phosphatidylinositol 4,5 bisphospha

phosphatidylinositol 4,5 bisphosphate (PIP2), wherein the membrane bound PIP3 serves as a signaling molecule to recruit proteins contain- ing the pleckstrin homology (PH) domain. These PH domain proteins, such as the phosphoinositide-dependent protein kinase (PDK) and protein kinase B (AKT) serine/threonine kinases, are thus activated and mediate further downstream signaling events [47]. The synthesis of PIP3 is negatively regulated primarily by the phosphatase and ten- sin homology (PTEN) phosphatase, which dephosphorylates PIP3 back to PIP2 [48]. Through PTEN, the PI3K pathway is subject to re- versible redox regulation by ROS generated by growth factor stimula-
tion. H2O2 was shown to oxidize and inactivate human PTEN through
disulfide bond formation between the catalytic domain Cys-124 and
Cys-71 residues [49,50]. It was also demonstrated that endogenously
generated ROS following treatment with peptide growth factors such as insulin, EGF, or PDGF causes oxidation of PTEN leading to the acti- vation of the PI3K pathway [51]. PTEN oxidation is reversed by perox-
iredoxin II, a cytoplasmic peroxiredoxin isoform that eliminates H2O2
generated in response to growth factors [49]. Thus the PI3K pathway
is regulated by ROS in a similar manner as the MAPK pathways; at the oxidative interface, protein phosphatases are directly oxidized by ROS resulting in sustained activation of the signaling pathways. It is note- worthy that various oxidants and ROS-producing chemicals activate transcription of a battery of antioxidant genes through a PI3K-NFE2- like 2 (Nrf2)-antioxidant response element (ARE) mechanism (Section 4), where PTEN knockdown enhances transcription of ARE- regulated antioxidant genes [52]; however, it is not known whether these oxidants induce PTEN oxidation and inhibition of phosphatase ac- tivity leading to gene activation.

4. Nrf2 and Ref1-mediated redox cellular signaling

In order to prevent oxidative stress, the cell must respond to ROS by mounting an antioxidant defense system. Antioxidant enzymes play a major role in reducing ROS levels; therefore, redox regulation
of transcription factors is significant in determining gene expression
profile and cellular response to oxidative stress. Redox factor-1 (Ref-1) (Fig. 4A), identified as a 37-kDa protein that facilitates Fos-
Jun DNA binding activity [53], was shown to be identical to an apuri-
nic/apyrimidinic (AP)-endonuclease named APE (AP endonuclease) [54] or human AP endonuclease 1 (HAP1) [55]. Thus Ref-1 is a multi- functional protein that not only regulates transcription factor activity, but also mediates base excision repair. The transcriptional regulatory function of Ref-1 is mediated through its redox activity on several transcription factors such as activator protein 1 (AP-1), p53, nuclear
factor kappa B (NFkB), and hypoxia inducible factor 1 (HIF-1) [56].
The N-terminus region of Ref-1 is responsible for redox activity
while the AP-endonuclease activity domain is located at the C- terminal region (Fig. 4A) [57]. Cys-65 of Ref-1 appears to be a major redox active site (along with Cys-93) that is required for the reduc- tion and increased DNA binding of targeted transcription factors [58]. Ref-1 activated the AP-1 transcription factor, Fos-Jun, through redox regulation of cysteine residues in the Fos-Jun DNA binding domains [53,59,60]. As shown in Fig. 4B, this cysteine is highly con- served in various human b-zip transcription factors, and except for CAATT enhancer binding protein (C/EBP) transcription factors, all may be regulated in a redox dependent manner by Ref-1, resulting in increased DNA binding and transcriptional activation of target genes. Indeed, it was demonstrated that this conserved cysteine in Nrf2 and cAMP response element binding (CREB) protein is subject to redox regulation. Site mutagenesis of Cys-506 interfered with mouse Nrf2-antioxidant response element (ARE) binding [61], in con- trast to mutation of Cys-300/310 of CREB which increased DNA bind- ing activity [61,62], demonstrating the importance of these redox regulated cysteine residues in transcriptional activity. Furthermore, Ref-1 was shown to be involved in the transcriptional activation of Nrf2-target genes under oxidative stress [63]. Oxidation and inactivation







































Fig. 4. Ref1-mediated redox cell signaling. A) The human Ref-1N-terminal region con- sists of the redox domain (REDOX; residues 1-127) and a 20 amino acid nuclear local-
ization sequence (NLS); the C-terminal region contains the apurinic/apyrimidinic
endonuclease domain (APE; residues 162-318). Cysteine-65 and -93 are major redox
active sites. Under oxidative stress, Ref-1 translocates into the nucleus by NLS-
importin-dependent or -independent pathways where Ref-1 regulates the activity of b-zip transcription factors (bZIP-TF) by redox mechanisms. Oxidized Ref-1 is subject to redox regulation by nuclear translocated thioredoxin (TRX) t

Kết quả (Việt) 1:

phosphatidylinositol 4,5 bisphotphat (PIP2), trong đó các màng tế bào ràng buộc PIP3 phục vụ như là một phân tử tín hiệu để tuyển dụng các protein chứa-ing pleckstrin tính tương đồng (PH) miền. Các protein PH tên miền như phụ thuộc vào phosphoinositide protein kinase (PDK) và protein kinase B (AKT) serine/threonine kinase, do đó được kích hoạt và trung gian tiếp downstream báo hiệu sự kiện [47]. Tổng hợp PIP3 tiêu cực được quy định chủ yếu bởi phosphatase và phosphatase mười-sin homology (PT), dephosphorylates PIP3 quay lại PIP2 [48]. Thông qua PT, đường PI3K là tùy thuộc vào re - versible redox quy định bởi ROS tạo ra bởi các yếu tố tăng trưởng stimula- tion. H2O2 đã được hiển thị để ôxi hóa và bất hoạt PT con người thông qua hình thành liên kết disulfua giữa miền xúc tác Cys-124 và CYS-71 các dư lượng [49,50]. Nó cũng đã được chứng minh rằng endogenously ROS được tạo ra sau khi điều trị với các yếu tố tăng trưởng peptide như insulin, EGF hoặc PDGF gây ra quá trình oxy hóa của PT dẫn đến acti-vation của con đường PI3K [51]. Quá trình oxy hóa PT được đảo ngược bởi perox- iredoxin II, một isoform tế bào chất peroxiredoxin giúp loại bỏ H2O2 được tạo ra để đáp ứng với yếu tố tăng trưởng [49]. Vì vậy con đường PI3K được quy định bởi ROS theo cách thức tương tự như con đường MAPK; tại giao diện oxy hóa, protein phosphatases trực tiếp được ôxi hóa bởi ROS kết quả duy trì kích hoạt của các con đường tín hiệu. Đó là xứng đáng lưu ý rằng các chất oxy hóa khác nhau và các ROS-sản xuất hóa chất kích hoạt phiên mã của một pin của các chất chống oxy hoá gen thông qua một PI3K-NFE2-giống như 2 (Nrf2)-chất chống oxy hoá phản ứng yếu tố (có) cơ chế (phần 4), nơi PT knockdown nâng cao phiên mã là - quy định chống oxi hóa gen [52]; Tuy nhiên, nó không được cho dù các chất oxy hóa gây oxy hóa PT và ức chế phosphatase ac-cao dẫn đến các gen kích hoạt. 4. Nrf2 và truyền tín hiệu tế bào trung gian Ref1 redox Để ngăn ngừa stress oxy hóa, tế bào phải trả lời các ROS bởi một hệ thống bảo vệ chống oxi hóa. Chất chống oxy hóa enzyme đóng một vai trò lớn trong việc giảm mức độ ROS; do đó, quy định redox Các yếu tố phiên mã là quan trọng trong việc xác định biểu hiện gen Hồ sơ và di động đáp ứng với stress oxy hóa. Redox yếu tố-1 (Ref-1) (hình 4A), được xác định là một protein 37-kDa tạo điều kiện cho Fos- Hoạt động ràng buộc Jun ADN [53], được thể hiện giống hệt với một apuri- NIC/apyrimidinic (AP)-endonuclease được đặt theo tên APE (AP endonuclease) [54] hoặc nhân AP endonuclease 1 (HAP1) [55]. Vì vậy Ref-1 là một đa chức năng đạm không chỉ quy định về hoạt động yếu tố phiên mã, nhưng cũng hàm cắt bỏ cơ sở sửa chữa. Transcriptional chức năng pháp lý của Ref-1 là trung gian thông qua redox hoạt động của nó trên một số các yếu tố phiên mã như activator protein 1 (AP-1), p53, hạt nhân yếu tố kappa B (NFkB), và hypoxia inducible yếu tố 1 (HIF-1) [56]. Miền N-terminus Ref-1 chịu trách nhiệm về hoạt động redox trong khi tên miền hoạt động AP-endonuclease tọa lạc tại khu vực nhà ga C (hình 4A) [57]. CYS-65 Ref-1 xuất hiện để là một redox lớn hoạt động trang web (cùng với Cys-93) là cần thiết cho reduc-tion và tăng DNA ràng buộc của yếu tố phiên mã nhắm mục tiêu [58]. REF-1 kích hoạt AP-1 phiên nhân tố, Fos-Jun, thông qua quy định redox của cysteine dư lượng trong các lĩnh vực ràng buộc Fos-Jun ADN [53,59,60]. Như minh hoạ trong hình 4B, cysteine này là rất côn-phục vụ trong các yếu tố phiên mã b-zip của con người, và ngoại trừ CAATT enhancer ràng buộc yếu tố phiên mã protein (C/EBP), tất cả có thể được quy định một cách phụ thuộc redox bởi Ref-1, kết quả là tăng DNA ràng buộc và transcriptional kích hoạt các gen mục tiêu. Thật vậy, nó đã được chứng minh rằng này cysteine bảo tồn Nrf2 và trại phản ứng yếu tố ràng buộc (CREB) protein là tùy thuộc vào quy định redox. Trang web mutagenesis của Cys-506 can thiệp với chuột Nrf2-chất chống oxy hoá phản ứng yếu tố (có) ràng buộc [61], trong con-trast đến đột biến Cys-300/310 của CREB gia tăng hoạt động ràng buộc-ing ADN [61,62], chứng tỏ tầm quan trọng của redox quy định cysteine dư lượng transcriptional hoạt động. Hơn nữa, Ref-1 đã được hiển thị để được tham gia trong việc kích hoạt transcriptional của gen Nrf2 mục tiêu bị oxy hóa căng thẳng [63]. Quá trình oxy hóa và ngừng hoạt động Hình 4. Redox Ref1 qua trung gian tế bào tín hiệu. A) các nhân Ref-1N-ga vùng côn-sists miền redox (REDOX; dư lượng 1-127) và một acid amin 20 hạt nhân địa phương- iZATION trình tự (NLS); vùng C-ga chứa apurinic/apyrimidinic tên miền endonuclease (APE; dư lượng 162-318). Cysteine-65 và-93 là chính redox Các trang web đang hoạt động. Bị oxy hóa căng thẳng, Ref-1 translocates thành hạt nhân của đội NLS- importin-phụ thuộc hay - độc lập con đường nơi Ref-1 quy định về hoạt động của các yếu tố phiên mã b-zip (bZIP-lực lượng đặc nhiệm) bởi redox cơ chế. Oxy hóa Ref-1 là tùy thuộc vào quy định redox bởi hạt nhân translocated thioredoxin (SG) t

Kết quả (Việt) 2:

phosphatidylinositol 4,5 bisphosphate (PIP2), trong đó PIP3 màng bị ràng buộc phục vụ như là một phân tử tín hiệu tuyển dụng protein đựng có ing miền pleckstrin tương đồng (PH). Những protein miền PH, như kinase phosphoinositide phụ thuộc vào protein (PDK) và protein kinase B (AKT) serine / threonine kinase, là như vậy, kích hoạt và làm trung gian hơn nữa các sự kiện truyền tín hiệu hạ lưu [47]. Việc tổng hợp PIP3 được quy định tiêu cực chủ yếu bởi phosphatase và khách thuê tội tương đồng (PTEN) phosphatase, mà dephosphorylates PIP3 lại PIP2 [48]. Qua PTEN, con đường PI3K là đối tượng để tái điều tiết oxi hóa khử versible bởi ROS tạo ra bởi yếu tố tăng trưởng stimula-
tion. H2O2 đã được hiển thị để oxy hóa và bất hoạt PTEN con người thông qua
disulfide hình thành liên kết giữa các miền xúc tác Cys-124 và
Cys-71 dư lượng [49,50]. Nó cũng đã được chứng minh rằng nội sinh
tạo ra ROS điều trị sau với các yếu tố tăng trưởng peptide như insulin, EGF, hoặc PDGF gây ra quá trình oxy hóa của PTEN dẫn đến vation hoạt hoá của quá trình PI3K đường [51]. Quá trình oxy hóa PTEN được đảo ngược bởi perox-
iredoxin II, một peroxiredoxin isoform tế bào chất mà loại bỏ H2O2
tạo ra để đáp ứng với các yếu tố tăng trưởng [49]. Như vậy con đường PI3K
được quy định bởi ROS trong một cách tương tự như các đường MAPK; tại giao diện oxy hóa, phosphatase protein bị oxy hóa trực tiếp bởi ROS dẫn kích hoạt duy trì các đường dẫn tín hiệu. Đó là Lưu ý- xứng đáng mà oxy hóa khác nhau và các hóa chất ROS sản xuất kích hoạt phiên mã của một pin của các gen chống oxy hóa thông qua một PI3K-NFE2- như 2 (Nrf2) yếu tố phản ứng -antioxidant (ĐƯỢC) cơ chế (Phần 4), nơi PTEN rời tăng cường phiên mã của được- quy định gen chống oxy hóa [52]; Tuy nhiên, nó không biết liệu những chất oxy hóa gây ra quá trình oxy hóa PTEN và ức chế của phosphatase ac- tivity dẫn đến kích hoạt gen. 4. Nrf2 và Ref1 qua trung gian tín hiệu tế bào oxi hóa khử Để ngăn chặn sự oxy hóa, các tế bào phải đáp ứng với ROS bằng cách lắp một hệ thống phòng thủ chống oxy hóa. Enzym chống oxy hóa đóng một vai trò quan trọng trong việc giảm nồng độ ROS; Do vậy, quy định oxi hóa khử của các yếu tố phiên mã có ý nghĩa trong việc xác định biểu hiện gen hồ sơ và phản ứng của tế bào để stress oxy hóa. Redox factor-1 (Ref-1) (. Hình 4A), được xác định là một protein 37 kDa tạo điều kiện Fos- hoạt động ràng buộc Tháng Sáu DNA [53], được thể hiện là giống hệt với một apuri- nic / apyrimidinic (AP) - endonuclease tên APE (AP endonuclease) [54] hoặc con người AP endonuclease 1 (HAP1) [55]. Như vậy Ref-1 là một protein đa chức năng mà không chỉ quy định các hoạt động tố phiên mã, mà còn làm trung gian cơ sở sửa chữa cắt bỏ. Các chức năng điều tiết phiên mã của Ref-1 là trung gian thông qua hoạt động khử oxy hóa của nó trên một số yếu tố phiên mã như protein hoạt hóa 1 (AP-1), p53, hạt nhân tố kappa B (NFkB), và giảm oxy yếu tố cảm ứng 1 (HIF-1) [56]. các khu vực N-ga cuối của Ref-1 chịu trách nhiệm về hoạt động oxi hóa khử trong khi miền hoạt động AP-endonuclease nằm tại khu vực bến C- (Fig. 4A) [57]. Cys-65 của Ref-1 dường như là một oxi hóa khử trang web hoạt động chính (cùng với Cys-93) là cần thiết cho sự phân reduc- và tăng DNA ràng buộc của các yếu tố phiên mã nhắm mục tiêu [58]. Ref-1 hoạt AP-1 yếu tố phiên mã, Fos-Jun, thông qua quy định oxi hóa khử dư lượng cysteine ​​trong các lĩnh vực liên kết Fos-Jun DNA [53,59,60]. Như thể hiện trong hình. 4B, cystein này là rất cao con- phục vụ trong các yếu tố phiên mã b-zip con người khác nhau, và ngoại trừ ràng buộc tăng cường protein CAATT (C / EBP) các yếu tố phiên mã, tất cả có thể được điều chỉnh một cách phụ thuộc oxy hóa khử bởi Ref-1, dẫn đến tăng DNA ràng buộc và kích hoạt phiên mã của các gen mục tiêu. Thật vậy, nó đã được chứng minh rằng cysteine ​​này được bảo tồn trong Nrf2 và yếu tố phản ứng cAMP ràng buộc (CREB) protein là tùy thuộc vào quy định oxi hóa khử. Site đột biến của Cys-506 đã can thiệp với các phần tử phản ứng chất chống oxy hóa Nrf2 chuột (ĐƯỢC) ràng buộc [61], trong Trast niệm đột biến của Cys-300/310 của CREB mà tăng DNA bind- ing hoạt động [61,62], chứng minh tầm quan trọng của những oxi hóa khử quy định dư lượng cysteine ​​trong hoạt động phiên mã. Hơn nữa, Ref-1 đã được chứng minh có liên quan đến việc kích hoạt phiên mã của các gen Nrf2 mục tiêu dưới oxy hóa căng thẳng [63]. Quá trình oxy hóa và bất hoạt hình. 4. Ref1 qua trung gian truyền tín hiệu tế bào oxi hóa khử. A) Các nhân khu vực Ref-1N-terminal sists góp của miền oxi hóa khử (Redox; dư lượng 1-127) và một axit amin hạt nhân 20 local- tự hóa (NLS); khu vực đầu C chứa apurinic / apyrimidinic miền endonuclease (APE; dư lượng 162-318). Cysteine-65 và -93 là oxi hóa khử lớn các trang web hoạt động. Khi bị stress oxy hóa, Ref-1 translocates vào nhân bởi NLS- đường importin phụ thuộc hoặc -independent nơi Ref-1 quy định về hoạt động của các yếu tố phiên mã b-zip (bzip-TF) bởi cơ chế oxi hóa khử. Oxy hóa Ref-1 là tùy thuộc vào quy định oxi hóa khử bằng hạt nhân translocated thioredoxin (TRX) t