NHẬN DẠNG của các vi khuẩn GÂY bông
bạc lá GẠO TRÊN LOUISIANA Một luận án Nộp cho tốt nghiệp khoa của Đại học bang Louisiana và Đại học Nông nghiệp và Cơ Trong thực hiện một phần của yêu cầu đối với mức độ Thạc sĩ Khoa học trong Bộ bệnh học thực vật và sinh lý học cây trồng By Xianglong Yuan BS, Đại học Liêu Ninh, 1985 MS, Đại học Nông nghiệp Thẩm Dương, 1990 Tháng 5 năm 2004 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành của tôi để bác sĩ MC Rush, cố vấn của tôi, để cho tôi cơ hội này để theo đuổi học cao học tại Khoa Nhà máy Bệnh học và sinh lý học cây trồng tại Đại học bang Louisiana. Đó là Tiến sĩ Rush đã dẫn tôi bước vào thế giới của bệnh cây, mở rộng tầm nhìn của tôi trong giới học thuật. Tôi xin chân thành đánh giá cao sự hướng dẫn của ông, tư vấn, hiểu biết, và sự kiên nhẫn của tôi trong suốt thời gian học tập tại đây, đặc biệt là trong công tác nghiên cứu và viết. Thái độ làm việc của ông sẽ nhất thiết phải là một ngọn hải đăng chiếu sáng hành trình tương lai của tôi. Tôi đánh giá rất cao sự giúp đỡ Tiến sĩ AKM Shahjahan trong suốt nghiên cứu của tôi nỗ lực. Hào phóng, hướng dẫn bệnh nhân của mình trong nghiên cứu trong phòng thí nghiệm của tôi, và nhiều người tuyệt vời của mình lời đề nghị được thực hiện trong 2,5 năm qua đã giúp các nỗ lực nghiên cứu của tôi rất nhiều. cảm ơn đặc biệt đến các thành viên ủy ban của tôi, Tiến sĩ DE Groth, tiến sĩ SD Linscombe, và Tiến sĩ JP Jones cho những đề xuất về tiến hành nghiên cứu và viết luận án của tôi. Đó là ảnh hưởng của họ mà rất nhiều cảm hứng cho tôi trong việc phát triển luận án của tôi. Tôi xác nhận tất cả các sinh viên Trung Quốc đã giúp tôi tại trường đại học này. Họ hỗ trợ tuyệt vời và hào phóng đã giúp tôi vượt qua nhiều khó khăn trong cuộc sống của tôi và trong quá trình học của tôi ở Baton Rouge, LA. Việc đánh giá chân thành nhất thuộc về mẹ và cha tôi. Khuyến khích, họ tình yêu và chăm sóc chính là nguồn gốc chính của quyền lực nhắc nhở tôi phải hoàn thành luận án này. Tôi cũng bày tỏ lòng biết ơn đến các thành viên khác trong gia đình của mình để hỗ trợ hào phóng của họ. MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ........... .................................................. .................... 1 GIỚI THIỆU VÀ NGHIÊN CỨU ................. 1 1.1 Phân bố bệnh và tầm quan trọng kinh tế .................... ................ 1 1.2 Các triệu chứng dịch tễ ............................. ................................... 3 1.2.1 Các triệu chứng .......... .................................................. ................... 3 1.2.2 Dịch tễ học .......................... ................................................ 5 1.3 Phương pháp phát hiện và xác định vi khuẩn gây bệnh cho trên lúa Phân loại, danh mục, và đặc điểm bệnh lý của Pseudomonas và liên quan Genera ...................................... ................... 8 1.4.1 Phân loại và danh mục ........................ ..................... 8 1.4.2 Đặc điểm của Burkholderia spp ..................... .................... 9 1.4.2.1 B. glumae ....................... .............................................. 9 1.4.2.2 B. Plantarii ............................................... .................. 10 1.4.2.3 Các B. gladioli và B. cepacia Complex ................... 10 1.4.2.4 P. fuscovaginae, P. syringae, Acidovorax avenae (P. avenae) ............................... ............................................ 11 1.5 Kiểm soát dịch bệnh ................................................ .................................... 13 1.6.1 Kiểm soát hóa chất ........ .................................................. ........ 13 1.6.2 Kiểm soát sinh học .................................... ............................. 13 1.6.3 Phát triển Giống cây kháng và dòng dùng Di truyền và Công nghệ sinh học Kỹ thuật ....... ................................ 13 CHƯƠNG 2: Phân loại, NHẬN DẠNG VÀ gây bệnh của VI KHUẨN LIÊN QUAN bông bạc lá TRÊN gạo .................................................. .......................... 15 2.1 Vật liệu và phương pháp ................... .................................................. .... 15 2.1.1 Thanh lọc chủng ....................................... ...................... 15 2.1.2 Xác định các chủng Sử dụng BiologTM GN2 Hệ thống Microplate ............... .................................................. ........... 16 2.1.3 Nhà máy Vật liệu ................................. ........................................ 17 2.1.4 Các xét nghiệm lây bệnh nhân ............ ..................... ....... ............... 17 2.1.5 Chức năng Phân loại các chủng xác định ........... ...... 21 2.2 Kết quả và thảo luận ....................................... ................................ 22 2.2.1 lọc và xác định các chủng với hệ thống BiologTM GN2 .... .................................................. .............. 22 2.2.2 Các xét nghiệm lây bệnh nhân và triệu chứng được sản xuất ......................... 38 2.2 0,3 Colony và Văn Hóa Đặc điểm của các vi khuẩn mầm bệnh ........................................ .................................................. 47 2.2.4 Clustering của vi khuẩn chủng cách ly từ gạo Xếp bông Blight vào nhóm chức năng .............................. 50 iii 2.3 Tóm tắt và kết luận ............................................... ................... 56 LIỆU trích dẫn ............................ .................................................. ........ 61 PHỤ LỤC: CÁC TÀI LIỆU THAM KHẢO LIÊN QUAN v TÓM TẮT Bốn trăm hai chủng vi khuẩn được phân lập trên S-PG bán cụ thể trung bình từ các mô lúa bị bệnh có triệu chứng của bông blighting. Những phân lập được tinh sạch bằng cách sử dụng pha loãng trong nước vô trùng và replating trên S-PG trung bình. Tổng cộng có 420 chủng duy nhất thu được. Những phân lập đã phải chịu kiểm tra khả năng gây bệnh trên lúa (Oryza sativa L. cv. Cypress). Dựa trên những thử nghiệm này, 339 chủng phân lập được sử dụng trong BiologTM kiểm tra và xác định đến mức loài. Chủng vi khuẩn từ 39 loài trong 16 chi đã được xác định, bao gồm 52 phân lập đại diện cho 15 loài Pseudomonas và 261 phân lập đại diện cho sáu loài Burkholderia. Các 26 phân lập còn lại bao gồm 14 chi khác. Trong số 261 chủng Burkholderia, 103 phân lập được B. gladioli, 68 mẫu phân lập đều B. glumae, 60 mẫu phân lập đều B. multivorans, 25 chủng phân lập được B. plantarii, ba chủng là B.cocovenenans và ba chủng là B. vietnamiensis. Các bài kiểm tra khả năng gây bệnh cho thấy 69% hoặc 234/339 chủng gây ra nhiễm trùng cây con, thối bẹ, và / hoặc bông blighting. Hầu hết các chủng gây bệnh là ở các chi Burkholderia và Pseudomonas. Bốn loài phổ biến nhất, B. glumae, B. gladioli, B. multivorans, và B. plantarii, bao gồm 90% của tất cả các vi khuẩn gây bệnh, cho thấy một phức tạp của loài Burkholderia đã gây ra những bông bạc lá / vỏ bọc hội chứng thối gần đây được tìm thấy ở bang Louisiana. Năm Pseudomonas loài, với tổng số 16 phân lập, đã được tìm thấy sẽ được liên kết với bệnh này, bao gồm hai phân lập P. syringae pv zizanize, ba phân lập P. fluorescens, ba phân lập P. pyrrocinia, một cô lập của P. và spinosa bảy phân lập P. tolaasii. Các triệu chứng của bệnh trên lúa chỉ được sản xuất bởi các chủng vi khuẩn có chỉ định. Các triệu chứng bao gồm lãi không tổn thương nâu lá cờ vỏ, thối hạt, hoa con vô trùng, ngũ cốc đổi màu, lá và bệnh thối bẹ trên cây được lây bệnh. Đó là không thể phân biệt giữa các loài Burkholderia dựa trên các triệu chứng và thuộc địa hình thái. chủng gây bệnh Burkholderia sản xuất sắc tố màu vàng trong môi trường King B. chủng avirulent không sản xuất sắc tố này. Các phân lập từ gạo đã được nhóm lại theo các loài và khả năng gây bệnh. Dường như B. glumae và B. gladioli là hầu hết các loài gây bệnh phổ biến. CHƯƠNG 1 GIỚI THIỆU VÀ NGHIÊN CỨU 1.1 Phân bố bệnh và tầm quan trọng kinh tế bông blighting đã là một vấn đề thường xuyên quan trọng trong gạo miền nam khu vực sản xuất của Hoa Kỳ trong nhiều năm . Một căn bệnh tương tự như được gọi là "tai bạc lá", gạo pecky, hoặc đổi màu hạt đã được quy cho các đại lý nhân quả nấm (Lee, 1992a; Lee, 1992b). Vấn đề này được đặc trưng bởi sự đổi màu của ngũ cốc và các chi nhánh bông, thường là với các tổn thương khác nhau, và nhiều loại nấm đã được mô tả là gây ra căn bệnh này (Atkins, 1974; Ou, 1985; Lee, 1992b). Một triệu chứng thường được gọi là "bông tai họa" đã được quan sát thấy trong nhiều năm
đang được dịch, vui lòng đợi..