Methods and MaterialsInsect Rearing

Methods and Materials

Insect Rearing Echinothrips americanus were from labora- tory cultures maintained at the University of Halle, Germany (at 23 ± 1 °C, RH 60 ± 10 %, and a 16:8 h L:D photoperiod, with lights on 6:00 a.m. CET). Phaseolus vulgaris and Gossypium sp. were used as host plants.
To obtain virgin females and males, pupae were collected from the laboratory culture and reared individually in 12-well Greiner plates (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA), with each well part-filled with 1.5 ml of 1.4 % (w/v) agar and with a leaf disc of P. vulgaris placed on the surface of the agar. Plates were covered with a glass sheet and sealed with Parafilm M © (Pechiney Plastic Packaging, Chicago, IL, USA). Plates were kept in a climate chamber under the same conditions as the main culture.

Gas Chromatography/Mass Spectrometry (GC/MS) Analysis Virgin males, virgin females, mated males, and mat- ed females were analyzed by GC/MS. Individuals were ma- nipulated with ethanol-cleaned insect pins and razor blades to avoid contamination. For the analysis, 50 thrips per sample were pooled and extracted in 100 μl distilled methanol or, alternatively in 2-methoxy-2-methylpropane ((MTBE; Sigma-Aldrich) to determine whether any contaminants were produced by reaction with the solvent. Pooling was necessary because of the small size of the animals and the small amount of chemicals they produced. Preliminary tests showed the most distinct peaks when using 50 individuals per sample. Extracts comprised ei- ther whole insects or dissected tissue, in which the head-thorax and abdomen were extracted separately. For coupled GC/MS, 10 μl samples were injected into a Shimadzu GCMS-QP2010 that was operated in electron im- pact ionization mode at 70 eV.

Kết quả (Việt) 1:

Phương pháp và tài liệuCôn trùng nuôi Echinothrips americanus từ các nền văn hóa labora-tory duy trì ở Đại học Halle, Đức (lúc 23 ± 1 ° C, RH 60 ± 10%, và một photoperiod L:D 16:8 h, với đèn vào 06:00:00 CET). Phaseolus vulgaris và bông sp. được sử dụng như là máy chủ lưu trữ vật.Để có được các trinh nữ và nam giới, nhộng được thu thập từ các nền văn hóa của phòng thí nghiệm và nuôi riêng năm 12-cũng Greiner tấm (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, Hoa Kỳ), với mỗi cũng một phần đầy với 1.5 ml agar 1,4% (w/v) và với đĩa lá, P. vulgaris, được đặt trên bề mặt agar. Tấm đã được che phủ bằng một tấm kính và niêm phong với Parafilm M © (bao bì nhựa Pechiney, Chicago, IL, Hoa Kỳ). Tấm được giữ trong buồng khí hậu theo các điều kiện tương tự như chính nền văn hóa.Nam giới trinh phân tích sắc ký khí/Mass Spectrometry (GC/MS), trinh nữ, mated nam giới, và mat-ed nữ được phân tích bởi các cá nhân GC/MS. là ma-nipulated với ethanol làm sạch côn trùng chân và lưỡi dao cạo để tránh ô nhiễm. Phân tích, 50 thrips mỗi mẫu được gộp lại và chiết xuất trong 100 μl cất methanol hoặc cách khác trong 2-methoxy-2-methylpropane ((MTBE; Sigma-Aldrich) để xác định cho dù bất kỳ chất gây ô nhiễm được sản xuất bằng phản ứng với dung môi. Tổng hợp là cần thiết bởi vì kích thước nhỏ của các loài động vật và số lượng nhỏ các hóa chất họ sản xuất. Các xét nghiệm sơ bộ đã cho thấy các đỉnh núi khác biệt nhất khi sử dụng 50 cá cho mỗi mẫu. Chất chiết xuất từ bao gồm ei-có cả côn trùng hay chia cắt mô, trong đó đầu ngực và bụng đã được tách ra riêng. Cho cùng GC/MS, 10 μl mẫu đã được tiêm vào một Shimadzu GCMS-QP2010 được sử dụng trong chế độ ion hóa điện tử im-Hiệp ước tại 70 eV.

Kết quả (Việt) 2:

Các phương pháp và vật liệu côn trùng nuôi Echinothrips americanus là từ các nền văn hóa thổ labora- duy trì ở Đại học Halle, Đức (ở 23 ± 1 ° C, RH 60 ± 10%, và 16: 8 h L: D gian chiếu sáng, các bóng đèn trên 6 : 12:00 CET). Phaseolus vulgaris và Gossypium sp. được sử dụng như là cây chủ. Để có được cái trinh nữ và nam giới, nhộng đã được thu thập từ các nền văn hóa trong phòng thí nghiệm và nuôi riêng ở 12 giếng Greiner tấm (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA), với mỗi cũng bán đầy 1,5 ml 1,4% (w / v) và agar với một đĩa lá của P. vulgaris đặt trên bề mặt của thạch. Tấm được bao phủ bằng một tấm kính và được gắn vào với Parafilm M © (Pechiney nhựa bao bì, Chicago, IL, USA). Các đĩa được giữ trong một buồng khí hậu theo các điều kiện tương tự như các nền văn hóa chính. Sắc ký khí / khối phổ (GC / MS) Phân tích Trinh nam, nữ đồng trinh, giao phối con đực và con cái ed mat- được phân tích bằng GC / MS. Cá nhân được ma- nipulated với chân côn trùng ethanol làm sạch và lưỡi dao cạo để tránh ô nhiễm. Đối với phân tích, 50 bọ trĩ mỗi mẫu được gộp chung và chiết xuất trong 100 ml cất methanol hoặc, cách khác trong 2-methoxy-2-metylpropan ((MTBE;. Sigma-Aldrich) để xác định xem có bất kỳ chất gây ô nhiễm đã được sản xuất bằng phản ứng với dung môi Pooling là cần thiết vì kích thước nhỏ của các loài động vật và số lượng nhỏ hoá chất mà họ sản xuất. kiểm tra sơ bộ cho thấy các đỉnh núi khác biệt nhất khi sử dụng 50 cá nhân cho mỗi mẫu. chất chiết xuất gồm ei- ther cả côn trùng hoặc mô mổ xẻ, trong đó người đứng đầu-ngực và bụng được trích xuất riêng. Đối với GC cùng / MS, 10 mẫu ml đã được tiêm vào một Shimadzu GCMS-QP2010 đã được vận hành trong chế độ electron ion hóa hiệp ước trọng ở 70 eV.