PSS GENE GENOTYPING AND ASSOCIATION

PSS GENE GENOTYPING AND ASSOCIATIONS TO MEAT QUALITY
TRAITS IN A SWINE F2 POPULATION


1
G.O.
Band,

1
*S.E.F.
Guimarães,

1
P.S.
Lopes,

3
A.V.
Pires,

1
D.A.
Faria,

1
K.
M.

Silva,

2
A.
A.
Benevenuto
Júnior,

2
L.A.
M.
Gomide.



1
Animal
Science
Department
and

2
Food
Technology
Department,
UFV,
Viçosa,
MG,
Brasil,
CEP:

365712000,

3
FAESA
2Campus
II
2
Faculdade
de
Saúde,Rodovia
Serafim
Derenzi,
3115,São
Pedro,
Vitória,
ES,

CEP:
290302001

*Corresponding
author

Financial
Support:
FAPEMIG,
CNPq,
CAPES.





ABSTRACT


PSS
gene
is
a
major
gene
with
known
effects
in
commercial
herds,
affecting
important

traits
in
swine
production.
The
objective
of
this
work
was
to
evaluate
the
effects
of
PSS

gene
in
meat
quality
traits
in
a
F2
segregant
population,
produced
by
outbred
crossing

using
commercial
sows
(18)
and
Brazilian
native
boars
(2).
Genotypes
of
the
PSS
gene

were
obtained
for
596
F2
pigs
by
PCR2RFLP
technique.
Meat
quality
traits
were

evaluated
after
slaughter.
Among
the
596
animals,
493
animals
(82.72%)
were

characterized
as
NN
and
103
animals
(17.28%)
as
Nn.
Both
genotypes
didn’t
differ
for

pH
24
hours
after
slaughter
(5.71
vs.
5.70,
for
NN
and
Nn,
respectively),
intra

muscular
fat
(1.55%
vs.
1.65%
to
NN
and
Nn
animals),
objective
tenderness

(5551.60g/1.2cm
vs.
5506.60g/1.2cm
to
NN
and
Nn),
lightness
(44.96
vs.
45.01
to
NN

and
Nn),
hue
angle
(84,28
vs.
83,41
to
NN
and
Nn)
and
chroma
(6.68
vs.
6.73
to
NN

and
Nn).
However,
Nn
animals
presented
lower
results
(P

Kết quả (Việt) 1:

PSS GEN GEN VÀ HIỆP HỘI ĐỂ THỊT CHẤT LƯỢNG CÁC ĐẶC ĐIỂM TRONG MỘT F2 LỢN DÂN
1Ban nhạc G.O.,1* S.E.F. Guimarães,1PS Lopes,3Av. Pires,1D.A. Faria,1K. M.Silva,2A. A. Benevenuto Júnior,2L.A. M. Gomide.
1Sở khoa học động vật và2Phòng kỹ thuật thực phẩm, UFV, Viçosa, MG, Brasil, CEP:365712000,3FAESA 2Campus II 2 Faculdade de Saúde, Rodovia Serafim Derenzi, 3115, São Pedro, Vitória, ES,CEP: 290302001* Tương ứng tác giảHỗ trợ tài chính: FAPEMIG, CNPq, CAPES.

TÓM TẮT
PSS gen là một gen lớn với các hiệu ứng nổi tiếng từng đàn thương mại, ảnh hưởng đến quan trọngCác đặc điểm ở lợn sản xuất. mục tiêu của công việc này là để đánh giá các hiệu ứng của PSSgen trong những đặc điểm chất lượng thịt trong dân segregant F2, sản xuất bởi outbred quasử dụng thương mại lợn nái (18) và Brazil bản xứ heo (2). kiểu gen của gen PSSđã thu được cho 596 F2 lợn bởi PCR2RFLP kỹ thuật. đặc điểm chất lượng thịtđánh giá sau khi giết mổ. trong số 596 động vật, động vật 493 (82.72%) đãđặc trưng như NN và 103 động vật (17,28%) là Nn. cả hai kiểu gen không khác nhau chopH 24 giờ sau khi giết mổ (5,71 vs 5,70, NN và Nn, tương ứng), duyên hải bên trongcơ bắp chất béo (1,55% so với 1,65% đến động vật NN và Nn), dịu dàng khách quannhẹ nhàng (5551.60g/1.2cm vs 5506.60g/1.2cm NN và Nn), (44.96 so với 45.01 để NNvà Nn), Huế góc (84,28 vs 83,41 NN và Nn) và sắc màu (6.68 vs 6.73 để NNvà Nn). Tuy nhiên, động vật Nn trình bày kết quả thấp hơn (P < 0,05) cho độ pH 45 phútsau khi giết mổ (6,51 vs 6.41), cao nhỏ giọt (3,06% vs 3,92%), nấu ăn (32,50% vs.33,29%) và tất cả (34.01% so với 35,67%) thiệt hại. những kết quả này xác nhận rằng gen PSStàu sân bay hiện nay chất lượng kém thịt và rằng ngay cả trong Thánh giá khác nhau gen hiệu ứngđược áp dụng.
TỪ KHÓA:PSS hội chứng, PCR2RFLP, thịt chất lượng, lợn

GIỚI THIỆU
Do lựa chọn di truyền, lợn đã trở thành phát triển nhanh chóng, nhà sản xuất thịt nạc với caothực phẩm convertion. một số tiêu cực ảnh hưởng của ốm mhom, chẳng hạn như tăng căng thẳngtính nhạy cảm, dẫn đến một tình trạng chất lượng kém thịt đã được tìm thấy rấtthường xuyên. nó được biết đến mà tiêu cực tương quan di truyền giữa thịt chất lượng vàthịt heo nạc là đáng kể do PSS (hội chứng căng thẳng Porcine) gen. PSS bị ảnh hưởng lợntrình bày hyperthermia, khó thở, đỏ da tím và một phản ứng đánh dấu căng thẳng, vớingừng tim. sau khi giết mổ, những phát hiện bao gồm nhạt, mềm, exudative (PSE) thịt, cácvà phát triển nhanh chóng của rigor mortis. một trong những hậu quả chính PSE thịt làchất lượng kém của các sản phẩm, ví dụ, chữa khỏi sản phẩm làm từ PSE thịtcó một ròng tăng thấp hơn, do giảm nước đang nắm giữ năng lực, khi so sánh vớithông thường thịt. các khiếm khuyết trong PSS dễ bị động vật là một hypersensitive gating của cácCa2 + 2release kênh (ryanodine thụ-mã hóa bởi gen ryr1) của cơ xương sarcoplasmatic lưới, trong tình huống này, kênh mở được tạo điều kiện vàđóng cửa là ức chế.Phương pháp đầu tiên phát triển để phát hiện PSS dễ bị lợn là thách thức halothaneTest. sau khi những thách thức, con lợn phát triển cơ bắp cứng được chỉ định làm PSSdễ bị. Tuy nhiên, halothane thử nghiệm đã không thể phát hiện con hổ, vì vậy mộtThử nghiệm DNA đã được phát triển bởi FUJII et al., (1991) có trụ sở tại một so sánh trình tự đầy đủchiều dài ryadodine thụ thể cDNA từ một con lợn dễ bị PSS và một PSS bình thường lợn. cáctác giả tìm thấy một đa hình (thay thế của một C tại nucleotide 1843 từ các PSSđộng vật bình thường để một T trong cDNA từ PSS dễ bị một) mà có thểliên quan đến sự phát triển của hội chứng. những hậu quả của sự thay thế nàylà sự thay đổi theo trình tự axit amin từ một arginine ở vị trí của protein, 615, trong cácPSS bình thường, để một cysteine ở PSS dễ bị lợn.Mục tiêu của công trình này phân tích kiểu gen PSS bởi PCR2RFLP ở một F2segregant lợn dân, sản xuất bởi outbred vượt qua bằng cách sử dụng thương mại lợn nái vàBrazil bản xứ lợn và các kiểu gen thống kê liên kết đến một số thịt chất lượngđặc điểm đo sau khi giết mổ động vật F2.
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
DNA khai thác: trong điều tra này, máu được thu thập từ 596 F2 động vật tronggiết mổ. các loài động vật đã được sản xuất bởi outbred vượt qua bằng cách sử dụng thương mại lợn nái(18) và Brazil bản xứ heo (2). The F2 động vật đã lớn lên và tàn sát tại cácTrang trại chăn nuôi lợn, nằm ở động vật cho sở khoa học, đại học liên bang củaViçosa Viçosa, Minas Gerais State, Bra-xin. DNA được chiết xuất bởi clorua natrigiao thức. sau khi khai thác, DNA được định lượng ở phối (260 và 280 nm)và pha loãng trong 10 mM TRIS (pH 8,0) 2 1mM EDTA (pH 8,0) giải pháp để làm việc mộtnồng độ của 25 ng/NL và bảo tồn tại 4oC. các cổ phiếu DNA cũng được pha loãng trongGiải pháp TRIS2EDTA và duy trì ở 220oC.Phát hiện khuếch đại và đột biến gen PSS: mẫu DNA từ động vật F2đã được khuếch đại trong một MJ nghiên cứu PTC 100296 thermocycler (MJ nghiên cứu). cáckhuếch đại chương trình bao gồm các bước sau đây: denaturation tại 94oC, annelingnhiệt độ 64 oC, và nhánh lúc 72oC. chu kỳ này là lặp đi lặp lại lần 35. cácĐảng Cộng sản Romania phản ứng bao gồm 1U Taq DNA polymerase, 0.2 uM của mỗi dNTP, 20 mMTRIS2HCl (pH 8.3), 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, chất nền, mồi chuyển tiếp và đảo ngược 0.2 NM mỗi(chuyển tiếp 2 5' 2TCCAGTTTGCCACAGGTCCTACCA23' và đảo ngược-5'2TTCACCGGAGTGGAGTCTCTGAGT23', O'BRIEN et al., 1993), và 25 của gen DNAtrong một khối lượng 20NL. sự thành công của các phản ứng PCR được quan sát thấy ở 5% trang,màu với AgNO3 khi một mảnh bp (cặp cơ sở) 659 hình dung. cácCác đột biến gây bệnh của hội chứng PSS (C Þ T thay thế tại nucleotide 1843) làđược phát hiện bởi tiêu hóa các đoạn bp 659 với hạn chế enzyme BsiHKA tôi(New England Biolabs). sau khi tiêu hóa enzym, kiểu gen được bố trí như sau:màu lợn đột biến (nn) được đặc trưng bởi các mảnh vỡ lúc 358 bp,166 bp và 135 bp. cho động vật bình thường (NN), nó được quan sát thấy các ban nhạc tại 524 bp và135 bp. Heterozygote tàu sân bay (Nn) cho các đột biến trình bày ban nhạc tại 524 bp,358bp, 166 bp và 135 bp.Thịt chất lượng đặc điểm phân tích: trong thử nghiệm động vật F2 596 tàn sát tại 65 Kgtrọng lượng sống được phân tích cho các đặc điểm thịt sau: pH 45 phút (pH45) và pH24 giờ sau khi giết mổ (pHu), chất béo cơ bắp nội (IMF), nhỏ giọt mất (DL), nấu ăn mất mát(CL), tổng số thiệt hại (TL), mục tiêu đau (OT), nhẹ nhàng (L), đỏ (A), yellowness(B), Huế góc (h) và sắc màu (c). những phân tích được tiến hành tại khoa học thịtPhòng thí nghiệm, tại sở khoa học thực phẩm tại các chi tiết liên bang Đại học của Viçosa.có thể được tìm thấy tại BENEVENUTO Jr (2001). phân tích thống kê: thống kê phân tích cho Hiệp hội kiểu gen với thịt chất lượngđặc điểm đã được thực hiện bởi SAS PROC GLM hệ thống, theo các mô hình:
Yijkl = N + Gi Sj + Lk + eijklỞ đâu:Yijkl = quan sát tại các động vật;N = có nghĩa là dânGi = kiểu gen có hiệu lực tôi (NN hoặc Nn)SJ = quan hệ tình dục có hiệu lực j (1 = thiến tỷ e 2 = nữ)LK = lô có hiệu lực k (k = 1, 2, 3, 4 và 5)eijkl = lỗi ngẫu nhiênSự khác biệt giữa các kiểu gen đã được thử nghiệm bởi F kiểm tra tại 5%.
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
F2 động vật gen: tần số genotypic cho các loài động vật F2 phân tích 596 là493 (82.72%) bình thường homozygotes (NN) và 103 tàu sân bay heterozygotes (17,28%)(Nn). Không Lặn homozygotes (nn) đã được tìm thấy.Thịt chất lượng đặc điểm kết quả: đặc điểm phân tích pH45, DL, CL và TL cho thấy thống kêsự khác biệt giữa cả hai kiểu gen (bảng 1) tại 5% của xác suất. các giá trị chokiểu gen NN và Nn đã tương ứng: 6.51±0.26 và 6.41±0.26 cho pH45,3.06±1.68 và 3.92±1.68 cho DL, 32.50±2.54 và 33.29±2.54 cho CL và 35.67±2.67và 34.01±2.67 cho TL. như kiểu gen Nn trình bày các giá trị cao nhất cho DL, CL vàTL, nó có thể được xác nhận rằng n allelic biến thể có một tác động tiêu cực về chất lượng thịt,kể từ khi động vật Nn có một nước tồi tệ nhất khả năng giữ, đó là liên quan đến thấp hơnthịt pH và một mức độ cao của protein denaturation, và trong tình trạng này, tăngtrong nước giảm cân được quan sát thấy. mặc dù không có động vật màu đã được tìm thấy, có hiệu lực củagen PSS thịt lợn chất lượng đã được phát hiện, ngay cả trong segregant thử nghiệm nàydân số, xác nhận rằng gen này là một trong những quan trọng nhất ở lợn sản xuất.Một điểm quan trọng để xem xét trong việc phát triển một chiến lược cho việc sử dụng của PSSđột biến trong thương mại bầy là tác dụng bại hoại phong tục của nó trong thịt chất lượng, xác nhận bởicuộc điều tra hiện nay, đó là tiêu cực liên quan đến chuyển đổi thức ăn vàốm mhom. lợi nhuận tăng được tạo ra bởi nạc và nhanh chóng phát triển động vật có thể bị mấtNếu một chất lượng kém thịt được sản xuất, do đó, quyết định làm thế nào các đột biến PSS sẽđược sử dụng trong lựa chọn một chương trình có liên quan đến các mục tiêu của chương trình và đến cácquản lý điều kiện được cung cấp để những con lợn không chỉ ở các trang trại nhưng đặc biệt trong thời giangiao thông vận tải và giết mổ.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
BENEVENUTO Junior, A. A., 2001. Avaliação de rendimento de carcaça e de qualidadeda carne de suínos comerciais, de raça nativa e cruzados. Dissertação de mestrado, 93págs., Dep. de Tecnologia de Alimentos, UFV.
FUJII, J., OTSU, K., ZORZATO, F., et al., 1991. xác định một đột biến trong cácPorcine ryanodine thụ thể liên kết với ác tính hyperthermia. khoa học 253:4482451.
O'BRIEN, P. T., SHEN, H., CORY, C. R., et al., 1993. sử dụng một bài kiểm tra DNA2based cho cácđột biến liên quan đến hội chứng căng thẳng porcine (ác tính hyperthermia) trong 10.000chăn nuôi lợn. JAVMA, Vol. 203, số 6.

Kết quả (Việt) 2:

PSS kiểu gen GENE VÀ HIỆP HỘI VỚI CHẤT LƯỢNG THỊT
LỢN Một đặc điểm này ở F2 kiểu gen? để? số? thịt? chất lượng? đặc điểm đo sau khi giết mổ động vật F2?????.? ? VẬT LIỆU VÀ VÀ