HIV Antibody Testing at HUPHIV bloo

HIV Antibody Testing at HUP

HIV blood antibody testing is used to diagnose HIV infection by using a two to three-tiered testing protocol. First, a 4th generation screening test for HIV-1and 2 antibodies, and p24 antigen is performed, using a chemiluminescent microparticle immunoassay (CMIA) (Abbott HIV Ag/Ab Combo Assay performed on the Abbott Architect instrument), or a 3rd generation immunochromatographic card (Trinity Biotech Unigold) assay is used. If positive, then a second test is done, using a rapid immunoconcentrating assay (Biorad Multispot). The Multispot assay replaces the previously used immunoblot ( "Western" blot). If both the screening test and the Multispot test are positive, then the overall test result is termed positive. The Multispot assay can differentiate between HIV-1 and HIV-2 antibodies, something not possible with the prior Western blot assay. If the Multispot assay is negative or indeterminate then a "deal breaker" nucleic acid amplification ("HIV confirmatory viral load") assay must be performed to determine the final result.

Tiered testing is performed with two goals in mind, to detect all those who have HIV antibody, and to reduce as much as possible the chance of falsely-concluding that HIV antibodies are present when they in fact are not. The screening tests are highly sensitive and specific in but still can lead to many false-positive tests depending on the chances of the test population being HIV infected, and false-negative tests in very early infection (see graphs below). When a second test is performed on EIA-positive specimens, the combination of both tests being positive is very specific. When BOTH the screening and Multispot assays are positive, the chances of a false-positive test are exceptionally low, with a specificity of 100% (95% CI 99.08 to 100). The nucleic acid amplification test is performed when the screening test is positive and the Multispot assay is negative or indeterminate because patients with very early HIV infection can have a positive Architect HIV Ab/Ag screening assay up to two weeks before the Multispot assay becomes positive (see below for details). The Unigold assays are less able to detect very early HIV infection, detecting positives about two to three weeks after the Architect HIV Ag/Ab test first becomes positive, and about the same time or up to five days after the Multispot assay becomes positive (see schematic of HIV diagnostic time line below and graph showing test sensitivities in very early HIV infection).











EIA test

Two types of HIV screening assays are used at HUP, the Abbott HIV Ab/Ag combo assay and the Trinity Biotech Uni-Gold Recombigen HIV-1/2 immunochromatographic card assay. The Abbott 4th generation HIV1 + HIV2 + p24 antigen assay uses recombinant antigens and synthetic peptides derived from the HIV transmembrane gp41 proteins of HIV-1 group M and O and gp36 of HIV-2 for antibody detection, and anti-p24 monoclonal antibody for antigen detection. The Abbott test is performed using the Abbott Architect autoanalyzer. The Abbott assay is performed five days per week, M-F, and is the routine screening assay performed except in special circumstances. Fourth generation HIV1/2 tests detect HIV IgM and IgG antibodies and p24 antigen, and have the potential to diagnose acute HIV infection as early as after two weeks of infection, and within a few days of the first onset of symptoms.The Uni-Gold test is a 3rd generation test. The Uni-Gold card test is performed by the Clinical Microbiology Laboratory only for the following emergency situations: needle-stick incidents in staff and students being seen by Occupational Health, for emergent listing of solid-organ transplant patients, and in previously untested women in labor ("walk-ins"); this test is available seven days per week with a short (hours) turn-around-time. Both screening tests have nearly equivalent sensitivity and specificity for established HIV-1 infection, but vary in sensitivity for very recent infection (see above figure and linked publication). Because the 4th generation assay measures both antigen and antibody, it is possible that the test could be initially positive in acute infection and then become negative during the period when the antigen load decreases but before antibody is made. The Abbott HIV Ab/Ag assay gives a composite result for the antigen and antibody components, with a positive result meaning only antigen detected, only antibody detected, or both analytes detected. The Uni-Gold test gives either a positive or negative visually read result, whereas the Abbott assay result is read by an instrument. Uni-Gold positive tests are retested later using the Abbott assay, but a confirmatory immunoassay is done on all Uni-Gold positive sera regardless of the Abbott result. The Abbott assay was introduced into service at HUP in mid-2014. .The Abbott assay is very sensitive, detects both HIV1 and HIV2, and in limited studies also detects HIV-O infectio

Kết quả (Việt) 2:

HIV kháng thể kiểm tra tại HUP

xét nghiệm kháng thể trong máu HIV được sử dụng để chẩn đoán nhiễm HIV bằng cách sử dụng một giao thức thử nghiệm 2-3 tầng. Đầu tiên, một xét nghiệm thế hệ thứ 4 trong 2 kháng thể HIV-1and, và kháng nguyên p24 được thực hiện, sử dụng một xét nghiệm miễn dịch microparticle chemiluminescent (CMIA) (Abbott HIV Ag / Ab Combo Khảo nghiệm thực hiện trên các công cụ Kiến trúc sư Abbott), hoặc thẻ miễn dịch thế hệ thứ 3 (Trinity Biotech Unigold) khảo nghiệm được sử dụng. Nếu dương tính, sau đó là một thử nghiệm thứ hai được thực hiện, sử dụng một thử nghiệm immunoconcentrating nhanh (BioRad Multispot). Các Multispot khảo nghiệm thay thế immunoblot sử dụng trước đó ( "Tây" blot). Nếu cả hai thử nghiệm sàng lọc và kiểm tra Multispot là tích cực, thì kết quả kiểm tra tổng thể được gọi là tích cực. Các Multispot khảo nghiệm có thể phân biệt giữa HIV-1 và HIV-2 kháng thể, một cái gì đó không thể với việc khảo nghiệm blot trước phương Tây. Nếu xét nghiệm Multispot là tiêu cực hay không xác định sau đó là một "thỏa thuận ngắt" khuếch đại acid nucleic ( "khẳng định tải lượng virus HIV") khảo nghiệm phải được thực hiện để xác định kết quả cuối cùng.

Kiểm tra theo lớp được thực hiện với hai mục tiêu trong tâm trí, để phát hiện tất cả những người có kháng thể HIV, và để giảm càng nhiều càng tốt các cơ hội của man-kết luận rằng các kháng thể HIV có mặt khi họ trên thực tế thì không. Các xét nghiệm sàng lọc rất nhạy cảm và cụ thể trong nhưng vẫn có thể dẫn đến nhiều xét nghiệm dương tính giả tùy thuộc vào cơ hội của các dân kiểm tra là bị nhiễm HIV, và các xét nghiệm âm tính giả ở bệnh rất sớm (xem biểu đồ dưới đây). Khi một thử nghiệm thứ hai được thực hiện trên các mẫu EIA dương tính, sự kết hợp của cả hai xét nghiệm là dương tính là rất cụ thể. Khi cả hai việc sàng lọc và xét nghiệm Multispot là tích cực, cơ hội của một thử nghiệm dương tính giả là đặc biệt thấp, với độ đặc hiệu 100% (95% CI 99,08-100). Các thử nghiệm khuếch đại acid nucleic được thực hiện khi xét nghiệm là dương và khảo nghiệm Multispot là tiêu cực hay không xác định vì các bệnh nhân nhiễm HIV rất sớm có thể có một kiến trúc sư có HIV Ab / ​​Ag sàng lọc xét nghiệm lên đến hai tuần trước khi thử nghiệm Multispot trở nên tích cực ( xem dưới đây để biết chi tiết). Các xét nghiệm Unigold ít có khả năng phát hiện nhiễm HIV rất sớm, phát hiện tích cực về 2-3 tuần sau khi kiến trúc sư HIV Ag / Ab thử nghiệm đầu tiên trở nên tích cực, và khoảng thời gian tương tự hoặc lên đến năm ngày sau khi khảo nghiệm Multispot trở nên tích cực (xem sơ đồ của HIV dòng thời gian chẩn đoán dưới đây và đồ thị cho thấy sự nhạy cảm nghiệm trong nhiễm HIV rất sớm). nghiệm EIA Hai loại xét nghiệm sàng lọc HIV được sử dụng tại HUP, combo khảo nghiệm Abbott HIV Ab / ​​Ag và Trinity Biotech Uni-Gold Recombigen HIV 1/2 miễn dịch thẻ khảo nghiệm. Các Abbott thế hệ thứ 4 HIV1 + HIV2 + p24 antigen khảo nghiệm sử dụng kháng nguyên tái tổ hợp và peptide tổng hợp có nguồn gốc từ protein gp41 màng HIV HIV-1 nhóm M và O và gp36 của HIV-2 để phát hiện kháng thể và kháng nguyên p24 đơn dòng kháng thể đối với kháng nguyên nhận diện. Các thử nghiệm Abbott được thực hiện bằng cách sử dụng kiến trúc sư autoanalyzer Abbott. Các Abbott khảo nghiệm được thực hiện năm ngày mỗi tuần, MF, và là xét nghiệm tầm soát thường thực hiện, ngoại trừ trong trường hợp đặc biệt. Thế hệ thứ tư HIV1 / 2 bài kiểm tra phát hiện IgM và IgG HIV kháng thể và kháng nguyên p24, và có tiềm năng để chẩn đoán nhiễm HIV cấp càng sớm càng sau hai tuần bị nhiễm trùng, và trong vòng vài ngày sau khi khởi phát đầu tiên của symptoms.The Uni-Gold thử nghiệm là một thử nghiệm thế hệ thứ 3. Các thử nghiệm thẻ Uni-Gold được thực hiện bởi Phòng thí nghiệm Vi sinh lâm sàng chỉ cho các tình huống khẩn cấp sau đây: sự cố kim đâm vào nhân viên và sinh viên đang được nhìn thấy bởi sức khỏe nghề nghiệp, niêm yết nổi của bệnh nhân ghép rắn tạng, và ở phụ nữ trước đây chưa được kiểm tra trong lao động ( "walk-in"); kiểm tra này có sẵn bảy ngày mỗi tuần với một đoạn ngắn (giờ) lần lượt khoảng thời gian. Cả hai xét nghiệm sàng lọc có độ nhạy và độ đặc hiệu gần tương đương cho thành lập nhiễm HIV-1, nhưng khác nhau về độ nhạy cảm đối với nhiễm trùng rất gần đây (xem hình trên và xuất bản liên kết). Vì thế các biện pháp khảo nghiệm thứ 4 cả kháng nguyên và kháng thể, có thể là các thử nghiệm có thể là bước đầu tích cực trong nhiễm trùng cấp tính và sau đó trở thành tiêu cực trong giai đoạn này khi tải kháng nguyên giảm nhưng trước khi kháng thể được thực hiện. Các Abbott HIV Ab / ​​Ag xét nghiệm cho kết quả tổng hợp cho các thành phần kháng nguyên và kháng thể, với một kết quả tích cực có nghĩa là chỉ có kháng nguyên phát hiện, chỉ có kháng thể phát hiện, hoặc cả hai chất phân tích phát hiện. Các thử nghiệm Uni-Gold cho một trong hai kết quả đọc trực quan tích cực hay tiêu cực, trong khi kết quả xét nghiệm Abbott được đọc bởi một nhạc cụ. Uni-Gold xét nghiệm dương tính được kiểm tra lại sau khi sử dụng các xét nghiệm Abbott, nhưng miễn dịch xác định được thực hiện trên tất cả các Uni-Gold huyết thanh dương bất kể kết quả Abbott. Các Abbott khảo nghiệm đã được đưa vào phục vụ tại HUP vào giữa năm 2014. .Công Abbott khảo nghiệm là rất nhạy cảm, phát hiện cả hai HIV1 và HIV2, và trong các nghiên cứu hạn chế cũng phát hiện HIV-O infectio