoảng 25 cm2
mỗi) trên một khung có chứa ấu trùng ong được
đánh dấu trong mỗi thuộc địa ngay lập tức trước khi
548 MF Feldlaufer et al.
Điều trị đầu tiên, thứ tư và thứ tám. Các
số ấu trùng trong mỗi khu vực đã được ghi nhận
và bảy ngày sau điều trị, số lượng
của các tế bào giới hạn trong từng khu vực được sử dụng như một
biện pháp độc với ong ấu trùng. Mười tám
ngày sau điều trị, khu vực được đánh dấu đã được
kiểm tra cho trường mới nổi / nổi lên bố mẹ. Do
một sự khan hiếm của phấn hoa và mật hoa, tất cả các thuộc địa
được cho ăn bốn lít xi-rô đường (đường: nước;
2: 1) và được hưởng một 300 g phấn patty
(phấn hoa: đường; 4: 1) hai tuần trước khi
điều trị thứ tám , để đảm bảo bố mẹ chưa trưởng thành
cho phần cuối cùng của độc ấu trùng
nghiên cứu.
2.2.4. Phân tích dữ liệu
2.2.4.1. Người lớn
Counts ong chết người lớn Biểu tượng cảm xúc như đã
biến đổi sử dụng log (Y + 1) để loại bỏ các
phụ thuộc của phương sai về giá trị trung bình.
ANOVA về tội chuyển được
tiến hành bằng cách sử dụng Proc hỗn hợp (SAS Institute,
1997). Biến độc lập của chúng tôi là xử lý (200, 600, 1000 mg lincomycin;
không được điều trị; và đường được điều trị), số
ngày sau khi điều trị (một, bốn, bảy),
và lúc nào trong năm (theo mùa). Đối với những phân tích này, các biện pháp lặp đi lặp lại phương sai khác nhau
cấu trúc đã được ước tính, với thuộc địa như
các biện pháp lặp đi lặp lại. Một cấu trúc hiệp phương sai đối xứng hợp chất đã được ưa thích
trên cả AIC và các biện pháp BIC (xem SAS
Institute, 1997). Phân tích năng lượng được thực hiện bằng cách sử dụng các biện pháp lặp đi lặp lại mô-đun của phần mềm đèo 2000 (Pass, 2000).
2.2.4.2. Ấu trùng
Tỷ lệ ấu trùng kín bảy
ngày sau điều trị so với số lượng
ấu trùng ban đầu được đánh dấu đã được chuyển đổi bằng cách sử dụng
một chuyển đổi arcsine chuẩn (sin-1
(căn bậc hai của Y)). An ANOVA về tỷ lệ chuyển đổi được chạy bằng cách sử dụng Proc
hỗn hợp (SAS, 1997). Biến độc lập của chúng tôi là xử lý (200, 600, 1000 mg
lincomycin; không được điều trị; và đường được điều trị)
và thời gian của năm (theo mùa, tức là đầu,
giữa và cuối của nghiên cứu). Như với người lớn,
chúng tôi sử dụng một hợp chất lặp đi lặp lại các biện pháp
cơ cấu đối xứng hiệp phương sai, với thuộc địa
là biện pháp lặp đi lặp lại.
2.3. Hiệu quả lĩnh vực
2.3.1. Thuộc địa và phương pháp điều trị
Một nhà nuôi ong kiểm dịch được thành lập vào
Pennsville NJ, gồm 19 thuộc địa
với AFB nhìn thấy được. Những đàn được
điều trị trước đó của chủ sở hữu với
Terramycin® chả hồi đầu năm, nhưng
vẫn kháng điều trị. Mẫu Comb từ tất cả các thuộc địa sau đó đã được
thử nghiệm tại Beltsville MD bằng đĩa khuếch tán
và chỉ P. ấu trùng kháng thuốc.
Colonies được ghi như mức độ của họ về
bệnh tương tự như Hitchcock et al. . (1970)
Căn bệnh này được coi là "ánh sáng", nếu ít
hơn 10 tế bào bị bệnh mỗi thuộc địa đã được
tìm thấy; "Vừa phải", nếu 11-100 tế bào bị bệnh
mỗi thuộc địa đã được tìm thấy; và "nghiêm trọng", nếu
lớn hơn 100 tế bào bị bệnh đã được tìm thấy
trong một thuộc địa. Dựa trên hệ thống chấm điểm này,
bốn thuộc địa bị coi là "ánh sáng", sáu
thuộc địa "vừa phải", và chín, "nghiêm trọng".
Colonies được rắc lincomycin trong
20 g bánh kẹo đường ba lần,
một tuần ngoài, ở liều hoặc 100 mg ,
200 mg hoặc 400 mg hoạt chất cho mỗi
ứng dụng. Điều này thể hiện sự liều nhắm mục tiêu
(200 mg), và liều lượng bổ sung (một nửa
liều nhắm mục tiêu và gấp đôi mục tiêu
liều) theo yêu cầu của FDA cho các nghiên cứu hiệu quả kháng sinh. Bảng I trình bày các liều cá nhân dùng cho các thuộc địa trong
nghiên cứu của chúng tôi. Thuộc địa đã được tái ghi bàn bằng
về giá được bệnh của mình trước khi
điều trị thứ ba và sau đó đánh giá
45 ngày, sau khi điều trị thứ ba. Thuộc địa ở
đó không có dấu hiệu mới
bệnh tại thời điểm này đã được xem xét thu hồi.
2.3.2. Phân tích số liệu
Các số khuẩn lạc được đánh giá là một trong hai
"bệnh" hay "phục hồi" (không có bệnh) khi bắt đầu và kết thúc nghiên cứu được phân tích bằng cách sử dụng một bảng 2 × 2 phòng và
chi-vuông.